陳珍珍，裴昆，程奇珍，常亮

1.江西省藥品檢驗(yàn)檢測(cè)研究院，國(guó)家藥品監(jiān)督管理局中成藥質(zhì)量評(píng)價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江西省藥品與醫(yī)療器械質(zhì)量工程技術(shù)研究中心，江西 南昌 330029；2.江西省藥品檢查員中心，江西省疫苗檢查中心，江西 南昌 330029

吸入用七氟烷是一種鹵代吸入性全身麻醉劑，揮發(fā)性液體，汽化后使用，屬于國(guó)家基本藥物目錄品種，主要用于成人和兒科患者的全身麻醉的誘導(dǎo)和維持，院內(nèi)手術(shù)及門(mén)診手術(shù)均適用［1-4］。為保證藥品的安全，國(guó)家藥品監(jiān)督管理局明確要求從2018年1 月起所有新藥和仿制藥需進(jìn)行元素雜質(zhì)的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。有些元素雜質(zhì)不僅會(huì)對(duì)藥品的療效、穩(wěn)定性產(chǎn)生不好的影響［5-7］，還可能由于潛在毒性引發(fā)藥物毒副作用。由于元素雜質(zhì)不能為患者提供任何治療效果，所以從藥物安全性角度考慮，有必要對(duì)吸入用七氟烷中元素雜質(zhì)進(jìn)行分析考察。

本研究采用有較高靈敏性和準(zhǔn)確性的電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）法［8-13］建立測(cè)定吸入用七氟烷中釩（V）、鉻（Cr）、鈷（Co）、鎳（Ni）、銅（Cu）、砷（As）、硒（Se）、銀（Ag）、鎘（Cd）、鋇（Ba）、鉈（Tl）、鉛（Pb）12種重金屬元素含量的方法，為其質(zhì)量控制和安全性評(píng)價(jià)提供參考，并將其應(yīng)用于6 批次吸入用七氟烷的元素檢測(cè)。

1 材料

1.1 儀器

Synergguv millipore 超純水制水機(jī)（密理博中國(guó)有限公司），安捷倫7700 ICP-MS 電感耦合等離子體質(zhì)譜儀。

1.2 試劑與對(duì)照品

硝酸，來(lái)源：fluka，批號(hào)：BCBP0680V；混合（包含釩、鉻、鈷、鎳、銅、砷、硒、銀、鎘、鋇、鉈、鉛等元素）對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)溶液，濃度均為10 μg/mL，購(gòu)自安捷倫科技有限公司；內(nèi)標(biāo)對(duì)照品溶液：ICP-MS內(nèi)標(biāo)（含Bi、Ge、In、Rh、Sc 等內(nèi)標(biāo)元素）溶液，濃度為100 μg/mL，購(gòu)自安捷倫科技股份有限公司。

1.3 樣品信息

本次試驗(yàn)樣品由3 家企業(yè)提供，共6 批次。A 企業(yè)三批（規(guī)格120 mL），批號(hào)18040431、18110431、18122231，編號(hào)Y1～Y3；B 企業(yè)兩批（規(guī)格100 mL），批號(hào)65180610、65180609，編號(hào)Y4～Y5；C 企業(yè)一批（規(guī)格250 mL），批號(hào)C038180701，編號(hào)Y6。

2 方法與結(jié)果

2.1 試驗(yàn)條件

ICP-MS 儀器參數(shù)：射頻功率：1.53 KW；碰撞氣：高純氦氣；載氣：高純氬氣；載氣流量：1.05 L/min；冷卻溫度：4 ℃；等離子氣流量：15 L/min；采樣錐孔徑：1.0 mm；四級(jí)桿真空度：3.02×10-4Pa；數(shù)據(jù)采集重復(fù)次數(shù)：3 次；出口溫度：41.5 ℃；入口溫度：33.8 ℃。

測(cè)定法：測(cè)定時(shí)選取的同位素為51V、53Cr、59Co、60Ni、63Cu、75As、82Se、107Ag、111Cd、137Ba、205Tl、208Pb，其中51V、53Cr 以45Sc 作為內(nèi)標(biāo)，59Co、60Ni、63Cu、75As、82Se、以72Ge 作為內(nèi)標(biāo)，107Ag 以103Rh 作為內(nèi)標(biāo)，111Cd、37Ba 以115In 作為內(nèi)標(biāo),205Tl、208Pb 以209Bi 作為內(nèi)標(biāo)。以測(cè)量值為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。在同樣的分析條件下進(jìn)行空白試驗(yàn)和空白校正。

2.2 溶液制備

2.2.1 混合內(nèi)標(biāo)溶液精密量取1 mL 內(nèi)標(biāo)溶液置100 mL 量瓶中，用2%硝酸稀釋至刻度，搖勻，即得濃度為1 μg/mL 的混合內(nèi)標(biāo)溶液。

