嚴欣亮

（江陰市第三人民醫(yī)院，江蘇 江陰214400）

我院檢驗科生化室配有一臺mindry BS-2000全自動生化分析儀，檢驗科門急診部配有一臺美國強生公司的VITROS-350型全自動干化學(xué)分析儀，兩臺生化分析儀檢測同一份標(biāo)本所得結(jié)果有時會出現(xiàn)明顯不同，給臨床醫(yī)生帶來困惑，給診斷、評估病情、解釋結(jié)果帶來一定困難?，F(xiàn)用科學(xué)的方法對兩臺生化儀進行比較分析，深入了解兩種分析方法的特點和各自的優(yōu)缺點，為我院實驗室用兩種方法檢測結(jié)果的可比性提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 儀器mindry BS-2000全自動生化分析儀；強生VITROS-350全自動干化學(xué)分析儀。

1.2 試劑mindry BS-2000全自動生化分析儀所有試劑均為深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司提供的配套試劑；強生VITROS-350全自動干化學(xué)分析儀試劑由強生公司生產(chǎn)的用于該儀器的原裝干片試劑。

1.3 樣本 隨機抽取我院住院或門診患者無脂血、無溶血正常值和異常值新鮮血清40份，標(biāo)本濃度范圍盡量覆蓋當(dāng)日最高濃度和最低濃度；1例新鮮配置混合血清15mL（混合后檢測TP 70.5g/L，BUN 5.6mmol/L，ALT 45U/L）；4例生化質(zhì)控血清（批號1227UN及909UE）各測兩次。

1.4 方法

1.4.1 實驗前準(zhǔn)備：校準(zhǔn)將要對比的兩個系統(tǒng)，按照兩臺儀器檢測方法要求分別完成質(zhì)控，保證兩臺儀器均在良好的質(zhì)量控制狀態(tài)。

1.4.2 干化學(xué)法：強生VITROS-350用原裝校準(zhǔn)液進行校準(zhǔn)。（強生公司提供校準(zhǔn)液）

1.4.3 濕化學(xué)法：mindry BS-2000生化分析儀使用“江蘇朗道生物技術(shù)有限公司”校正液校正（批號CAL2351）；

1.4.4 質(zhì)控品選用“江蘇朗道生物技術(shù)有限公司”提供的干粉質(zhì)控品，用雙蒸餾水復(fù)溶后使用。40份患者血清標(biāo)本及4例生化質(zhì)控血清樣本分別在兩臺生化分析 儀 上 測 定ALT、AST、GGT、ALP、LDH、CK、BUN、Glu、UA、CREA、TP、ALB、TB等13個項目，所有測試在2小時內(nèi)完畢。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 17.0軟件分析，對13對26個數(shù)據(jù)進行正態(tài)性檢驗，即K-S檢驗，符合正態(tài)性分布的數(shù)據(jù)再進行方差齊性檢驗，呈正態(tài)性分布，且方差齊的各組數(shù)據(jù)采用配對t檢驗，非正態(tài)分布或方差不齊的各組數(shù)據(jù)采用秩和檢驗，開展直線相關(guān)與回歸分析。

2 結(jié)果

2.1 兩臺儀器當(dāng)月質(zhì)控結(jié)果CV%均控制在5%以內(nèi)，可見兩儀器性能良好，測試結(jié)果穩(wěn)定、可靠，精密度好。

2.2 重復(fù)性實驗 取新采集的新鮮血液配置的混合血清，用兩臺儀器分別測20次，分別計算平均值、標(biāo)準(zhǔn)差及批內(nèi)CV%，批內(nèi)CV%均小于國家規(guī)定的CV%[1-2]。結(jié)果表明，使用試劑穩(wěn)定，儀器狀態(tài)良好，結(jié)果重復(fù)性好。

2.3 對兩臺生化分析儀的兩組檢測結(jié)果分別進行正態(tài)性檢驗，即K-S檢驗，其中TP、GLU、UA、ALB、ALP兩組數(shù)據(jù)分別P>0.05，數(shù)據(jù)呈正態(tài)分布。對這五組數(shù)據(jù)進行方差齊性分析P>0.05，說明方差齊。因此，用參數(shù)檢驗中的配對樣本t檢驗。見表1

