張 旭，殷 濤，李 巖，張 力

(新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團畜牧獸醫(yī)工作總站，烏魯木齊830052)

為進一步提高新疆兵團各師獸醫(yī)實驗室檢測能力，強化動物疫病監(jiān)測預警，更好地為動物疫病防控工作提供技術(shù)支持，促進實驗室生物安全措施落實落地，特組織了2019年兵團師級獸醫(yī)實驗室檢測能力比對工作。

1 材料與方法

1.1 檢測樣品及試劑

比對試驗檢測樣品由新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團畜牧獸醫(yī)工作總站準備，所有比對檢測樣品均已分別進行豬瘟抗體、高致病性禽流感病毒、非洲豬瘟病毒的標定。

采用雙隨機分組的原則，每組比對檢測樣品共計6份，其中隨機分配陰性與陽性樣品個數(shù)，同時進行樣品的隨機編號，檢測樣品體積均能夠完成3次重復試驗所需。(見表1)。

表1 比對樣品清單

豬瘟病毒抗體ELISA檢測試劑盒(批號：CSFV20181120E)、高致病性禽流感H5H7亞型雙重實時熒光RT-PCR檢測試劑盒(批號：20190710P)、非洲豬瘟病毒實時熒光PCR檢測試劑盒(批號：ASF20190323P)購于哈爾濱元亨生物藥業(yè)有限公司。

1.2 比對范圍

兵團12個師畜牧獸醫(yī)站獸醫(yī)實驗室。

1.3 比對項目與試驗方法

豬瘟病毒抗體檢測，采用阻斷ELISA方法，按《豬瘟診斷技術(shù)》(GB/T16551-2008)[1]進行；高致病性禽流感病毒型鑒別檢測，采用熒光RT-PCR方法，按《H5亞型禽流感病毒熒光RT-PCR檢測方法》(GB/T 19438.2-2004)[2]、《H7亞型禽流感病毒熒光RT-PCR檢測方法》(GB/T 19438.3-2004)[3]進行；非洲豬瘟病毒檢測，采用熒光PCR方法，按試劑說明書進行。

1.4 結(jié)果評價標準

各師獸醫(yī)實驗室根據(jù)檢測方法判定標準，對比對檢測樣品進行定性，判定陰陽性。如果整組檢測樣品出現(xiàn)一個錯誤結(jié)果，則視為該比對項目不通過。

2 比對結(jié)果

2.1 豬瘟病毒抗體比對檢測結(jié)果

參加本比對項目的有12個師級獸醫(yī)實驗室，每個實驗室檢測6份樣品，共計72份，其中71份樣品結(jié)果正確，1份樣品存在較大偏差，符合率為98.61%，合格率為91.67%(見表2)。

2.2 高致病性禽流感病毒型比對鑒別結(jié)果

參加本比對項目的有9個師級獸醫(yī)實驗室，每個實驗室檢測6份樣品，共計54份，檢測結(jié)果全部正確，符合率為100%，合格率為100%(見表2)。

2.3 非洲豬瘟病毒比對檢測結(jié)果

參加本比對項目的有9個師級獸醫(yī)實驗室，每個實驗室檢測6份樣品，共計54份，其中53份樣品結(jié)果正確，1份樣品存在較大偏差，符合率為98.15%，合格率為88.89%(見表2)。

表2 兵團師級獸醫(yī)實驗室比對結(jié)果情況表

3 討論與分析

比對試驗是實驗室質(zhì)量控制和質(zhì)量保證的重要措施，對各師實驗室能力建設(shè)進行驗證，確認實驗室的管理能力，確保實驗室能夠維持較高的檢測水平，有效的實施獸醫(yī)實驗室的監(jiān)督和管理手段，通過外部質(zhì)量控制手段來測試一個實驗室準確度的途徑和對實驗室工作能力進行評估驗證的客觀方法，而能力驗證是評價一個實驗室檢測和分析能力的有效手段，各師實驗室在比對實驗活動中的表現(xiàn)是獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室和客戶評價實驗室能力的重要依據(jù)。

