張 旭，殷 濤，李 巖，張 力

(新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團畜牧獸醫(yī)工作總站，烏魯木齊830052)

為進一步提高新疆兵團各師獸醫(yī)實驗室檢測能力，強化動物疫病監(jiān)測預(yù)警，更好地為動物疫病防控工作提供技術(shù)支持，促進實驗室生物安全措施落實落地，特組織了2019年兵團師級獸醫(yī)實驗室檢測能力比對工作。

1 材料與方法

1.1 檢測樣品及試劑

比對試驗檢測樣品由新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團畜牧獸醫(yī)工作總站準(zhǔn)備，所有比對檢測樣品均已分別進行豬瘟抗體、高致病性禽流感病毒、非洲豬瘟病毒的標(biāo)定。

采用雙隨機分組的原則，每組比對檢測樣品共計6份，其中隨機分配陰性與陽性樣品個數(shù)，同時進行樣品的隨機編號，檢測樣品體積均能夠完成3次重復(fù)試驗所需。(見表1)。

表1 比對樣品清單

豬瘟病毒抗體ELISA檢測試劑盒(批號：CSFV20181120E)、高致病性禽流感H5H7亞型雙重實時熒光RT-PCR檢測試劑盒(批號：20190710P)、非洲豬瘟病毒實時熒光PCR檢測試劑盒(批號：ASF20190323P)購于哈爾濱元亨生物藥業(yè)有限公司。

1.2 比對范圍

兵團12個師畜牧獸醫(yī)站獸醫(yī)實驗室。

1.3 比對項目與試驗方法

豬瘟病毒抗體檢測，采用阻斷ELISA方法，按《豬瘟診斷技術(shù)》(GB/T16551-2008)[1]進行；高致病性禽流感病毒型鑒別檢測，采用熒光RT-PCR方法，按《H5亞型禽流感病毒熒光RT-PCR檢測方法》(GB/T 19438.2-2004)[2]、《H7亞型禽流感病毒熒光RT-PCR檢測方法》(GB/T 19438.3-2004)[3]進行；非洲豬瘟病毒檢測，采用熒光PCR方法，按試劑說明書進行。

1.4 結(jié)果評價標(biāo)準(zhǔn)

各師獸醫(yī)實驗室根據(jù)檢測方法判定標(biāo)準(zhǔn)，對比對檢測樣品進行定性，判定陰陽性。如果整組檢測樣品出現(xiàn)一個錯誤結(jié)果，則視為該比對項目不通過。

2 比對結(jié)果

2.1 豬瘟病毒抗體比對檢測結(jié)果

參加本比對項目的有12個師級獸醫(yī)實驗室，每個實驗室檢測6份樣品，共計72份，其中71份樣品結(jié)果正確，1份樣品存在較大偏差，符合率為98.61%，合格率為91.67%(見表2)。

2.2 高致病性禽流感病毒型比對鑒別結(jié)果

參加本比對項目的有9個師級獸醫(yī)實驗室，每個實驗室檢測6份樣品，共計54份，檢測結(jié)果全部正確，符合率為100%，合格率為100%(見表2)。

2.3 非洲豬瘟病毒比對檢測結(jié)果

參加本比對項目的有9個師級獸醫(yī)實驗室，每個實驗室檢測6份樣品，共計54份，其中53份樣品結(jié)果正確，1份樣品存在較大偏差，符合率為98.15%，合格率為88.89%(見表2)。

表2 兵團師級獸醫(yī)實驗室比對結(jié)果情況表

3 討論與分析

比對試驗是實驗室質(zhì)量控制和質(zhì)量保證的重要措施，對各師實驗室能力建設(shè)進行驗證，確認(rèn)實驗室的管理能力，確保實驗室能夠維持較高的檢測水平，有效的實施獸醫(yī)實驗室的監(jiān)督和管理手段，通過外部質(zhì)量控制手段來測試一個實驗室準(zhǔn)確度的途徑和對實驗室工作能力進行評估驗證的客觀方法，而能力驗證是評價一個實驗室檢測和分析能力的有效手段，各師實驗室在比對實驗活動中的表現(xiàn)是獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室和客戶評價實驗室能力的重要依據(jù)。

