余 悅，梁柱業(yè)，肖樹雄

(國家藥品監(jiān)督管理局化妝品風險評估重點實驗室/廣東省藥品檢驗所，廣州 510663)

隨著我國國民消費升級，“天然”“健康”的產品成為時下消費熱點，“綠色”“天然”的植物源化妝品原料受到追捧，化妝品生產企業(yè)在天然植物原料上下足功夫，研發(fā)以植物提取物為賣點的化妝品。以植物精油為例，植物精油存在于天然植物體中，是植物體內的揮發(fā)性成分，因其氣味芬芳，且具有顯著的生物活性，如抗氧化、抗菌等，在香水、美白、祛痘產品中發(fā)揮著重要作用。曹陽[1]研究發(fā)現，玫瑰精油對黑色素含量的抑制作用比曲酸陽性參照組好。姜洪芳等[2]研究結果表明，薰衣草精油對酪氨酸酶活性的抑制表現出良好的劑量-效應關系。王玥等[3]研究表明，廣藿香精油起到抑制炎癥信號轉導和繼發(fā)性炎癥介質生成的作用。此外，近年來芳香療法在積極心理學領域興起，未來可能有更強保健作用宣稱的產品面市[4]。

然而，“天然”并不等同于“健康”“安全”。雖然市場上宣稱“天然”“無添加”的化妝品越來越多，但化妝品接觸性皮炎患者并沒有減少。據文獻報道[5-6]，導致化妝品接觸性皮炎的主要原因是患者使用的化妝品中含有光敏成分、刺激性成分或其他過敏原。香精香料是導致過敏的常見過敏原之一，這些致敏的香精香料包含天然的植物精油。值得我們思考的是，植物精油是如何引起皮膚過敏的？其中的物質基礎是什么？關于香精致敏，目前的研究大多聚焦在合成香精上，關于植物精油致敏風險的研究較少。通過查閱植物精油的化學成分分析相關文獻，植物精油中含有檸檬烯、芳樟醇、香葉醇、香茅醇、香豆素、水楊酸芐酯等成分[7-10]，這些成分多為過敏原或有光毒性。香茅醇、丁香酚、香豆素等成分在《日用香精》(GB/T 22731—2017)中屬于禁限用成分[11]?！痘瘖y品安全技術規(guī)范》(2015年版)規(guī)定禁用成分為化妝品中不得添加的成分，限用成分在化妝品中有添加的最高限量要求[12]。但對于植物精油中天然存在的禁限用成分的情況，上述兩部標準中尚無規(guī)定。在化妝品中添加的植物精油，其活性成分含量缺乏數據，使用量也沒有科學可靠的依據，從化妝品配方中可以發(fā)現不少產品會同時添加多種植物精油。因此，由植物精油原料帶入的致敏成分因無相關標準或法規(guī)作為使用及監(jiān)管的依據，可能存在安全風險，值得關注。對植物精油進行化學成分分析，尤其是對在化妝品法規(guī)中禁限用的或有相關研究發(fā)現存在風險的成分進行分析，對于化妝品植物精油原料的科學監(jiān)管是不可缺少的環(huán)節(jié)。

為對香精致敏成分進行快速高效的定性定量分析，本實驗室結合《日用香精》(GB/T 22731—2017)附錄C中涉及的日用香精中的禁用物質，在歐盟24種香精致敏檢測標準的基礎上[13]，覆蓋較為常見的具致敏性的日用香精禁用物質，建立了40種香精致敏成分同時測定的氣相色譜串聯(lián)質譜(GC-MS)檢測方法。本研究采用上述檢測方法對植物精油進行檢測，目的是探究植物精油中是否存在風險組分，分析植物精油中的禁限用成分和經報道的致敏成分，從監(jiān)管角度來看具有實用意義。本研究以使用頻率較高的15種常用植物精油為樣本，以我國法規(guī)中的禁限用及歐盟報道的致敏成分分析為切入點，探索植物精油作為化妝品原料的安全風險，以期為進一步加強化妝品植物精油原料的監(jiān)管提供數據和理論基礎。

1 材料和方法

1.1 樣品信息

15種植物精油的樣品信息見表1。

表1 15種植物精油的樣品信息

1.2 儀器

GCMS-TQ8050三重四極桿型氣相色譜質譜聯(lián)用儀，配EI源(日本島津公司)；XS205DU分析天平(梅特勒-托利多公司)；LAB DANCER S25渦旋混合儀(德國艾卡公司)。

1.3 試藥

乙酸乙酯(美國Honeywell公司，色譜純)；無水硫酸鈉(廣州化學試劑廠，優(yōu)級純)。40種標準物質信息見表2。

表2 40種標準物質信息

1.4 色譜條件

色譜柱：DB-WAX毛細管柱(30 m×0.32 mm×0.50 μm)；載氣：氦氣，純度不低于99.999%；進樣方式：分流進樣，分流比10∶1；流速：2.0 ml/min；進樣量：1 μl；進樣口溫度：250 ℃；升溫程序：40 ℃保持2 min，后以5 ℃/min升溫至240 ℃，保持18 min。