表1 成對樣本t檢驗

2.4 BUN、TB、CREA、LDH、ALT、AST、GGT、CK正態(tài)性分析的P<0.05，數(shù)據(jù)不呈正態(tài)分布，可用非參數(shù)檢驗中的秩和檢驗。經(jīng)檢驗，GLU、ALB、ALP、TB的P>0.05，差異無統(tǒng)計學(xué)意義；CREA、LDH、ALT、AST、GGT、CK、BUN、TP、UA各項的P<0.05，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。見表2

表2 成組設(shè)計兩樣本比較的秩和檢驗

2.5 對兩臺儀器的分析結(jié)果進行線性檢驗線性回歸分析，所測項目的r（相關(guān)系數(shù)）都大于0.94，相關(guān)性檢驗P<0.01；結(jié)果顯示兩臺儀器分析結(jié)果的相關(guān)性和線性都良好。見表3

表3 干化學(xué)與濕化學(xué)法測定結(jié)果回歸方程及線性評價（n=44，±s）

表3 干化學(xué)與濕化學(xué)法測定結(jié)果回歸方程及線性評價（n=44，±s）

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3 討論

濕化學(xué)法和干化學(xué)法血清標(biāo)本生化項目測定的形式不同，一個在液體試劑環(huán)境，一個是干片狀態(tài)，濕化學(xué)法的濃度測定基于光的朗伯-比爾定律，而干化學(xué)法測定的原理是入射光通過基質(zhì)被吸收后，檢測反射光的強度來計算出被測物質(zhì)的濃度[3]。

濕化學(xué)分析是最常用的方法，經(jīng)多年發(fā)展、完善，已形成一套完整成熟的全自動分析方法，而干化學(xué)分析法是近幾年隨著POCT的發(fā)展而出現(xiàn)的一種新的分析方法，其采用比較獨特的多涂層膜技術(shù)，選擇性的阻留或去除干擾物質(zhì)，能掩蓋待測物質(zhì)的有色物質(zhì)，為其提供反應(yīng)背景。能將反應(yīng)原理的各種物理反應(yīng)、化學(xué)反應(yīng)在各個分層中進行，使其一層反應(yīng)完成后所得產(chǎn)物又可進入另一層中進行反應(yīng)，使各層可給出一種特定的環(huán)境用以控制反應(yīng)序列和反應(yīng)時間[4]。從而引導(dǎo)反應(yīng)序列。儀器吸樣部分有壓力感受系統(tǒng)，樣品凝固或者過少都能被感受到，杜絕了結(jié)果錯誤；其檢測所用的干片、吸頭等都是一次性用品；沒有管道系統(tǒng)，也沒有比色杯。因此，不需要蒸餾水沖洗，完全避免了樣品間、試劑間的干擾；所需樣品極少，分析速度快，可同時檢測多個生化項目，干化學(xué)法已成為急診生化檢測的又一新手段[5-6]。

干化學(xué)、濕化學(xué)兩種分析方法測定的部分生化項目中TB、BUN、CREA、ALT、AST、ALP、GGT的測定結(jié)果存在差異，經(jīng)過相關(guān)回歸分析，發(fā)現(xiàn)兩種方法所測結(jié)果的相關(guān)性良好（r>0.93），可見，兩種分析方法的差異屬于系統(tǒng)誤差，其產(chǎn)生的原因主要是試劑加入方式不同及分析原理不同所引起。誤差屬于系統(tǒng)誤差，濕化學(xué)法又比較成熟，在實際工作中，應(yīng)該以濕化學(xué)法分析作為參考標(biāo)準(zhǔn)。方法用相同的校準(zhǔn)品每周同時進行校準(zhǔn)，干化學(xué)法利用線性方程=a+bx，設(shè)定a和b就可獲得一致的結(jié)果。值得一提的是LDH，兩種儀器的測定結(jié)果差異較大，干化學(xué)法測定LDH采用丙酮酸和NADH在LDH作用下生成乳酸和NAD+與濕化學(xué)法相反。但相關(guān)性良好（r=0.9876），同樣的可以利用線性方程=a+bx，設(shè)定a和b值，也可獲得一致的結(jié)果。因此，要定期對不同分析儀進行校準(zhǔn)，并比對檢測結(jié)果，保證每臺儀器測定結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性，為臨床提供有參考價值的數(shù)據(jù)。