郭俊賢 李麗萍

（河南省濮陽市安陽地區(qū)醫(yī)院消化內(nèi)科 安陽455000）

原發(fā)性胃癌是臨床最多見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤性疾病之一，目前疾病早期確診率仍不高[1]。 胃蛋白酶原（PG）、胃泌素（G）均是正常胃黏膜細(xì)胞分泌的消化酶，可反映不同胃黏膜組織的形態(tài)與功能，檢測其含量對胃部疾病的早期篩查、診斷具有一定臨床意義，且檢測操作可重復(fù)進(jìn)行、無侵入性損害[2]。 原發(fā)性胃癌患者是否存在PG、G 等消化酶含量的特殊改變，換言之，檢測PG、G 含量能否作為原發(fā)性胃癌診斷及病情判斷的輔助指標(biāo)，仍存在爭議。 本研究對比胃部良惡性疾病患者血清中PG、G 含量的差異，并進(jìn)一步探討其含量與胃癌細(xì)胞惡性生物學(xué)行為的內(nèi)在聯(lián)系， 以期明確PG、G 在原發(fā)性胃癌診斷及治療指導(dǎo)中的價(jià)值。 現(xiàn)報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取 2017 年 8 月 ~2019 年 10 月在本院接受手術(shù)治療的原發(fā)性胃癌患者98 例作為胃癌組，均經(jīng)病理確診，入院前未經(jīng)其他保守治療、術(shù)前無新輔助化療。 同期在本院進(jìn)行胃鏡檢查并切除息肉的胃息肉患者77 例作為胃息肉組。 胃癌組男 51 例，女 47 例；年齡 41~78 歲，平均（69.26±8.53）歲。 胃息肉組男 40 例，女 37 例；年齡 38~79歲，平均（68.71±9.62）歲。 兩組胃部疾病患者的性別、年齡比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)通過研究計(jì)劃書。

1.2 血清PG、G 含量檢測 入組即刻（未經(jīng)任何治療），留取兩組患者外周血標(biāo)本3 ml 并分離血清，采用全自動(dòng)酶標(biāo)儀檢測其中胃蛋白酶原Ⅰ（PGⅠ）、胃蛋白酶原Ⅱ（PGⅡ）、胃泌素 -17（G-17）的含量，計(jì)算PGⅠ/PGⅡ比值。

1.3 胃部病灶組織中惡性分子表達(dá)量檢測 留取原發(fā)性胃癌患者術(shù)中胃癌病灶組織標(biāo)本、 胃息肉患者的息肉組織標(biāo)本，采用熒光定量PCR 法檢測其中胃癌相關(guān)增殖、侵襲基因表達(dá)量，按照試劑盒說明書進(jìn)行操作并計(jì)算表達(dá)量。 具體胃癌相關(guān)增殖基因包括 Gli1、Septin2、Klotho， 胃癌相關(guān)侵襲基因包括FHL2、IGF1R、FMNL2、Exosomes、GKN2。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 胃蛋白酶原及胃泌素含量，增殖、侵襲基因表達(dá)量均屬于計(jì)量資料，以（）表示，由具備專業(yè)統(tǒng)計(jì)學(xué)資質(zhì)的人員（同一人）將其錄入軟件SPSS24.0 中，經(jīng)t檢驗(yàn)計(jì)算得到統(tǒng)計(jì)值P，經(jīng)Pearson 檢驗(yàn)進(jìn)行相關(guān)性分析。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清PG、G 含量比較 胃癌組患者血清PGⅠ、PGⅡ含量及PGⅠ/PGⅡ比值低于胃息肉組，G-17 含量高于胃息肉組， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。 見表 1。

表1 兩組血清 PG、G 含量比較（）

表1 兩組血清 PG、G 含量比較（）

組別 n PGⅠ（μg/L） PGⅡ（μg/L） PGⅠ/PGⅡ G-17（pmol/L）胃息肉組胃癌組77 98 tP 109.46±13.26 63.21±10.18 26.105 0.000 9.32±1.27 8.07±0.95 7.448 0.000 11.46±1.94 7.29±0.81 19.260 0.000 11.37±1.98 17.60±2.97-15.843 0.000

2.2 兩組胃癌相關(guān)增殖基因表達(dá)量比較 胃癌組病灶組織中增殖基因Gli1、Septin2 mRNA 的表達(dá)量高于胃息肉組，Klotho mRNA 的表達(dá)量低于胃息肉組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。 見表 2。

表2 兩組胃癌相關(guān)增殖基因表達(dá)量比較（）

表2 兩組胃癌相關(guān)增殖基因表達(dá)量比較（）

組別 n Gli1 Septin2 Klotho胃息肉組胃癌組tP 77 98 100 138.92±15.71-18.928 0.000 100 151.07±18.95-21.413 0.000 100 76.21±0.85 23.462 0.000

2.3 兩組胃癌相關(guān)侵襲基因表達(dá)量比較 胃癌組病灶中侵襲基因 FHL2、IGF1R、FMNL2、Exosomes mRNA 的表達(dá)量高于胃息肉組，GKN2 mRNA 的表達(dá)量低于胃息肉組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表3。

