王 碩 苗 赟 焦 崇 刁其玉 樸泯宇， 孔路欣 解瑞寶 馬長永 蔣林樹 于 博 屠 焰*

(1.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所，北京 100081；2．北京農(nóng)學(xué)院，奶牛營養(yǎng)學(xué)北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 102206；3．山東銀香偉業(yè)集團(tuán)有限公司，菏澤 274400；4．昌平區(qū)崔村動(dòng)物防疫站，北京 102200)

采食固體飼料是促進(jìn)犢牛瘤胃發(fā)育和從“非反芻”到“反芻”的必備條件，所以應(yīng)盡可能增加犢牛對(duì)固體飼料的干物質(zhì)采食量(DMI)[1-3]。大量研究表明，給哺乳期犢牛補(bǔ)飼干草相比于只飼喂精料會(huì)提高DMI，促進(jìn)瘤胃健康，改善犢牛行為福利[4-7]。全混合日糧(TMR)可以增加奶牛對(duì)飼料的DMI，提高采食時(shí)間并且降低挑食率[8]。因此，飼喂TMR可以保證犢牛和泌乳牛一樣攝入更均衡的營養(yǎng)物質(zhì)和產(chǎn)生更好的瘤胃內(nèi)環(huán)境，從而有助于犢牛瘤胃的健康。最新研究表明，哺乳期犢牛飼喂TMR在產(chǎn)生較大的淀粉采食量的同時(shí)不會(huì)對(duì)DMI和生長性能產(chǎn)生影響[9]。此外，哺乳期犢牛飼喂TMR不僅會(huì)對(duì)行為產(chǎn)生直接影響，而且還可能在其斷奶后產(chǎn)生長期的有利影響[10]。但是，飼喂TMR的后備奶牛和泌乳牛均存在喜歡吃細(xì)粒度飼料的挑食行為[10]。影響挑食的因素包括粗飼料來源、粗飼料物理形態(tài)、飼料粒度和飼料水分含量等[11-14]。已有大量研究表明，飼料的物理形態(tài)以及水分和中性洗滌纖維(NDF)含量可影響犢牛的挑食、健康[15-18]，但目前對(duì)哺乳期犢牛TMR粒度上尚缺乏數(shù)據(jù)支撐。隨著優(yōu)質(zhì)粗飼料價(jià)格的上漲，大豆皮作為非牧草纖維也逐漸成為替代苜蓿和燕麥草的NDF來源之一，并且在斷奶犢牛中產(chǎn)生了非常優(yōu)異的效果[19]。不同NDF來源和粒度TMR是否會(huì)帶來不同的飼養(yǎng)效果，是否會(huì)對(duì)犢牛采食行為產(chǎn)生影響？基于此疑問，本研究在20% NDF水平的基礎(chǔ)上通過探究不同NDF來源(燕麥草和大豆皮)與粒度的TMR對(duì)哺乳期犢牛生長性能、血清生化指標(biāo)和采食行為的影響，以期為哺乳期犢牛營養(yǎng)供給模式提供有力的依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)時(shí)間與地點(diǎn)

本試驗(yàn)于2020年5—7月在山東省銀香偉業(yè)第二牧場進(jìn)行，當(dāng)?shù)販囟葹?8～31 ℃。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物和設(shè)計(jì)

選取(4.2±2.3)日齡和體重[(39.2±3.6) kg]相近的荷斯坦?fàn)倥?5頭(27公18母)，隨機(jī)分配到3個(gè)組，每組15頭(9公6母)。各組分別飼喂不同的TMR：長燕麥草TMR(長燕麥草組，LO組)、燕麥草粉TMR(燕麥草粉組，SO組)和大豆皮粉TMR(大豆皮粉組，SS組)。TMR根據(jù)NRC(2001)[20]配制且營養(yǎng)水平基本保持一致。TMR組成及營養(yǎng)水平見表1。TMR中所有精料原料、燕麥草粉和大豆皮粉都經(jīng)過3 mm的粉碎篩粉碎，長燕麥草是原燕麥草經(jīng)TMR機(jī)攪拌25 min取得，3種粗飼料在賓州篩(PSPS)上的分層情況見表2。

表1 TMR組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))