2.2.2 供試品溶液精密量取吸入用七氟烷10 mL 置塑料離心管中，80 ℃水浴上揮干，再精密加入2%硝酸溶液10 mL，超聲15 min，搖勻，即得。

2.2.3 空白溶液除不加樣品外，按“2.2.2”項(xiàng)下方法制備空白溶液。

2.3 線性關(guān)系

精密量取混合對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)溶液（濃度均為10 μg/mL）適量，用2%硝酸稀釋制成各元素雜質(zhì)濃度為0、1、4、8、10、20、40、60、80、100、200、400 ng/mL混合對(duì)照品溶液。取混合對(duì)照品溶液和混合內(nèi)標(biāo)溶液按“2.1”項(xiàng)下試驗(yàn)條件進(jìn)行測(cè)定，對(duì)照品溶液線性關(guān)系試驗(yàn)結(jié)果詳見(jiàn)表1。

2.4 檢測(cè)限考察

取“2.2.3”項(xiàng)下空白溶液，連續(xù)測(cè)定11 次，計(jì)算儀器響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)偏差，以測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)偏差的3 倍為各待測(cè)元素的檢測(cè)限，見(jiàn)表1。

表1 線性關(guān)系與檢測(cè)限

2.5 精密度考察

取“2.3”項(xiàng)下濃度80 ng/mL 的混合對(duì)照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣測(cè)定6 次，記錄測(cè)定結(jié)果。結(jié)果各元 素V、Cr、Co、Ni、Cu、As、Se、Ag、Cd、Ba、Tl、Pb 測(cè)定結(jié)果的RSD 分別為1.00%、1.18%、0.71%、0.66%、1.02%、0.99%、2.69%、0.81%、0.43%、1.05%、0.40%、0.52%（n=6），表明儀器精密度良好。

2.6 重復(fù)性考察

精密量取樣品6 份（編號(hào)Y1）各10 mL，置塑料離心管中，分別精密加入混合對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)溶液（濃度均為10 μg/mL）100 μL，置80 ℃水浴上揮干，再精密加入2%硝酸溶液10 mL，超聲15 min，搖勻，作為重現(xiàn)性試驗(yàn)溶液；進(jìn)樣測(cè)定，記錄測(cè)定結(jié)果。結(jié)果樣品中各元素V、Cr、Co、Ni、Cu、As、Se、Ag、Cd、Ba、Tl、Pb 測(cè)定結(jié)果的RSD 分別為1.17%、2.54%、1.05%、0.79%、1.32%、0.77%、3.56%、2.12%、1.01%、0.99%、0.87%、0.87%（n=6），表明本方法重復(fù)性好。

2.7 加樣回收率試驗(yàn)

精密量取樣品9 份（編號(hào)Y1）各10 mL，置塑料離心管中，分別精密加入混合對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)溶液（濃度均為10 μg/mL）60、60、60、100、100、100、200、200、200 μL，置80 ℃水浴上揮干，再精密加入2%硝酸溶液10 mL，超聲15 min，搖勻，做為12種元素回收試驗(yàn)溶液，進(jìn)樣測(cè)定；12種元素平均回收試驗(yàn)結(jié)果詳見(jiàn)表2。

表2 回收試驗(yàn)結(jié)果（n=9）

2.8 樣品中元素雜質(zhì)的測(cè)定

取6 批次市售吸入用七氟烷，按“2.2”項(xiàng)下方法處理，進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算樣品元素雜質(zhì)的含量，三家企業(yè)的6 批次結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 樣品測(cè)定結(jié)果（ng/mL）

3 討論

本次研究對(duì)三家企業(yè)市售6 批吸入用七氟烷進(jìn)行測(cè)定，參照ICH Q3D 元素雜質(zhì)指南對(duì)制劑潛在元素雜質(zhì)限度規(guī)定［14］，分析結(jié)果顯示各元素雜質(zhì)均符合限度要求，表明本品在使用時(shí)重金屬安全風(fēng)險(xiǎn)較低。元素雜質(zhì)的分類(lèi)、限度及吸入用七氟烷樣品中元素雜質(zhì)含量范圍詳見(jiàn)表4。

表4 元素雜質(zhì)的分類(lèi)、限度及樣品中元素雜質(zhì)含量范圍

吸入用七氟烷是揮發(fā)性液體，沸點(diǎn)較低，若采用微波消解法作為樣品前處理容易引起爆炸。由于樣品中元素雜質(zhì)含量均為微量，為提高檢測(cè)準(zhǔn)確度和安全性，故采用水浴揮干再酸溶解的前處理方式。ICP-MS 是一種將ICP 技術(shù)和質(zhì)譜結(jié)合在一起的分析儀器，具有靈敏度高、速度快、樣品量小的優(yōu)點(diǎn)，可以同時(shí)完成幾十個(gè)元素的定量測(cè)定。本文采用ICP-MS 法測(cè)定吸入用七氟烷中12種元素雜質(zhì)，經(jīng)方法學(xué)評(píng)價(jià)顯示此方法干擾少，準(zhǔn)確性好、靈敏度高，可適用于吸入用七氟烷中12種元素雜質(zhì)的檢測(cè)分析。