表3 兩組胃癌相關(guān)侵襲基因表達(dá)量比較（）

表3 兩組胃癌相關(guān)侵襲基因表達(dá)量比較（）

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2.4 相關(guān)性分析 Pearson 檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)， 原發(fā)性胃癌患者血清中PGⅠ、PGⅡ含量及PGⅠ/PGⅡ比值與Gli1、Septin2、FHL2、IGF1R、FMNL2、Exosomes mRNA的表達(dá)量呈負(fù)相關(guān)（r=-0.314、-0.342、-0.294、-0.307、-0.318、-0.344，P＜0.05），與 Klotho、GKN2 mRNA 的表達(dá)量呈正相關(guān)（r=0.351、0.389，P＜0.05）。 原發(fā)性胃癌患者血清中 G-17 的含量與 Gli1、Septin2、FHL2、IGF1R、FMNL2、Exosomes mRNA 的表達(dá)量呈正相關(guān)（r=0.375、0.309、0.412、0.423、0.297、0.388，P＜0.05），與 Klotho、GKN2 mRNA 的表達(dá)量呈負(fù)相關(guān)（r=-0.374、-0.291，P＜0.05）。

3 討論

PG 是胃蛋白酶的前體， 包括PGⅠ、PGⅡ兩個(gè)亞型，PGⅠ/PGⅡ比值水平反映胃黏膜萎縮程度，隨黏膜萎縮加劇，PGⅠ/PGⅡ比值進(jìn)行性下降[3]。 G 是由胃幽門部的G 細(xì)胞分泌， 哺乳類動(dòng)物的G 均為17 個(gè)氨基酸的多肽、即G17[4]。本研究中胃癌組患者PGⅠ、PGⅡ含量及PGⅠ/PGⅡ比值均較良性病變患者大幅下降，血清G-17 含量高于胃息肉組患者。目前關(guān)于PGⅠ/PGⅡ及G17 含量能否反映胃癌細(xì)胞惡性生物學(xué)行為這一命題尚不清楚。

Gli1 是Hedgehog 信號通路的核心分子， 該通路激活已被證實(shí)與多種惡性腫瘤細(xì)胞的增殖侵襲相關(guān)[5]。Septin2 是一種細(xì)胞骨架成分，參與細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)運(yùn)輸、細(xì)胞周期及凋亡等生理過程調(diào)控，參與腫瘤惡性增殖過程[6]。 Klotho 是與抗衰老相關(guān)的基因，在多種惡性腫瘤組織中呈低表達(dá)，被認(rèn)為是一種抑癌基因。 本研究胃癌組病灶中Gli1、Septin2 mRNA 的表達(dá)量較高，Klotho mRNA 的表達(dá)量較低， 與各個(gè)基因的病理學(xué)作用一致。 相關(guān)性分析進(jìn)一步證實(shí)，原發(fā)性胃癌患者血清PGⅠ、PGⅡ含量及PGⅠ/PGⅡ比值與Gli1、Septin2 mRNA 的表達(dá)量呈負(fù)相關(guān)，與Klotho mRNA 的表達(dá)量呈正相關(guān)； 而G-17 含量與Gli1、Septin2 mRNA 的表達(dá)量呈正相關(guān)， 與 Klotho mRNA 的表達(dá)量呈負(fù)相關(guān)，說明PG、G 的含量異常可客觀反映胃癌細(xì)胞的增殖活力。

腫瘤細(xì)胞的侵襲也由多種分子介導(dǎo)。 FHL2、FMNL2 通過促進(jìn)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化使細(xì)胞獲得侵襲能力；IGF1R 通過PI3K/AKT 信號通路促進(jìn)癌細(xì)胞增殖、侵襲、遷移；Exosomes 通過刺激血管新生、幫助細(xì)胞免疫逃逸等途徑加速癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移；GKN2 是GKNs 的亞型， 有助于維持胃上皮內(nèi)環(huán)境并抑制腫瘤發(fā)生， 其異常低表達(dá)是胃癌發(fā)生的重要原因。 本研究胃癌組病灶中 FHL2、IGF1R、FMNL2、Exosomes mRNA 的表達(dá)量較高且與PGⅠ/PGⅡ比值呈負(fù)相關(guān)、與G-17 呈正相關(guān)，GKN2 mRNA 的表達(dá)量較低且與PGⅠ/PGⅡ比值呈正相關(guān)、 與G-17呈負(fù)相關(guān)， 說明原發(fā)性胃癌患者血清中PG、G 含量可客觀反映癌細(xì)胞的侵襲活力。

綜上所述， 原發(fā)性胃癌患者血清中PG、G 含量異于良性病變者， 且含量與癌細(xì)胞的增殖及侵襲活力直接相關(guān)。 早期檢測血清PG、G 含量可作為原發(fā)性胃癌篩查、輔助診斷、病情判斷等重要手段。