陳 娜 周 瑋 和立文 李 云 陳曉陽,* 張 慶*

(1.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，廣州 510642；2.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)與風(fēng)景園林學(xué)院，廣東木本飼料工程技術(shù)研究中心，廣東省森林植物種質(zhì)創(chuàng)新與利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣州 510642；3.北京林業(yè)大學(xué)生物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，北京 100083)

我國(guó)畜牧業(yè)面臨著常規(guī)性飼料資源短缺的問題，開發(fā)健康環(huán)保的新型飼料是養(yǎng)殖行業(yè)轉(zhuǎn)型的重要途徑。我國(guó)木本植物飼料資源豐富，木本飼料開發(fā)利用潛力很大。黃梁木(Neolamarckiacadamba)又稱團(tuán)花樹，是茜草科(Rubaceae)團(tuán)花屬(Anthocephalus)常綠大喬木[1]。黃梁木葉不僅營(yíng)養(yǎng)價(jià)值全面，而且含有豐富的生物活性成分，如黃酮類、酚類、生物堿、萜類、皂苷、多糖及單寧等，具有抗菌消炎[2-3]、降血糖[4]、抗腹瀉[5]、抗氧化[6]及抗癌[7]等功效，因此，黃梁木葉作為新型非糧飼料有著廣闊的前景。但是，由于黃梁木葉具有纖維含量高、抗?fàn)I養(yǎng)的負(fù)面特性，直接利用原料并不能有效發(fā)揮其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和特殊功效。干燥粉碎處理是最常見的飼料加工方式，普遍存在于個(gè)體養(yǎng)殖戶中；而青貯是一種成本低廉、調(diào)制方便的飼料保存方式，對(duì)黃梁木葉進(jìn)行青貯處理不僅有利于飼料的長(zhǎng)期保存，還可以降低黃梁木葉中的抗?fàn)I養(yǎng)因子，改善適口性[8-9]。此外，研究發(fā)現(xiàn)黃梁木葉與其他青綠飼料混合青貯可以改善發(fā)酵品質(zhì)[10-11]。汪勝楠等[12]分別用25%和50%的青貯黃梁木替代青貯全株玉米飼喂育肥期的樂至黑山羊后發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比，用青貯黃梁木替代青貯全株玉米后，顯著提高了育肥期樂至黑山羊生長(zhǎng)性能、屠宰性能和肉品質(zhì)，且青貯黃梁木50%替代比例的效果優(yōu)于25%替代比例。Chen等[13]研究表明，用30%黃梁木葉飼喂金鯧魚后，對(duì)其腸道菌群的代謝功能有影響，并且推測(cè)金鯧魚腸道細(xì)菌可能參與了營(yíng)養(yǎng)代謝。目前，黃梁木葉在動(dòng)物生產(chǎn)上的應(yīng)用還不多見。因此，本研究通過采用黃梁木葉干粉和青貯黃梁木葉飼喂麻黃雞，探究其對(duì)麻黃雞屠宰性能、小腸形態(tài)和血清生化指標(biāo)的影響，以期為黃梁木在木本飼料領(lǐng)域的研究、開發(fā)和利用提供參考和理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 黃梁木葉飼料制備

試驗(yàn)所用黃梁木葉片采摘于華南農(nóng)業(yè)大學(xué)寧西試驗(yàn)基地，新鮮的黃梁木葉通過干燥粉碎、青貯和接種乳酸菌青貯處理60 d，分別獲得黃梁木葉干粉、青貯黃梁木葉和接種乳酸菌青貯黃梁木葉3種飼料。其中，接種乳酸菌青貯黃梁木葉采用的乳酸菌菌種為乳酸乳球菌(Lactococcuslactis)，由華南農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)與風(fēng)景園林學(xué)院木本飼料實(shí)驗(yàn)室篩選而來，添加水平為1.0×106CFU/g。從飼料廠商購(gòu)買中雞粉狀基礎(chǔ)飼糧，其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物和試驗(yàn)設(shè)計(jì)

挑選576只來源一致、體態(tài)健康、體重為(524.36±12.09) g的30日齡雌性麻黃雞，隨機(jī)分為4個(gè)組，每組設(shè)6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)24只雞。對(duì)照組(A組)飼喂基礎(chǔ)飼糧，B組飼喂基礎(chǔ)飼糧+5%黃梁木葉干粉，C組飼喂基礎(chǔ)飼糧+5%青貯黃梁木葉，D組飼喂基礎(chǔ)飼糧+5%接種乳酸菌青貯黃梁木葉。

