羅媛 ，劉振穩(wěn) ,陳麗，彭華

(1.中國(guó)科學(xué)院昆明植物研究所，云南 昆明 650201；2.中國(guó)科學(xué)院大學(xué)，北京 懷柔 101400；3.云南省林業(yè)和草原科學(xué)院,云南 昆明 650201)

大丁草屬(LeibnitziaCass.)以德國(guó)科學(xué)家Gottfried Wilhelm Leibnitz(1646—1716年)的名字命名，隸屬菊科(Compositae)管狀花亞科(Carduoideae)帚菊木族(Mutisieae)[1]。本屬植物為多年生草本，多作為民間用藥[2]，其中，大丁草(L.anandria)含有香豆素等成分[3]，可全草入藥，具有清熱解毒，利濕消腫、止咳、止血等功效[4]。大丁草為本屬的模式物種，曾被劃分到廣義大丁草屬(GerberaCass.)[5]。程用謙[5]曾對(duì)廣義大丁草屬植物的形態(tài)特征進(jìn)行了研究，所得性狀在分類上效果不理想，同號(hào)標(biāo)本曾被先后定為2種，且其記錄的物種分布區(qū)范圍和海拔高度互相交錯(cuò)，模糊不清。后來，吳征鎰等[6]將大丁草屬訂正為亞洲4～5種，中美洲(1種)，并首次在國(guó)內(nèi)提出了“春秋二型”(sexual seasonal dimorphism)一詞。新分類修訂的結(jié)果表明：大丁草屬(LeibnitziaCass.)與親緣關(guān)系較近的火石花屬(GerberaL.)植物的區(qū)別是大丁草屬植物在一年內(nèi)有2次繁殖期，且其頭狀花序的形態(tài)、葉片和植株大小均有差異，而火石花屬植物并無“春秋二型”的花葉性狀。目前，國(guó)際分類學(xué)界認(rèn)為大丁草屬含7種，5種產(chǎn)于中亞、東亞至西伯利亞，2種產(chǎn)于美國(guó)西南部至中美洲[7]。中亞大丁草[L.knorringiana(B.Fedtsch.)Pobed]分布于中亞地區(qū)，大丁草[L.anandria(L.)Turcz.]、灰?guī)r大丁草[L.pusilla(Wall.ex DC.)S.Gould ex Kitam.& Gould]、紅纓大丁草[L.ruficoma(Franch.)Kitam.]、尼泊爾大丁草[L.nepalensis(Kunze)Kitam.]分布于東亞，琴裂大丁草[L.lyrata(Sch.-Bip.)G.L.Nesom]和墨西哥大丁草[L.occimadrensisG.L.Nesom]僅限于北美。

花和葉的發(fā)育順序、冠毛顏色、瘦果形態(tài)等方面的性狀是大丁草屬物種鑒定的主要依據(jù)，但在館藏標(biāo)本鑒定及野外物種識(shí)別時(shí)，上述性狀存在以下方面的問題：(1)冠毛顏色會(huì)隨著保存時(shí)間延長(zhǎng)而褪色；(2)花和葉的先后發(fā)育順序是該屬物種鑒定的重要特征，館藏標(biāo)本多為花葉俱全植株，早春階段標(biāo)本的采集常被忽略，僅從干標(biāo)本上無法判定花、葉的發(fā)育順序；(3)不同的生境下某些種內(nèi)葉型變異范圍大，種間葉形存在交叉。一直以來，由于缺乏大丁草屬植物春、秋型植株生物學(xué)特性較為全面的觀察，現(xiàn)有檢索表所編物種特征不清晰，在具體的野外調(diào)查和室內(nèi)標(biāo)本鑒定過程中，物種鑒定存在很大的不確定性。鑒于此，有必要通過大量的野外及館藏標(biāo)本解剖，梳理物種間關(guān)鍵性狀，來重新構(gòu)建一個(gè)易掌握、實(shí)用性強(qiáng)的大丁草屬物種檢索表。

1 材料與方法

1.1 查閱原始文獻(xiàn)、模式標(biāo)本、生活史照片

查找大丁草屬物種發(fā)表時(shí)的原始文獻(xiàn)，查閱國(guó)內(nèi)外所有大丁草屬的館藏標(biāo)本，在PPBC中國(guó)植物圖像庫、Global Biodiversity Information Facility(GBIF)、SEINet網(wǎng)站查閱大丁草屬物種的相關(guān)生活史照片。對(duì)于國(guó)外種，查閱了北美植物志、原始發(fā)表文獻(xiàn)和相關(guān)標(biāo)本、線描圖以及拍攝的照片。根據(jù)文字資料描述的性狀與標(biāo)本對(duì)照之后，將其編撰進(jìn)檢索表中。