續(xù)表1項(xiàng)目Items組別 GroupsSOLO SS中性洗滌纖維 NDF18.8918.6618.99酸性洗滌纖維 ADF8.838.728.99鈣 Ca1.011.021.04磷 P0.520.510.49非纖維性碳水化合物 NFC50.1350.3150.72非纖維性碳水化合物/中性洗滌纖維 NFC/NDF2.652.702.67

表2 3種粗飼料在賓州篩上的分層情況

1.3 飼養(yǎng)管理

犢牛島單欄飼養(yǎng)(長×高×寬=4.0 m×1.1 m×1.8 m)，以稻殼為墊料并在每天15:00—16:00更換，以保證犢牛島的干燥衛(wèi)生。犢牛出生2 h內(nèi)飼喂4 L初乳，8 h后再飼喂2 L。2日齡開始飼喂巴氏滅菌鮮奶(每天2次：08:00和18:00)，2～20日齡飼喂4 L/d，21～30日齡飼喂5 L/d，31～56日齡飼喂6 L/d，57～63日齡逐漸斷奶并結(jié)束試驗(yàn)。整個(gè)試驗(yàn)期間犢牛自由飲水，自由采食TMR。

1.4 測定指標(biāo)和方法

1.4.1 TMR營養(yǎng)成分的測定

TMR粉碎后，取少量的樣品在105 ℃的烘箱中干燥6 h，測定干物質(zhì)(DM)含量；采用FOSS全自動(dòng)凱氏定氮儀(Kjeltec 8400，F(xiàn)OSS公司，丹麥)測定粗蛋白質(zhì)(CP)含量；采用索氏提取法測定粗脂肪(EE)含量；取少量樣品在550 ℃的馬弗爐中完全燃燒6 h，測定粗灰分(Ash)含量；采用纖維儀(Fiber Analyzer 200，ANKOM公司，美國)測定中性洗滌纖維(NDF)和酸性洗滌纖維(ADF)含量；采用高錳酸鉀滴定法測定鈣(Ca)含量；采用鉬釩酸鹽比色法測定磷(P)含量。所有營養(yǎng)成分的測定均參考AOAC(2002)[21]。

1.4.2 生長性能

7日齡開始，每7 d晨飼前稱取犢牛體重(14日齡除外)，每14 d量取犢牛的體尺(胸圍、腹圍、體高、十字部高、體斜長和腰角寬)。試驗(yàn)期間每日記錄TMR投料量和剩余量，用于計(jì)算DMI，并計(jì)算平均日增重(ADG)和飼料轉(zhuǎn)化率。

1.4.3 血清生化指標(biāo)

21、35和49日齡晨飼前，每組選取6頭體重相近的公犢牛進(jìn)行頸靜脈采血于10 mL不含抗凝劑的真空采血管中，1 500×g離心30 min后收集血清-80 ℃保存，用于測定血清生化指標(biāo)。比色法(KHB-1280全自動(dòng)生化分析儀，上?？迫A生物工程股份有限公司)測定血清總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)和尿素氮(UN)含量；酶聯(lián)免疫吸附測定法(ST-360全自動(dòng)酶標(biāo)儀，上?？迫A生物工程股份有限公司)測定血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)活性和免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、β-羥基丁酸(BHBA)含量。試劑盒均采購于南京建成生物工程研究所。

1.4.4 挑食指數(shù)

燕麥草、大豆皮、投喂的TMR(每10 d收集1次)和剩余的TMR樣品(30日齡開始每10 d收集1次)用賓州篩進(jìn)行分層分析。賓州篩將飼料分為4部分：>19.00 mm、8.00～19.00 mm、1.18～8.00 mm和<1.18 mm。100 ℃干燥24 h，測量各分離層的DM含量。物理有效因子(pef)為賓州篩總篩上物的DM含量，物理有效中性洗滌纖維(peNDF)為總篩上物的NDF含量乘以pef。挑食指數(shù)計(jì)算公式[16]如下：

挑食指數(shù)=100×犢牛在賓州篩該層
實(shí)際的采食量/犢牛在賓州篩
該層預(yù)計(jì)的采食量。

挑食指數(shù)=1表示沒有挑食行為，<1表示選擇性排斥，>1表示偏愛采食。為了測試犢牛是否對(duì)TMR挑食，從試驗(yàn)第30天開始直到結(jié)束，每10 d每組犢牛測定1次挑食指數(shù)。