1.3 飼養(yǎng)管理

將密封保存的青貯黃梁木葉和接種乳酸菌青貯黃梁木葉取出，用破壁機(jī)分別將2種黃梁木葉青貯飼料進(jìn)行粉碎處理，粉碎成細(xì)小顆粒狀(為保證黃梁木葉青貯飼料的穩(wěn)定，均在飼喂前0.5 h取出配制)。按照5%添加水平(以干物質(zhì)計(jì))，依次在3份基礎(chǔ)飼糧中分別加入黃梁木葉干粉和粉碎后的2種黃梁木葉青貯飼料，并用攪拌機(jī)混合均勻，最后獲得3種添加不同處理類型的黃梁木葉混合飼糧，分別飼喂B組、C組和D組麻黃雞。在適應(yīng)性飼養(yǎng)5 d(預(yù)試期)后進(jìn)行隨機(jī)分組開始試驗(yàn)。正試期30 d，試驗(yàn)期間自由飲食飲水，正常接種疫苗和清潔消毒處理。本試驗(yàn)在廣東省廣州市黃埔區(qū)宏基種禽場(chǎng)進(jìn)行。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1.4 測(cè)定指標(biāo)和方法

1.4.1 飼糧營(yíng)養(yǎng)成分含量

飼糧粗蛋白質(zhì)(CP)、粗脂肪(EE)、中性洗滌纖維(NDF)、酸性洗滌纖維(ADF)、賴氨酸(Lys)、蛋氨酸(Met)、鈣(Ca)和磷(P)含量以及代謝能(ME)參照張麗英[14]《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)(第3版)》方法測(cè)定。

1.4.2 屠宰性能

試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)抽取2只接近平均體重的麻黃雞，禁食12 h后稱量活體重，隨后頸靜脈放血處死稱量屠體重，去毛后稱量胴體重，并計(jì)算屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、腿肌率和胸肌率，測(cè)量肌間脂肪寬度和皮下脂肪厚度。屠宰性能參照《家禽生產(chǎn)性能名詞術(shù)語和度量統(tǒng)計(jì)方法》[15]測(cè)定。

1.4.3 腸道形態(tài)

解剖腹部，打開胸腔，分離腸道后用皮尺測(cè)量十二指腸、空腸、回腸、盲腸和直腸長(zhǎng)度，并計(jì)算各段腸道相對(duì)長(zhǎng)度。

各段腸道相對(duì)長(zhǎng)度(%)=100×
各段腸道長(zhǎng)度/腸道總長(zhǎng)。

取各個(gè)相同部位的十二指腸、空腸和回腸的樣本放入4%多聚甲醛中保存，采用石蠟切片法制作腸道組織切片，在電子顯微鏡下觀測(cè)各腸段絨毛高度和隱窩深度，并計(jì)算絨毛高度/隱窩深度(V/C)值。

1.4.4 血清生化指標(biāo)

試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，于每個(gè)重復(fù)隨機(jī)抽取2只麻黃雞，進(jìn)行翅下靜脈采血。血液采集后靜置2 h，然后以2 500 r/min的速率離心15 min，取上層清液，置于-80 ℃冷凍保存?zhèn)溆?，避免反?fù)凍融。取-80 ℃冷凍保存的血清，解凍后用全自動(dòng)生化分析儀(Chemray 240，深圳雷杜生命科學(xué)股份有限公司)測(cè)定血清白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、總蛋白(TP)、葡萄糖(GLU)、Ca、P、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)含量。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel 2016進(jìn)行整理，用SPSS 24.0軟件進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)，采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較。結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示，P<0.01表示差異極顯著，P<0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 黃梁木葉對(duì)飼糧營(yíng)養(yǎng)成分含量的影響

由表2可知，飼糧添加5%黃梁木葉干粉、5%青貯黃梁木葉和5%接種乳酸菌青貯黃梁木葉對(duì)飼糧中CP、EE、NDF、ADF、Lys、Met、Ca和P含量以及ME均無顯著影響(P>0.05)。

表2 飼糧營(yíng)養(yǎng)成分含量(風(fēng)干基礎(chǔ))