1.2 實(shí)驗(yàn)材料

為調(diào)查大丁草的“春秋二型”的具體性狀和春、秋型轉(zhuǎn)化的第一手資料，對(duì)大丁草屬國(guó)內(nèi)分布的其中兩個(gè)物種設(shè)立樣地進(jìn)行野外觀察。

表1 大丁草屬植物各采樣點(diǎn)基本情況

2018年9月，對(duì)北京市懷柔區(qū)雁棲湖西山游步道風(fēng)景區(qū)內(nèi)，海拔119.3～159 m的范圍，設(shè)立樣地1塊(8 km內(nèi)零散分布10個(gè)居群)，并將13株大丁草(L.anandria)的活體植株移栽到昆明植物研究所的溫室。

2019年8月，在昆明市五華區(qū)小哨村馬頭山，海拔約2 490 m處，設(shè)立1號(hào)樣地，以及野貓山西邊，海拔約2 510 m設(shè)立2號(hào)樣地(1、2號(hào)山頂集中分布多個(gè)居群)。對(duì)灰?guī)r大丁草(L.pusilla)進(jìn)行野外觀察，并取20株活體植株移栽到昆明植物研究所的溫室。

2019年9月，于云南省香格里拉市九龍村至安南村途中，海拔約3 315 m。采集10株紅纓大丁草(L.ruficoma)活體植株移栽到昆明植物研究所溫室。

2020年8月，于云南省香格里拉市三壩鄉(xiāng)吉村九仙峰，海拔約3 881 m。采集10株尼泊爾大丁草(L.nepalensis)活體植株移栽到到昆明植物研究所的溫室。

1.3 物候觀測(cè)及花部解剖

2018年9月至2019年6月期間，對(duì)樣地的大丁草屬植株進(jìn)行1月1次的觀察記錄，記錄其生境和開花物候。2018年9月至今，對(duì)移栽至溫室內(nèi)的大丁草植株持續(xù)觀察記錄。

2019年9月至今，對(duì)1號(hào)、2號(hào)樣地的灰?guī)r大丁草植株進(jìn)行1月1次的觀察記錄，盛花期每隔3～5 d觀察1次，記錄其生境和開花物候。對(duì)移栽至溫室內(nèi)的灰?guī)r大丁草植株持續(xù)觀察記錄。

2019年9月至今，對(duì)野外移栽至溫室的紅纓大丁草植株進(jìn)行室內(nèi)觀察記錄。

2020年8月至今，對(duì)野外移栽至溫室的尼泊爾大丁草植株進(jìn)行室內(nèi)觀察記錄。

對(duì)于移栽到溫室內(nèi)的植株，通過拍攝照片的方式記錄大丁草屬植物繁殖期花的形態(tài)變化。并采集春、秋季繁殖期的花，作為花部形態(tài)解剖的材料，采集后立刻浸泡于FAA固定液(38%甲醛5 mL+冰醋酸5 mL+70%酒精90 mL+5 mL甘油)中，然后在Leica體視顯微鏡[型號(hào)S8APO，德國(guó)；徠卡顯微系統(tǒng)(上海)貿(mào)易有限公司]下解剖。

2 結(jié)果與分析

2.1 野外觀察和室內(nèi)解剖結(jié)果

2.1.1 大丁草Leibnitziaanandria(L.)Turcz.

該種春秋型差異顯著；具有簇狀須根；花葶單生或叢生，常被蛛絲狀毛；春季花、葉同步發(fā)育，葉片正、背面覆蛛絲狀棉毛，秋型葉片發(fā)育至春型2～3倍(春型葉片的長(zhǎng)度約為4～8 cm、寬度值3～6 cm，秋型葉片長(zhǎng)度約10～20 cm，寬度6～15 cm)，正面近無毛，背面絨毛減少；葉基生，蓮座狀，葉具齒狀、深波狀或琴狀羽裂；總苞約3層；春型外緣舌狀花粉色至白色，中間管狀二唇形花，聚藥雄蕊金黃色；秋型花苞總苞始終閉合，無舌狀花；春、秋型瘦果結(jié)構(gòu)相同，紡錘形，具縱棱，被白色粗毛，頂端無喙；冠毛粗糙，污白色；春季花期2—4月，秋季花期8—10月。