比對試驗成績作為各師獸醫(yī)實驗室現(xiàn)場考核檢測操作的評分依據(jù)，比對結(jié)果顯示，12個實驗室中有10實驗室的比對項目全部符合，2個實驗室有1個比對項目存在較大偏差。比對試驗共檢測樣品180份，總體符合率為98.89%。結(jié)果表明，絕大多數(shù)實驗室檢測能力總體較好，實驗室檢測質(zhì)量體系穩(wěn)定可靠，維持了較高檢測水準。但同時也發(fā)現(xiàn)個別實驗室存在檢測樣品分包編號不規(guī)范的問題，在實驗室質(zhì)量控制和管理方面有待改進。

根據(jù)國家“非洲豬瘟實驗室檢測”等有關(guān)文件[4]，測評非洲豬瘟達標的實驗室，也將作為非洲豬瘟授權(quán)實驗室授權(quán)依據(jù)。

4 建 議

為提高實驗室檢測水平，更好的應對突發(fā)疫情診斷，做好動物疫病防控流行病學調(diào)查及檢測，配備相應的設(shè)備，培訓熟練操作的專業(yè)技術(shù)人員，積極提高檢測能力[5]，加強兵團獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室熒光PCR檢測能力建設(shè)，適應目前先進的檢測技術(shù)，為動物疫病防控提供堅實的技術(shù)保障。此次比對試驗中具備熒光PCR檢測條件的9個師實驗室，有8個師實驗室在非洲豬瘟病毒檢測方面，具備開展檢測非洲豬瘟的能力，結(jié)果準確、操作熟練。不具備熒光PCR檢測條件的實驗室應加快實驗室能力建設(shè)，購置相應的設(shè)備[6]，培訓熟練的技術(shù)人員，提高生物安全防范意識，做好獸醫(yī)實驗室動物疫病的檢測診斷工作。

實驗室質(zhì)量管理體系的構(gòu)建、運作、維持是實驗室確保檢測數(shù)據(jù)的準確性以及檢測報告質(zhì)量的根本要求。在實驗室質(zhì)量行程過程和過程的各個階段可能影響檢測報告質(zhì)量的各個因素進行有效的管控，并對這些因素采取相應的管理和控制，才能確保檢測報告的質(zhì)量，是整個過程處于受控狀態(tài)。結(jié)合本次能力比對情況，認真對照實驗室質(zhì)量體系文件，梳理分析目前實驗室管理方面存在的問題和不足，對沒有嚴格按照質(zhì)量體系文件操作的過程，及時制定整改措施并開展糾正活動，強化實驗室的日常監(jiān)管[7]，不斷提高實驗室管理水平[8]。

針對相關(guān)檢測原始記錄填寫不規(guī)范等問題，如：填寫錯誤的地方只能杠改糾正，不能涂改糾正等，應按照實驗室質(zhì)量體系文件要求制定預防糾正措施，通過監(jiān)督實施，逐漸減少相關(guān)問題的發(fā)生。

移液器、生物安全柜等重點儀器設(shè)備應定期經(jīng)過專業(yè)機構(gòu)檢驗、維護，提高實驗的準確性、科學性和安全性[9，10]。本次比對試驗中出現(xiàn)2個實驗室有1個比對項目存在較大偏差，其中移液器的準確性對檢測結(jié)果的準確度有很大的影響，建議開展實驗儀器的校準工作。

嚴格執(zhí)行實驗室體系文件，強化管理，確保監(jiān)測工作科學規(guī)范，避免實驗室事故發(fā)生。以實驗室系統(tǒng)管理為抓手[11]，加強學習及轉(zhuǎn)化，不斷提升動物疫病監(jiān)測能力，拓展監(jiān)測范圍，充分發(fā)揮預測預報作用。利用實驗室優(yōu)勢，開展監(jiān)測技術(shù)培訓、課題研究推廣，提高師市監(jiān)測水平，為畜牧業(yè)發(fā)展提供服務。如本次比對試驗中個別檢測報告缺少流轉(zhuǎn)記錄，體現(xiàn)出個別實驗室未嚴格按照體系文件進行操作管理，實驗室質(zhì)量行程過程出現(xiàn)了不受控的現(xiàn)象，是實驗室檢測報告質(zhì)量的潛在影響因素，應加強管理，確保實驗室質(zhì)量管理各個環(huán)節(jié)均在受控狀態(tài)。