1.4.5 行為觀察分析

采用高清紅外攝像機(jī)(?？低晹?shù)碼科技有限公司，50 Hz，25 fps)安裝在犢牛島前方2 m高的位置對(duì)犢牛進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)控。所有視頻存儲(chǔ)在5個(gè)硬盤中用于試驗(yàn)結(jié)束后的觀察和數(shù)據(jù)采集。15和30日齡，每組選取6頭犢牛記錄當(dāng)天24 h內(nèi)所有的采食、反芻、站立、飲水和非營養(yǎng)性口腔行為(non-nutritive oral behavior，NNOB)，每次采食和反芻行為必須大于10 s記為有效行為，當(dāng)行為停止后2 min內(nèi)不再出現(xiàn)，則認(rèn)為此次行為結(jié)束。行為記錄標(biāo)準(zhǔn)見表3，記錄方法和標(biāo)準(zhǔn)均參照Kargar等[16]。

表3 行為記錄標(biāo)準(zhǔn)

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用R 4.0.3和GraphPad Prism 8軟件進(jìn)行分析和作圖。生長性能、DMI、ADG、飼料轉(zhuǎn)化率和挑食指數(shù)采用t檢驗(yàn)方法分別對(duì)粒度和NDF來源進(jìn)行分析。血清生化指標(biāo)和行為學(xué)數(shù)據(jù)首先進(jìn)行l(wèi)og10(X)的轉(zhuǎn)化進(jìn)而保證其符合正態(tài)分布，血清生化指標(biāo)用MIXED模型對(duì)粒度和NDF來源進(jìn)行分析，而行為學(xué)數(shù)據(jù)用t檢驗(yàn)方法進(jìn)行分析。P<0.05表示差異顯著，0.05≤P<0.10表示有差異顯著趨勢。

2 結(jié) 果

2.1 TMR粒度大小分布

由表4可知，僅有LO組的TMR在賓州篩的第1層和第2層出現(xiàn)，且LO組的TMR的peNDF>8.00 mm和peNDF>1.18 mm均顯著高于SO組的TMR(P<0.05)，而SO組的TMR和SS組的TMR的peNDF>8.00 mm和peNDF>1.18 mm差異不顯著(P>0.05)，這符合本試驗(yàn)設(shè)計(jì)。

表4 TMR粒度大小分布

2.2 不同NDF來源和粒度的TMR對(duì)犢牛生長性能的影響

由圖1可知，不同NDF來源和粒度的TMR對(duì)犢牛體重?zé)o顯著影響(P>0.05)，不同NDF來源和粒度的TMR對(duì)犢牛體高、體斜長、十字部高、胸圍和腰角寬均無顯著影響(P>0.05)。35日齡時(shí)，LO組犢牛腹圍有高于SO組的趨勢(0.05≤P<0.10)。

*表示有差異顯著的趨勢(0.05≤P<0.10)，無標(biāo)注表示差異不顯著(P>0.05)。圖2同。

由表5可知，LO組和SO組的各階段飼料轉(zhuǎn)化率無顯著差異(P>0.05)。盡管SS組和SO組的斷奶前和斷奶中飼料轉(zhuǎn)化率無顯著差異(P>0.05)，但是SS組全期飼料轉(zhuǎn)化率顯著高于SO組(P<0.05)。不同NDF來源和粒度的TMR對(duì)犢牛DMI和ADG均無顯著影響(P>0.05)。

表5 不同NDF來源和粒度的TMR對(duì)犢牛生長性能的影響

續(xù)表5項(xiàng)目Items組別 GroupsSOLOSS SEMP值 P-value粒度Particle size來源Source平均日增重 ADG/(kg/d)斷奶前(7～56日齡) Preweaning (7 to 56 days of age)0.670.730.710.030.5460.984斷奶中(57～63日齡) Weaning (57 to 63 days of age)0.931.011.010.050.5570.624全期(7～63日齡) Whole period (7 to 63 days of age)0.700.770.750.030.5150.910飼料轉(zhuǎn)化率 Feed efficiency斷奶前(7～56日齡) Preweaning (7 to 56 days of age)0.670.670.700.010.7980.101斷奶中(57～63日齡) Weaning (57 to 63 days of age)0.500.490.550.030.6680.369全期(7～63日齡) Whole period (7 to 63 days of age)0.640.640.670.010.9990.038