產(chǎn)云南彝良、鎮(zhèn)雄、廣南、昆明、祿勸、大理、麗江、維西、德欽等地；黑龍江、吉林、遼寧、內(nèi)蒙古、河北、山西、陜西、甘肅、青海、山東、江蘇、安徽、上海、浙江、江西、福建、臺(tái)灣、河南、湖北、湖南、廣東、廣西、貴州、重慶、四川等省區(qū)也有；俄羅斯遠(yuǎn)東地區(qū)、日本有分布。生于海拔1 550～2 680 m的多種生境中[1]。

圖1 大丁草注：a為根，b為葉，c為春型花，d為秋型花Fig.1 Leibnitzia anandria

2.1.2 灰?guī)r大丁草Leibnitziapusilla(Wall.ex DC.)S.Gould ex Kitam.& Gould

該種春秋型葉花差異亦顯著；具有簇狀須根；花葶單生或從生，常被毛；春季先葉后花，葉片正面無毛，有密細(xì)腺點(diǎn)，下面密被灰白色綿毛，秋型葉如是；葉基生，蓮座狀，葉緣波狀，具圓齒，非羽狀分裂；花總苞闊鐘形，約4層，春型外緣舌狀花粉色至白色，中間管狀二唇形花，聚藥雄蕊暗黃色；秋型總苞始終閉合，舌狀花隱約外露；春、秋型瘦果結(jié)構(gòu)相同，紡錘形，具縱棱，被白色粗毛，種皮帶有暗紫色，頂端無喙；冠毛粗糙，污白色；春季花期2—4月，秋季花期8—10月。

產(chǎn)于四川西部(寶興、九龍)。生于石上，海拔2 400～3 500 m[1]。

圖2 灰?guī)r大丁草注：a為根，b為葉，c為秋型花，d為秋型花Fig.2 L.pusilla

2.1.3 紅纓大丁草Leibnitziaruficoma(Franch.)Kitam.

該種至今在野外和室內(nèi)都尚未觀察到春型花；具有簇狀須根；花葶單生或叢生，常被毛；葉正面光滑近無毛，背面覆白色綿毛，葉基生，蓮座狀，葉片紙質(zhì)，長(zhǎng)圓形或匙狀長(zhǎng)圓形；總苞片2～3層，花苞較其他種更為細(xì)長(zhǎng)，總苞片始終閉合，無舌狀花；瘦果近紡錘形，頂端長(zhǎng)漸狹成喙?fàn)?，具縱棱，種皮暗紫色，具白色柔毛；冠毛藍(lán)紫色，單個(gè)種苞內(nèi)種子數(shù)量略少于其他種；秋季花期8—9月。

產(chǎn)于云南西北部(貢山、鶴慶)、四川西部至西南部(馬爾康、理縣、鹽源、普格)和西藏(拉薩)。生于荒坡或松林中，海拔2 200～2 500 m[1]。

圖3 紅纓大丁草注：a為根，b為葉，c為春型花(圖b、c為朱鑫鑫拍攝)。Fig.3 L.ruficoma

2.1.4 尼泊爾大丁草Leibnitzianepalensis(Kunze)Kitam.

該種亦尚未觀察到春型花；與其余3個(gè)種不同之處是其具斜升的根狀莖；花葶單生，高約10 cm左右；葉正面光滑近無毛，背面覆白色綿毛，葉基生，蓮座狀，葉片紙質(zhì)，卵形，葉半裂至深裂；與大丁草和灰?guī)r大丁草不同，本種秋型具有“碩大”的白色花苞；總苞鐘形，苞片約3層，基部圓，暗綠色至紫色；舌狀花，花瓣白色，較寬，中間管狀小花的柱頭伸出花筒的距離幾乎與花筒等長(zhǎng)，具有深紫色的聚藥雄蕊；冠毛粗糙，下部紫紅色，上部黃褐色；秋季花期6—8月。

產(chǎn)于西藏南部(吉隆)和云南西北部(麗江玉龍山)。生于坡地或溝邊草地上，海拔3 200～4 300 m[1]。

圖4 尼泊爾大丁草注：a為根，b為葉，c為秋型花(圖c為肖金妃拍攝)。Fig.4 L.nepalensis

2.1.5 中亞大丁草Leibnitziaknorringiana(B.Fedtsch.)Pobed.

