彭佰賢,魏移娟
(梅州興寧婦幼保健院,廣東 梅州 514500)
艾滋病是一種由艾滋病病毒(HIV 病毒)感染引起的獲得性免疫缺陷疾病,艾滋病病毒會攻擊人體免疫系統(tǒng),主要攻擊目標(biāo)是CD4T 淋巴細(xì)胞,使得人體喪失免疫功能[1]?;忌习滩∫院?,人體容易感染各種類型疾病,并且不容易治愈,反復(fù)發(fā)病,嚴(yán)重的可發(fā)生惡性腫瘤,具有極高的死亡率,是對人類威脅最大的疾病之一,至今沒有特效藥,無法治愈[2]。艾滋病具有非常長的潛伏期,感染者無自覺癥狀,期間可以對其它健康人群進(jìn)行感染,社會危害很大,潛伏期可達(dá)8-9年之久[3]。對疑似艾滋病患者進(jìn)行艾滋病篩查是非常有臨床意義的,可以及時發(fā)現(xiàn)艾滋病病毒,并且盡早接受相關(guān)治療,減少病毒進(jìn)一步傳播,延長患者生存年限[4]。臨床上常用與艾滋病檢測的方法包括膠體金法和膠體金法,都有不錯的檢測效果,檢測準(zhǔn)確率都比較高[5]。為此,本研究對膠體金法和酶聯(lián)免疫法應(yīng)用于艾滋病抗體檢測中的效果進(jìn)行了總結(jié)和對比,現(xiàn)報道如下。
選擇本院2012年2月至2019年8月期間收治的25 例HIV 初篩陽性患者作為研究對象,分別對其進(jìn)行膠體金法和酶聯(lián)免疫法艾滋病抗體檢測,比較檢測結(jié)果?;颊呔鶠榕?,年齡范圍22-47 周歲,平均年齡(36.45±3.45)歲。
全部患者都接受了膠體金法和酶聯(lián)免疫法檢測艾滋病抗體。具體操作如下:
1.2.1 血液樣本采集
患者同時采集兩份3ml 的血液樣本存放在無抗凝劑的真空試管中,并且存放在2-8℃的冰箱內(nèi),在一周內(nèi)完成艾滋病檢測。如果一周內(nèi)無法完成檢測,則需將血液樣本保存在-20℃的冰柜中。
1.2.2 血清分離
采集到的200 份血液樣本需要進(jìn)行離心操作,在醫(yī)用離心機(jī)上進(jìn)行離心,轉(zhuǎn)速設(shè)定為3000r/min,離心時間不能少于15min,將血清分離后分別進(jìn)行膠體金法和酶聯(lián)免疫法檢測。
1.2.3 檢測儀器
檢測儀器:多功能酶標(biāo)儀、洗板器、洗板機(jī)、恒溫培養(yǎng)箱。
1.2.4 膠體金法艾滋病檢測
檢測試劑:萬孚HIV-TP 聯(lián)合檢測試劑(膠體金法)(生產(chǎn)廠家:廣州萬孚生物技術(shù)股份有限公司,國藥準(zhǔn)字:H20163401),規(guī)格型號:1 人份。檢測方法:在檢測前取出萬孚HIV-TP 聯(lián)合檢測試劑(膠體金法),將試劑和血清樣本放置在常溫下30min,待其恢復(fù)到室溫以后,20-30℃,開始檢測。使用檢測習(xí)慣取出1 滴血清樣本滴入檢測試劑中,馬上滴入2 滴血清樣本稀釋液,在15min-20min 時間段內(nèi)觀察檢測結(jié)果,如果質(zhì)控線出現(xiàn)一條紅線,檢測線位置沒有出現(xiàn)紅線,則為陰性。如果質(zhì)控線和檢測線處都出現(xiàn)一條紅線,則為陽性。如果沒有出現(xiàn)紅線則說明操作失誤,本次檢測結(jié)果無效。
1.2.5 酶聯(lián)免疫法艾滋病檢測
檢測試劑:人類免疫缺陷病毒抗體診斷試劑盒(酶聯(lián)免疫法)(生產(chǎn)廠家:珠海麗珠試劑股份有限公司,國藥準(zhǔn)字:H20020011),包裝規(guī)格:96 人份/盒。檢測方法:檢測前準(zhǔn)備好試劑盒、檢測儀器,調(diào)節(jié)好儀器參數(shù),取出檢測試劑,恢復(fù)到室溫后使用,打開包裝后1h 內(nèi)完成檢測。嚴(yán)格按照人類免疫缺陷病毒抗體診斷試劑盒(酶聯(lián)免疫法)使用說明書進(jìn)行艾滋病抗體檢測,檢測結(jié)果A 值≥Cut-off 則檢測結(jié)果為陽性,反之為陰性。
對比膠體金法和酶聯(lián)免疫法檢測艾滋病抗體的結(jié)果。即對比兩種檢測方法的陽性率。
使用SPSS22.0 軟件處理數(shù)據(jù),計量資料和計數(shù)資料分別用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差和數(shù)或率的形式代表,用t 和卡方檢驗(yàn),P<0.05,有統(tǒng)計學(xué)意義。