2.3 不同NDF來源和粒度的TMR對(duì)犢牛挑食指數(shù)的影響

由圖2可知，不同NDF來源和粒度的TMR對(duì)犢牛挑食指數(shù)無顯著影響(P>0.05)。隨著犢牛日齡增長，各層挑食指數(shù)趨于1。

圖2 不同NDF來源和粒度的TMR對(duì)犢牛挑食指數(shù)的影響

2.4 不同NDF來源和粒度的TMR對(duì)犢牛血清生化指標(biāo)的影響

由表6可知，從不同粒度的角度看，21日齡時(shí)，LO組的血清ALP活性顯著高于SO組(P<0.05)，且血清AST活性有高于SO組的趨勢(0.05≤P<0.10)；LO組和SO組的其他血清生化指標(biāo)均無顯著差異(P>0.05)。35日齡時(shí)，LO組和SO組的血清生化指標(biāo)均無顯著差異(P>0.05)。49日齡時(shí)，LO組的血清AST活性顯著高于SO組(P<0.05)，且血清ALB活性有低于SO組的趨勢(0.05≤P<0.10)；LO組和SO組的其他血清生化指標(biāo)均無顯著差異(P>0.05)。平均值來看，LO組的血清AST和ALP活性均顯著高于SO組(P<0.05)，LO組和SO組的其他血清生化指標(biāo)均無顯著差異(P>0.05)；不同粒度和日齡的交互作用不影響血清生化指標(biāo)(P>0.05)。

表6 不同NDF來源和粒度的TMR對(duì)犢牛血清生化指標(biāo)的影響

續(xù)表6項(xiàng)目Items組別 GroupsSO LOSS SEMP值(粒度)P-value (particle size)粒度Particle size日齡Day of age粒度×日齡Particle size×day of ageP值(來源)P-value (source)來源Source日齡Day ofage來源×日齡Source×day of age谷草轉(zhuǎn)氨酶 AST/(U/L)21日齡 21 days of age26.9635.0830.801.490.0570.14035日齡 35 days of age33.0135.4832.350.920.3530.83949日齡 49 days of age38.8443.2936.671.080.0120.242平均值 Mean32.9337.9533.270.840.0080.0010.8370.6900.0070.161堿性磷酸 ALP/(U/L)21日齡 21 days of age179.15206.58170.716.730.0280.42935日齡 35 days of age239.30265.98248.686.990.2280.33649日齡 49 days of age285.64303.99281.946.710.3340.730平均值 Mean234.70258.85233.787.090.0070.0010.2160.5140.0010.142免疫球蛋白A IgA/(g/L)21日齡 21 days of age0.650.700.660.040.5980.92735日齡 35 days of age0.770.750.690.040.8450.44649日齡 49 days of age0.710.710.740.040.8150.710平均值 Mean0.710.720.700.020.2250.0010.4420.7920.0010.668免疫球蛋白G IgG/(g/L)21日齡 21 days of age9.539.3710.110.230.7400.39735日齡 35 days of age10.499.479.800.250.1220.30849日齡 49 days of age9.589.459.820.220.7710.426平均值 Mean9.879.439.910.130.9740.7060.5790.7490.2060.765免疫球蛋白M IgM/(g/L)21日齡 21 days of age2.372.872.550.110.1020.57435日齡 35 days of age2.602.552.300.110.8890.29249日齡 49 days of age2.812.662.550.100.5490.317平均值 Mean2.592.692.470.060.2000.9190.9710.8710.8310.715β-羥基丁酸 BHBA/(mmol/L)21日齡 21 days of age0.860.880.890.020.6840.60235日齡 35 days of age0.910.860.890.020.3000.63249日齡 49 days of age0.840.820.840.020.7680.746平均值 Mean0.870.850.870.010.4880.4710.1910.3930.2380.266

從不同NDF來源的角度看，21和35日齡時(shí)，SO組和SS組的血清生化指標(biāo)均無顯著差異(P>0.05)。49日齡時(shí)，SO組的血清ALT活性顯著高于SS組(P<0.05)，SO組和SS組的其他血清生化指標(biāo)均無顯著差異(P>0.05)。平均值來看，SS組的血清TP和GLB含量顯著高于SO組(P<0.05)，SO組和SS組的其他血清生化指標(biāo)均無顯著差異(P>0.05)；不同NDF來源和日齡的交互作用顯著影響血清GLB含量(P<0.05)，有影響血清TP含量的趨勢(0.05≤P<0.10)。