該種亦尚未觀察到春型花，秋型具有開放的舌狀花；多年生草本；根狀莖短，木質(zhì)，棕色，具淺棕色肉質(zhì)的細(xì)根；葉基部覆蓋殘余的根狀莖，葉只基生，頂生裂片幾乎圓形，稍長(zhǎng)于3～4對(duì)下裂片，向葉基部逐漸遞減，葉正面深綠色無毛，背面蒼白色，無毛或細(xì)蛛絲狀毛，具大而不規(guī)則的齒狀和短鈍的尖部，葉柄上部通常具翅；總苞片外部短，披針形，倒卵形，內(nèi)部幾乎是外部的2倍；花托室狀；舌狀花雌性，尖端具3齒；花柱2裂，具緣毛，從花冠外露；中間管狀花，雄蕊包裹在管狀花內(nèi)部；花柱不外露，具小的線形基部附屬物，雄蕊絲短于花藥，附著在花筒的上三分之一；成熟瘦果未知[8]。

產(chǎn)于蘇聯(lián)中亞，天山(地方性)。生于高山云杉(Picealikiangensisvar.montigena)林下[8]。

本種僅在開花期能辨認(rèn)。1945年8月，V.Vipper和Karagatun Sai在林中收集到僅在營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)下的秋型，其葉片比春型葉片長(zhǎng)[8]。模式標(biāo)本收藏于列寧格勒(如今的圣彼得堡)，并未找到。但查閱到吉爾吉斯斯坦的6份館藏標(biāo)本，其中3份分別采集于9月、11月、12月，均為秋型具有舌狀花的植株。

圖5 中亞大丁草不同采集時(shí)間的標(biāo)本注：a為1996-09-06，b為1965-11-05，c為1945-12-07。Fig.5 L.knorringiana of specimens collected at different times

2.1.6 琴裂大丁草Leibnitzialyrata(Sch-Bip.)G.L.Nesom

種加詞lyrata的意思是羽狀裂，葉子的末端裂片比其他葉子更圓更大。

多年生草本；植株灰綠色，被絨毛；花葶數(shù)個(gè)；春季先花后葉；葉基生，倒卵形、長(zhǎng)圓形或倒披針形，頂生裂片遠(yuǎn)大于少數(shù)側(cè)生葉，邊緣稍具鋸齒狀至全緣，基部突然收縮至葉柄，葉正面無毛，背面被白色薄絨毛，莖生葉無或大部分減少；春型花粉紅色至紫色，舌片白色具3齒，中間管狀二唇形花；總苞片披針形和銳尖，具灰色或灰綠色短柔毛，尖端紫色，單生在花序梗上，花序梗在頭部以下或多或少擴(kuò)大；瘦果棕褐色至略帶紫色，紡錘形，具喙；冠毛白色或棕色，有豐富的剛毛；花期5—10月[9]。

產(chǎn)于亞利桑那州、新墨西哥州、墨西哥。見于松樹、松櫟、針葉林或橡樹林中長(zhǎng)滿青草的部分開闊地帶，分布于海拔1 981～2 743 m的擾動(dòng)地帶[9]。

圖6 琴裂大丁草注：a為春型花，b為葉，c為秋型花，d為種苞，e為成熟的種子(圖源SEINet網(wǎng)站，Liz Makings拍攝)。Fig.6 L.knorringiana of specimens collected at different times

2.1.7 墨西哥大丁草LeibnitziaoccimadrensisG.L.Nesom

多年生草本，纖維狀根；基部蓮座叢，花葶1～3個(gè)；葉片倒卵形，橢圓形或倒卵形；春季花葉同時(shí)發(fā)育，葉邊緣有時(shí)紫色，加厚或稍旋卷，無絨毛，齒狀或反向鋸齒狀。具短尖狀裂片或齒狀，先端圓形到斜形，基部深裂到近裂，突然縮小到葉柄長(zhǎng)度的1/3～1/2，葉正面無毛，葉背面被絨毛，通常中間區(qū)域分化強(qiáng)烈，淺綠色到黃綠色，邊緣尖端紫色；總苞下部膨大，被絨毛或無毛，苞片披針形至線形；春型花具有舌狀雌花，舌片很少深裂，白色或有時(shí)紫色，隨著花齡的增長(zhǎng)而變紫，秋型花舌狀花退化；花藥頂端附屬物弱分化，披針形；花柱分枝線形，頂端圓形。瘦果紡錘形，有喙，約為瘦果長(zhǎng)度的1/3到略大于1/2，深褐色或有時(shí)呈紫色，具5根淺色脈，整個(gè)表面密被短柔毛，基部分叉，具雙重毛；冠毛多，非常纖細(xì)和微小倒鉤狀，銀白色，成熟時(shí)長(zhǎng)5～6 mm，短于花冠。春季花期2—4月，秋季花期9—11月[10]。

分布于墨西哥錫那羅亞州東北部的蘇魯塔托山脈和最南端的鄰近馬德雷山脈；生于海拔1 670～2 500 m山坡上的大部分或潮濕地區(qū)，巖石、松樹和橡樹或其他闊葉樹種下[10]。