對25 例疑似HIV 初篩陽性患者的血清進(jìn)行艾滋病抗體檢測,確診陽性18 例,陰性7 例,使用膠體金法檢測出艾滋病抗體陽性18 例,陽性率為100.00%,使用酶聯(lián)免疫法檢測出艾滋病抗體陽性17 例,陽性率為94.44%。檢測結(jié)果差異不顯著,數(shù)據(jù)不具有統(tǒng)計學(xué)意義,P>0.05,如表1 所示。
表1 膠體金法和酶聯(lián)免疫法檢測艾滋病陽性率[n(%)](n=18)
艾滋病是一種對人類健康和生命威脅極大的疾病,是全球性疾病,世界性醫(yī)學(xué)難題,一旦發(fā)病無藥可以治愈,只能通過藥物維持病情,盡量延長存活時間[6]。艾滋病患者容易感染各種細(xì)菌、病毒等,極易患上其它疾病,主要原因是因?yàn)榘滩〔《酒茐牧嗣庖呦到y(tǒng)淋巴細(xì)胞的免疫功能。艾滋病是具有高度傳染性,主要傳播渠道包括性交感染、母嬰感染、血液感染,艾滋病病毒不容易被發(fā)現(xiàn),在人體內(nèi)的潛伏期非常長,可達(dá)8-9年[7]。艾滋病的防治沒有特別有效的措施,只能通過人們自覺,養(yǎng)成健康的生活習(xí)慣,潔身自好,不賣淫、不嫖娼、避免高危性行為[8]。同時,人們需要嚴(yán)禁吸毒,不與他人共用注射器,不能在非正規(guī)醫(yī)療機(jī)構(gòu)進(jìn)行獻(xiàn)血、輸血和使用血制品,個人洗漱用品(牙刷、剃須刀、刮臉刀)不要借用和共用。
膠體金是一種由氯金酸(HAuCl4)在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下,聚合成的金顆粒,在靜電作用下處于穩(wěn)定的膠體狀態(tài),是一種帶負(fù)電的疏水膠溶液,因此稱為膠體金。膠體金是一種非常好的免疫標(biāo)記物,在艾滋病抗體檢測中可以對艾滋病抗體進(jìn)行準(zhǔn)確標(biāo)記,通過分析膠體金可以準(zhǔn)確發(fā)現(xiàn)其中的艾滋病抗體,起到診斷艾滋病和篩查的作用[9]。膠體金法在艾滋病抗體檢測中的應(yīng)用具有非常強(qiáng)的敏感性,特異性高,并且檢測結(jié)果準(zhǔn)確,檢測操作簡單,在檢測的過程中只依靠膠體金法檢測試劑盒和檢測設(shè)備即可快速獲得檢測結(jié)果,結(jié)果容易觀察和判讀,十分方便,在臨床上的應(yīng)用非常廣。
酶聯(lián)免疫法是應(yīng)用在艾滋病抗體檢測中的常規(guī)固相免疫測定法,其檢測原理是將艾滋病抗體包被到固相載體表現(xiàn)上,并可以保持免疫活性,以此完成檢測。測定艾滋病抗體時,檢測人員需要將待檢血清樣本和酶標(biāo)抗原按不同的步驟加入到固相載體表面,發(fā)生相關(guān)反應(yīng),通過洗滌方法將抗原抗體復(fù)合物和游離的未結(jié)合成分分離開,在加入酶反應(yīng)底物,根據(jù)酶催化后的顏色和吸光度去進(jìn)行定性和定量分析,測定艾滋病抗體。
祝喆[10]的研究中選擇120 例疑似艾滋病患者,全部患者都接受了膠體金法和酶聯(lián)免疫法檢測艾滋病抗體,膠體金法檢測出陽性111 例,陽性率達(dá)到92.5%,酶聯(lián)免疫法檢測出陽性115 例,陽性率為95.8%,兩種檢測方法的陽性檢出率都比較高,并且檢出準(zhǔn)確性相差不大,差異無統(tǒng)計學(xué)意義,P>0.05,結(jié)論與本次研究結(jié)果一致。本次研究結(jié)果顯示,所選的25 例疑似艾滋病患者最終確診陽性18 例,陰性7 例同時接受了膠體金法和酶聯(lián)免疫法檢測,其中使用膠體金法檢測出艾滋病抗體陽性18 例,陽性率為100.00%,使用酶聯(lián)免疫法檢測出艾滋病抗體陽性17 例,陽性率為94.44%。檢測結(jié)果差異不顯著,數(shù)據(jù)不具有統(tǒng)計學(xué)意義,P>0.05。
由此可見,膠體金法和酶聯(lián)免疫法在艾滋病抗體檢測中的應(yīng)用效果基本一致,都可以比較準(zhǔn)確的檢出艾滋病抗體,都是比較可靠的艾滋病檢測方法。
綜上所述,膠體金法和酶聯(lián)免疫法應(yīng)用于艾滋病抗體檢測中的結(jié)果都比較準(zhǔn)確,具有較高的特異性、穩(wěn)定性以及敏感性,檢測結(jié)果準(zhǔn)確,操作簡單,使用的試劑和設(shè)備簡單,檢測條件要求不高,在臨床上具有非常好的應(yīng)用效果,是檢測艾滋病抗體的有效方法。