2.5 不同NDF來源和粒度的TMR對(duì)犢牛行為指標(biāo)的影響

由表7可知，15日齡時(shí)，LO組的NNOB時(shí)長有低于SO組的趨勢(0.05≤P<0.10)，LO組的采食次數(shù)有高于SO組的趨勢(0.05≤P<0.10)，而LO組和SO組的其他行為指標(biāo)均無顯著差異(P>0.05)；SO組和SS組的行為指標(biāo)均無顯著差異(P>0.05)。30日齡時(shí)，SO組的飲水時(shí)長和NNOB時(shí)長均顯著高于LO組(P<0.05)，而LO組和SO組的其他行為指標(biāo)均無顯著差異(P>0.05)；SO組的反芻時(shí)長和飲水時(shí)長顯著高于SS組(P<0.05)，SO組的反芻次數(shù)有高于SS組的趨勢(0.05≤P<0.10)，SO組和SS組其他行為指標(biāo)均無顯著差異(P>0.05)。

表7 不同NDF來源和粒度的TMR對(duì)犢牛行為指標(biāo)的影響

3 討 論

3.1 不同NDF來源和粒度的TMR對(duì)犢牛生長性能和體尺的影響

已有大量關(guān)于哺乳期犢牛補(bǔ)飼干草的研究[4,7,9]，但以TMR形式飼喂哺乳期犢牛的研究甚少[9,16]。本試驗(yàn)以任春燕等[18]和馬滿鵬等[19]的研究為基礎(chǔ)，發(fā)現(xiàn)哺乳期犢牛飼喂不同NDF來源和粒度的TMR不會(huì)對(duì)生長性能造成顯著的影響。35日齡時(shí)，飼喂長燕麥草TMR犢牛的腹圍有高于飼喂燕麥草粉TMR犢牛的趨勢，可能是由于35日齡犢牛的消化系統(tǒng)以及反芻行為發(fā)育不完全，長粒度的草在瘤胃中無法進(jìn)一步磨碎消化導(dǎo)致堆積。相比于燕麥草粉TMR，長燕麥草TMR可導(dǎo)致犢牛腰角寬更高，這與Kargar等[22]發(fā)現(xiàn)的長粒度TMR會(huì)顯著提高犢牛腰角寬的結(jié)果相同，但目前數(shù)據(jù)尚無法解釋其原因，這也可能是未來需要關(guān)注的研究點(diǎn)。此外，本試驗(yàn)結(jié)果顯示飼喂大豆皮粉TMR犢牛全期的飼料轉(zhuǎn)化率相比飼喂燕麥草粉TMR犢牛顯著升高，這可能是大豆皮和燕麥草相比含有更多的可消化纖維、可溶性的纖維，進(jìn)而利于微生物進(jìn)一步降解[19]。此外，Wang等[23]的研究表明，與燕麥草相比，飼喂大豆皮的斷奶犢牛瘤胃會(huì)產(chǎn)生更多的總揮發(fā)性脂肪酸和丙酸，改變了瘤胃微生物區(qū)系以及代謝過程。大量的揮發(fā)性脂肪酸會(huì)刺激瘤胃的發(fā)育，提高飼糧的消化利用率。馬滿鵬等[19]的研究結(jié)果顯示，相比于苜蓿草，斷奶后犢牛飼糧中用大豆皮作為主要的NDF來源會(huì)顯著地降低犢牛的料重比，這與本文研究結(jié)果有很好的銜接。哺乳期犢牛固體飼料的DMI低，但是斷奶期間DMI有較大的提升，所以我們推測斷奶后，隨著犢牛對(duì)于TMR采食量的升高，大豆皮粉為主要NDF來源的TMR會(huì)有更高的飼料轉(zhuǎn)化率。