比對試驗成績作為各師獸醫(yī)實驗室現(xiàn)場考核檢測操作的評分依據(jù)，比對結(jié)果顯示，12個實驗室中有10實驗室的比對項目全部符合，2個實驗室有1個比對項目存在較大偏差。比對試驗共檢測樣品180份，總體符合率為98.89%。結(jié)果表明，絕大多數(shù)實驗室檢測能力總體較好，實驗室檢測質(zhì)量體系穩(wěn)定可靠，維持了較高檢測水準(zhǔn)。但同時也發(fā)現(xiàn)個別實驗室存在檢測樣品分包編號不規(guī)范的問題，在實驗室質(zhì)量控制和管理方面有待改進。

根據(jù)國家“非洲豬瘟實驗室檢測”等有關(guān)文件[4]，測評非洲豬瘟達標(biāo)的實驗室，也將作為非洲豬瘟授權(quán)實驗室授權(quán)依據(jù)。

4 建 議

為提高實驗室檢測水平，更好的應(yīng)對突發(fā)疫情診斷，做好動物疫病防控流行病學(xué)調(diào)查及檢測，配備相應(yīng)的設(shè)備，培訓(xùn)熟練操作的專業(yè)技術(shù)人員，積極提高檢測能力[5]，加強兵團獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室熒光PCR檢測能力建設(shè)，適應(yīng)目前先進的檢測技術(shù)，為動物疫病防控提供堅實的技術(shù)保障。此次比對試驗中具備熒光PCR檢測條件的9個師實驗室，有8個師實驗室在非洲豬瘟病毒檢測方面，具備開展檢測非洲豬瘟的能力，結(jié)果準(zhǔn)確、操作熟練。不具備熒光PCR檢測條件的實驗室應(yīng)加快實驗室能力建設(shè)，購置相應(yīng)的設(shè)備[6]，培訓(xùn)熟練的技術(shù)人員，提高生物安全防范意識，做好獸醫(yī)實驗室動物疫病的檢測診斷工作。

實驗室質(zhì)量管理體系的構(gòu)建、運作、維持是實驗室確保檢測數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性以及檢測報告質(zhì)量的根本要求。在實驗室質(zhì)量行程過程和過程的各個階段可能影響檢測報告質(zhì)量的各個因素進行有效的管控，并對這些因素采取相應(yīng)的管理和控制，才能確保檢測報告的質(zhì)量，是整個過程處于受控狀態(tài)。結(jié)合本次能力比對情況，認(rèn)真對照實驗室質(zhì)量體系文件，梳理分析目前實驗室管理方面存在的問題和不足，對沒有嚴(yán)格按照質(zhì)量體系文件操作的過程，及時制定整改措施并開展糾正活動，強化實驗室的日常監(jiān)管[7]，不斷提高實驗室管理水平[8]。

針對相關(guān)檢測原始記錄填寫不規(guī)范等問題，如：填寫錯誤的地方只能杠改糾正，不能涂改糾正等，應(yīng)按照實驗室質(zhì)量體系文件要求制定預(yù)防糾正措施，通過監(jiān)督實施，逐漸減少相關(guān)問題的發(fā)生。

移液器、生物安全柜等重點儀器設(shè)備應(yīng)定期經(jīng)過專業(yè)機構(gòu)檢驗、維護，提高實驗的準(zhǔn)確性、科學(xué)性和安全性[9，10]。本次比對試驗中出現(xiàn)2個實驗室有1個比對項目存在較大偏差，其中移液器的準(zhǔn)確性對檢測結(jié)果的準(zhǔn)確度有很大的影響，建議開展實驗儀器的校準(zhǔn)工作。

嚴(yán)格執(zhí)行實驗室體系文件，強化管理，確保監(jiān)測工作科學(xué)規(guī)范，避免實驗室事故發(fā)生。以實驗室系統(tǒng)管理為抓手[11]，加強學(xué)習(xí)及轉(zhuǎn)化，不斷提升動物疫病監(jiān)測能力，拓展監(jiān)測范圍，充分發(fā)揮預(yù)測預(yù)報作用。利用實驗室優(yōu)勢，開展監(jiān)測技術(shù)培訓(xùn)、課題研究推廣，提高師市監(jiān)測水平，為畜牧業(yè)發(fā)展提供服務(wù)。如本次比對試驗中個別檢測報告缺少流轉(zhuǎn)記錄，體現(xiàn)出個別實驗室未嚴(yán)格按照體系文件進行操作管理，實驗室質(zhì)量行程過程出現(xiàn)了不受控的現(xiàn)象，是實驗室檢測報告質(zhì)量的潛在影響因素，應(yīng)加強管理，確保實驗室質(zhì)量管理各個環(huán)節(jié)均在受控狀態(tài)。