1.5 質譜條件

離子化方式：EI離子源；掃描方式：選擇離子檢測(SIM)模式；電離能量：70 eV；色譜-質譜接口溫度：250 ℃，離子源溫度：230 ℃。

2 結果

15種植物精油的GC-MS定量分析結果顯示：有11種植物精油被檢測出致敏成分，具體成分及其含量見表3。

表3 15種植物精油中致敏成分及其含量測定結果

3 討論

3.1 結果分析

通過GC-MS檢測方法，以40種香精致敏成分作為標準物質，對15種植物精油進行測定。檢測結果顯示，15種植物精油中，有11種含致敏成分，檢出率為73.3%。綜合所測植物精油的結果得到含量大于0.001%的成分有：檸檬烯、丁香酚、肉桂醛、苯甲酸芐酯、芳樟醇、香葉醇、水楊酸芐酯、苯甲醇、檸檬醛、α-己基肉桂醛、香茅醇、葵子麝香，共12種。其中，檸檬烯、丁香酚、芳樟醇、香葉醇在多種植物精油中檢出，含有檸檬烯的植物精油有：桉葉油、留蘭香油、甜橙油、薰衣草油、檸檬油；含有丁香酚的植物精油有：丁香油、依蘭油、丁香葉油、玫瑰精油；含有芳樟醇的植物精油有：依蘭油、甜橙油、薰衣草油、玫瑰精油、檸檬油、香葉天竺葵油；含有香葉醇的植物精油有：依蘭油、薰衣草油、玫瑰精油、香葉天竺葵油。

3.2 植物精油的安全風險

將所測結果與美國FDA自愿注冊計劃(Voluntary Cosmetic Registration Program)公布的最常用的植物精油的主要過敏原進行對比(見表4)，情況如下：根據美國FDA的相關報道，桉葉油、丁香油、甜橙油、薰衣草油的主要致敏原分別為檸檬烯、丁香酚、檸檬烯、芳樟醇，與本研究所得結果一致；依蘭油、玫瑰精油、香葉天竺葵油的主要過敏原分別為水楊酸芐酯、香茅醇、檸檬醛[4]，本研究測得上述3種植物精油中含量最高的致敏成分分別為苯甲酸芐酯、香葉醇、香葉醇，且均比相應植物精油中測得的水楊酸芐酯、香茅醇、檸檬醛含量高出10倍以上。以上對比結果提示，同種植物精油中致敏成分的種類和含量不一定相同。植物精油所含成分及其含量與植物產地產期、提取工藝、分析方法等密切相關。目前市場上的化妝品植物原料還沒有像中藥一樣要求申報基原和提取工藝，也無相關數據和標準指導生產和規(guī)范使用，提示植物精油在化妝品原料生產端仍需加強管理，以進一步保證植物精油原料的穩(wěn)定性和安全性。根據所測結果，植物精油中的致敏成分含量均未超出《日用香精》(GB/T 22731—2017)和《化妝品安全技術規(guī)范》(2015年版)中對限用成分的限量規(guī)定，但如果多種含相同成分或相同致敏機制成分的精油同時或大量使用，可能因疊加效果導致安全風險。

表4 檢測結果與文獻數據對比

3.3 國內外對植物精油的監(jiān)管差異

本研究選取的15種植物精油未列入我國化妝品相關標準規(guī)定的禁限用植物名單，而在歐盟消費者安全科學委員會(SCCS)發(fā)表的OpiniononFragranceAllergensinCosmeticProducts中屬于已確定有致敏風險的植物提取物[14]，其中8種在美國FDA自愿注冊計劃已有明確的過敏原[4]。本研究測得的12種致敏成分，在歐盟化妝品法規(guī)中屬于香精過敏原，法規(guī)中的相關規(guī)定為：駐留產品中濃度(質量分數)超過0.001%和用后沖洗性產品中的濃度(質量分數)超過0.01%時，須標注該香精組分的全名稱。我國化妝品標準《日用香精》(GB/T 22731—2017)中則對丁香酚、肉桂醛、苯甲酸芐酯、香葉醇、水楊酸芐酯、苯甲醇、檸檬醛、α-己基肉桂醛、香茅醇9種成分在11類產品(日化產品，含護理用品的化妝品)中有限量要求，對檸檬烯、芳樟醇未作要求，葵子麝香為禁用物質[13]。雖然該標準對上述10種致敏成分有限量或禁用的規(guī)定，但對植物精油作為原料帶入的情況未作出規(guī)定，此類安全風險需引起關注。上述國內外的監(jiān)管差異提示我國對植物精油的監(jiān)管仍需進一步加強才能更好地適應發(fā)展現狀。

4 結論

2020年頒布的《化妝品監(jiān)督管理條例》和廣東省人民政府發(fā)布的《廣東省推動化妝品產業(yè)高質量發(fā)展實施方案》均提到要支持利用特色植物資源研究開發(fā)化妝品。同時，以植物來源為原料開發(fā)化妝品越來越受到生產者和消費者的追捧，也是今后化妝品產業(yè)發(fā)展的新趨勢。但目前化妝品相關法規(guī)和標準尚未能很好地防范由植物精油帶入的安全風險，植物精油的安全風險研究也較少。本研究所測的40種成分均為香精致敏成分，15種植物精油為化妝品中使用頻率較高的植物精油原料，且在國外已有相關研究發(fā)現其存在致敏風險，具有代表性。分析結果表明了目前市場上存在化妝品植物精油原料含致敏成分的情況，有一定參考意義，為植物精油的安全風險研究提供一種思路。本研究尚在探索階段，所測結果僅代表本研究所收集的樣品，后續(xù)研究將從縱向上增加植物精油種類，從橫向上收集同種植物不同產地、不同提取方法的精油，以求獲得更全面的結果，為植物精油的安全性評估及使用目錄清單的制定提供基礎。