3.2 不同NDF來源和粒度的TMR對(duì)犢牛挑食指數(shù)的影響

挑食一直是奶?？茖W(xué)界關(guān)注的問題，泌乳牛經(jīng)常偏愛細(xì)顆粒飼料，導(dǎo)致瘤胃酸中毒的發(fā)生[24]。研究表明，生命早期的干預(yù)會(huì)對(duì)后期的行為產(chǎn)生巨大的影響[25]。幼齡時(shí)期是學(xué)習(xí)采食的關(guān)鍵時(shí)期，犢牛挑食現(xiàn)象在幼齡時(shí)期就已經(jīng)形成[26]。Devries等[11]研究發(fā)現(xiàn)，斷奶前飼喂干草突然改為飼喂TMR時(shí)，犢牛偏愛采食草顆粒，然而飼喂1個(gè)月后又開始偏愛精料，這可能與犢牛早期的“學(xué)習(xí)”有關(guān)。Kargar等[16]發(fā)現(xiàn)高濕度TMR會(huì)降低犢牛對(duì)中顆粒層的偏愛程度，這與本研究結(jié)果相似。本研究發(fā)現(xiàn)，犢牛對(duì)于長燕麥草TMR的高顆粒層和中顆粒層均存在不同程度的偏愛性。此外，犢牛對(duì)3種TMR均存在輕微的挑食現(xiàn)象，但均沒有顯著的差異，且隨日齡的增長，挑食指數(shù)趨于1，這與Kargar等[16]研究結(jié)果相同。Costa等[27]認(rèn)為幼齡犢牛學(xué)習(xí)的動(dòng)力是由營養(yǎng)需要、瘤胃功能、咀嚼和反芻功能來進(jìn)行驅(qū)動(dòng)，且并通過反饋調(diào)節(jié)機(jī)制進(jìn)行學(xué)習(xí)[28]，所以本研究的結(jié)果也可能揭示了犢牛對(duì)平衡營養(yǎng)攝入和維持瘤胃內(nèi)環(huán)境的自我學(xué)習(xí)過程。由于本研究沒有進(jìn)行斷奶后犢牛試驗(yàn)，無法印證Devries等[11]的研究結(jié)果，這也需要通過進(jìn)一步試驗(yàn)進(jìn)行探究。

3.3 不同NDF來源和粒度的TMR對(duì)犢牛血清生化指標(biāo)的影響

ALT、AST和ALP是體現(xiàn)肝臟功能健康的重要指標(biāo)。與成年反芻動(dòng)物利用短鏈脂肪酸作為能量來源不同，哺乳期犢牛主要依賴于葡萄糖，犢牛可利用乳糖進(jìn)行肝臟糖異生，此能力是成年牛的7～8倍[29-31]。肝臟糖異生的過程增加乳酸的消耗量，也可以保護(hù)犢牛免受瘤胃酸中毒的影響，同時(shí)，糖異生、脂肪酸β氧化和急性期反應(yīng)均是相互關(guān)聯(lián)的肝臟代謝過程，所以哺乳期犢牛肝臟的健康是至關(guān)重要的。本研究中，飼喂長燕麥草TMR犢牛的血清ALT、AST和ALP活性普遍高于飼喂燕麥草粉TMR犢牛，說明在正常飼喂的情況下，哺乳期犢牛飼喂長粒度飼料可能會(huì)對(duì)其肝臟造成一定的損傷。Chishti等[32]研究表明，與飼喂磨碎的燕麥草相比，長燕麥草會(huì)顯著提高觸珠蛋白(HPT)基因的表達(dá)。HPT是一種具有與血紅蛋白結(jié)合能力的血漿蛋白，它是溶血的重要標(biāo)志[33]。當(dāng)紅細(xì)胞被破壞后，HPT會(huì)大量產(chǎn)生以防止血管內(nèi)溶血過程中的鐵丟失和腎臟等損傷[33]。因此，哺乳期犢牛飼喂長粒度的TMR可能會(huì)造成肝臟紅細(xì)胞的損傷，進(jìn)而導(dǎo)致血清ALT、AST和ALP活性的升高。飼喂長燕麥草TMR犢牛在49日齡時(shí)血清ALB的含量顯著低于飼喂燕麥草粉TMR犢牛，這與其他相關(guān)的研究結(jié)果[16]相似。ALB是由肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞合成，體現(xiàn)機(jī)體的免疫狀態(tài)和肝臟健康[34]。血清ALB含量的顯著降低可能與肝功能異常和蛋白質(zhì)代謝有關(guān)。TP和GLB與機(jī)體的免疫力有很高的相關(guān)性。本研究中，飼喂大豆皮粉TMR犢牛的血清TP和GLB含量平均值顯著高于飼喂燕麥草粉TMR犢牛。然而馬滿鵬等[19]認(rèn)為大豆皮替代苜蓿不會(huì)影響斷奶犢牛的血清GLB含量，這可能是由于哺乳期犢牛消化系統(tǒng)發(fā)育不完全，燕麥草的NDF比大豆皮難消化，進(jìn)而導(dǎo)致肝臟的代謝障礙免疫力下降?？傊曃归L燕麥草TMR犢牛的肝臟功能和免疫性能要劣于飼喂燕麥草粉TMR。