圖7 墨西哥大丁草的等模標(biāo)本

2.2 新編大丁草屬檢索表

3 討論

前人編撰的檢索表依據(jù)冠毛的顏色來區(qū)分大丁草、灰?guī)r大丁草(污白色)和紅纓大丁草、尼泊爾大丁草(藍(lán)紫色)。但是本項(xiàng)目組人員觀察采集于不同時(shí)間的大丁草冠毛顏色變化，發(fā)現(xiàn)大丁草屬的冠毛會(huì)隨時(shí)間推移而褪色，這個(gè)特征對(duì)于以保存年代久遠(yuǎn)的標(biāo)本進(jìn)行物種鑒定存在困難。花和葉的生長(zhǎng)順序是大丁草和灰?guī)r大丁草之間主要的鑒別特征，但是對(duì)處于春季和秋季過渡期的植株則無法得知生長(zhǎng)順序，并且灰?guī)r大丁草春型花期存在幾個(gè)不同的階段，首先產(chǎn)生的花苞枯萎，葉片生長(zhǎng)之后第2批花苞還會(huì)繼續(xù)萌發(fā)。所以，研究人員通過長(zhǎng)期的觀察和解剖，試圖找到一些更為直觀的外部特征作為大丁草屬植物種鑒定的依據(jù)。

吳征鎰和彭華[1]將大丁草屬植物從火石花屬中分離，贊成日本學(xué)者Nakai[11]將其處理在大丁草屬中，這一分類處理的主要依據(jù)是其具有“春秋二型”性狀。

根據(jù)野外觀察和室內(nèi)移栽，研究人員發(fā)現(xiàn)大丁草屬植物中大丁草、灰?guī)r大丁草植株在形態(tài)和開花物候上具有春型和秋型之分，即一年會(huì)出現(xiàn)兩次繁殖期，且秋季繁殖期外部總苞不打開，符合“春秋二型”的形態(tài)特征。而室內(nèi)移栽的紅纓大丁草植株，2019年9月移栽至今，尚未在溫室中出現(xiàn)春季繁殖期，僅具有秋季繁殖期，且總苞片在花期始終閉合。關(guān)于紅纓大丁草的“異?！?，可能的一種解釋是從高海拔相對(duì)寒冷的生境下轉(zhuǎn)移到溫室內(nèi)，其繁殖特性發(fā)生了改變。與這3個(gè)物種相反，2020年9月，正處于大丁草屬的秋季繁殖期，在野外采集尼泊爾大丁草時(shí)就觀察到在野外的生境下其具有碩大的白色開放的花朵。這一性狀與本屬的大丁草和灰?guī)r大丁草截然不同。紅纓大丁草和尼泊爾大丁草是否具有我們尚未觀察到的特殊的“春秋二型”還需要在野外的自然生境下進(jìn)一步觀察。對(duì)于產(chǎn)于國(guó)外的標(biāo)本，未采集到活體植株。

為確定新編檢索表對(duì)標(biāo)本的實(shí)用性，項(xiàng)目組人員對(duì)館藏已久的標(biāo)本進(jìn)行了驗(yàn)證，對(duì)于因年代久遠(yuǎn)而使冠毛褪色的標(biāo)本，可以依據(jù)葉片的特征(葉正反面是否覆綿毛，具密細(xì)腺點(diǎn))和花部的性狀(外圍瘦果上有無殘存的舌片)進(jìn)行鑒定。對(duì)于活體標(biāo)本和野外工作中的鑒定，例如，同樣處于秋季花期的大丁草和灰?guī)r大丁草，可以依據(jù)種苞內(nèi)有無發(fā)育的舌狀花來區(qū)分，而同樣處于春季花期的大丁草和灰?guī)r大丁草植株，在花部沒有明顯區(qū)別的情況下，則可依據(jù)葉片背面是否有密細(xì)腺點(diǎn)的特征進(jìn)行鑒定。對(duì)于產(chǎn)自國(guó)外的物種，新編檢索表的準(zhǔn)確性還需要進(jìn)一步的實(shí)踐。

致謝：中國(guó)科學(xué)院昆明植物所張步云、陳麗、張瓊、陽億、趙飛、李園園、趙越、孫增朋、蔣銀子、武憶雯、白蕊珠、張維平對(duì)野外樣地調(diào)查工作給予的幫助，陳亞萍、肖金妃、姜利瓊幫忙采集活體植株和標(biāo)本，在此一并表示衷心感謝！