3.4 不同NDF來源和粒度的TMR對(duì)犢牛行為指標(biāo)的影響

犢牛行為是衡量其是否受到良好福利待遇的體現(xiàn)。NNOB是采食粗飼料受挫的補(bǔ)償行為，是福利待遇差的表現(xiàn)[35]。本研究發(fā)現(xiàn)，飼喂長燕麥草TMR犢牛的NNOB顯著低于飼喂燕麥草粉TMR犢牛。Castells等[4]發(fā)現(xiàn)補(bǔ)飼干草可以明顯地減少犢牛的NNOB，也有研究表明補(bǔ)飼不同長度的干草以及不同濕度的TMR均會(huì)導(dǎo)致犢牛的NNOB顯著變化[16]，這也進(jìn)一步說明粗飼料的粒度對(duì)減少犢牛的NNOB有重要作用。反芻是監(jiān)控奶牛的良好指標(biāo)，通常被認(rèn)為是奶牛福利的標(biāo)志行為，它與動(dòng)物的生產(chǎn)性能和健康有很大的相關(guān)性[35-38]。研究表明，反芻行為時(shí)間長短與飼糧粒度的大小呈正相關(guān)，粒度越大奶牛的反芻時(shí)間越長[35]。然而本研究表明，飼喂燕麥草粉TMR犢牛的反芻次數(shù)和反芻時(shí)長均大于飼喂大豆皮粉TMR犢牛，且飼喂長燕麥草和飼喂燕麥草粉TMR的犢牛無顯著差異。反芻行為是由瘤網(wǎng)胃壁的收縮而產(chǎn)生的，所以也可能受瘤胃發(fā)育和瘤胃微生物的調(diào)節(jié)[35]。本試驗(yàn)只對(duì)1月齡內(nèi)的犢牛進(jìn)行觀察，目前關(guān)于大豆皮飼喂?fàn)倥?duì)行為的影響未見報(bào)道，但是可能由于大豆皮含有大量的可降解纖維，無法刺激瘤胃壁產(chǎn)生較多反芻行為，進(jìn)而可能增加犢牛瘤胃酸中毒的風(fēng)險(xiǎn)。由于1月齡以內(nèi)犢牛瘤胃發(fā)育和微生物定植不完全，導(dǎo)致瘤胃中小粒度的燕麥草滯留，反復(fù)刺激犢牛產(chǎn)生反芻行為。盡管在早期飼喂長燕麥草TMR犢牛的采食次數(shù)相對(duì)較多，但是其采食量與飼喂燕麥草粉TMR犢牛并無差異，這可能是由于飼喂長燕麥草TMR的犢牛進(jìn)食速度減慢所致，說明飼喂短粒度的TMR比長粒度TMR犢牛進(jìn)食更容易，這也與先前的研究結(jié)果[16]一致。本研究還發(fā)現(xiàn)，30日齡時(shí)飼喂燕麥草粉TMR犢牛的飲水時(shí)間最高，與Kargar等[16]的結(jié)果相反，可能是由于當(dāng)天燕麥草粉TMR中含有較多的塵土；也有研究表明飼糧中的塵土?xí)斐赡膛ｏ嬎康纳仙齕3]?？傊曃归L粒度TMR會(huì)產(chǎn)生較少的NNOB，關(guān)于非飼草纖維作為主要NDF來源飼喂?fàn)倥５男袨閷W(xué)研究甚少，未來也是一個(gè)值得關(guān)注的研究點(diǎn)。

4 結(jié) 論

在本試驗(yàn)條件下，大豆皮粉替代燕麥草粉作為TMR的主要NDF來源對(duì)犢牛有著更好的飼料轉(zhuǎn)化率，但是會(huì)減少反芻時(shí)長，增加瘤胃酸中毒的風(fēng)險(xiǎn)。從TMR粒度的角度看，長粒度TMR可減少犢牛NNOB，建議適當(dāng)增加TMR粒度以保證犢牛的行為福利。