2.2 黃梁木葉對(duì)麻黃雞屠宰性能的影響

由表3可知，與A組(對(duì)照組)相比，B組麻黃雞半凈膛和全凈膛率顯著降低(P<0.05)，但腿肌率顯著提高(P<0.05)；C組和D組麻黃雞肌間脂肪寬度分別顯著降低了18.23%和11.61%(P<0.05)；D組麻黃雞胸肌率顯著提高了12.82%(P<0.05)；B組、C組和D組麻黃雞屠宰率和皮下脂肪厚度無顯著差異(P>0.05)。

表3 黃梁木葉對(duì)麻黃雞屠宰性能的影響

2.3 黃梁木葉對(duì)麻黃雞小腸形態(tài)的影響

由表4可知，與A組相比，C組和D組麻黃雞空腸相對(duì)長(zhǎng)度顯著降低(P<0.05)，D組麻黃雞盲腸相對(duì)長(zhǎng)度顯著增加了10.55%(P<0.05)。由表5可知，與A組對(duì)比，B組麻黃雞十二指腸絨毛高度、隱窩深度和V/C值無顯著變化(P>0.05)；C組和D組麻黃雞十二指腸絨毛高度和V/C值極顯著提高(P<0.01)；D組麻黃雞十二指腸隱窩深度最淺僅為165.27 μm，且與B組相比，隱窩深度顯著降低(P<0.05)。與A組相比，B組麻黃雞空腸絨毛高度極顯著降低(P<0.01)，空腸隱窩深度和V/C值無顯著變化(P>0.05)，但空腸V/C值顯著低于D組(P<0.05)。與A組相比，B組麻黃雞回腸絨毛高度極顯著提高(P<0.01)，且顯著高于C組和D組(P<0.05)，回腸V/C值顯著提高(P<0.05)；C組麻黃雞回腸絨毛高度極顯著提高(P<0.01)；D組麻黃雞回腸絨毛高度極顯著提高(P<0.01)，回腸V/C值顯著提高(P<0.05)。

表4 黃梁木葉對(duì)麻黃雞腸道相對(duì)長(zhǎng)度的影響

表5 黃梁木葉對(duì)麻黃雞小腸形態(tài)的影響

續(xù)表5項(xiàng)目 Items組別 GroupsABCD空腸 Jejunum絨毛高度 Villus height/μm1 425.09±84.7Aa942.64±44.65Bb1 269.04±73.49Aa1 463.23±59.48Aa隱窩深度 Crypt depth/μm178.91±9.84149.04±13.48171.55±9.90162.80±12.79絨毛高度/隱窩深度 V/C8.02±0.43ab6.46±0.36b7.53±0.61ab9.26±0.83a回腸 Ileum絨毛高度 Villus height/μm853.93±29.41Cd1 141.52±54.57Aa973.60±30.30Bc1 078.59±21.94ABb隱窩深度 Crypt depth/μm126.58±10.20141.03±11.96138.59±6.78126.37±9.17絨毛高度/隱窩深度 V/C6.88±0.35b8.41±0.85a7.09±0.34ab8.71±0.51a

2.4 黃梁木葉對(duì)麻黃雞血清生化指標(biāo)的影響

由表6可知，與A組相比，B組、C組和D組麻黃雞血清GLU和TC含量極顯著降低(P<0.01)，其中D組血清TC含量顯著低于C組(P<0.05)。除此之外，各組麻黃雞血清ALB、GLB、TP、Ca、P、TG、HDL和LDL含量均無顯著差異(P>0.05)。

表6 黃梁木葉對(duì)麻黃雞血清生化指標(biāo)的影響

3 討 論

3.1 黃梁木葉對(duì)麻黃雞屠宰性能的影響

屠宰性能是畜禽較為重要的生產(chǎn)指標(biāo)，也是評(píng)價(jià)肉雞產(chǎn)肉性能的主要指標(biāo)。在本試驗(yàn)中，飼糧添加接種乳酸菌青貯黃梁木葉能顯著提高麻黃雞的胸肌率，并且能顯著降低肌間脂肪寬度；飼糧添加青貯黃梁木葉對(duì)降低肌間脂肪寬度也有顯著性的作用。研究表明，多種中藥材具有降脂的作用，主要是黃酮類、酚類和多聚糖等成分發(fā)揮了功效[16-18]。這意味著，青貯的黃梁木葉具有一定的降脂作用，這可能與青貯黃梁木葉中的類黃酮、多糖等活性成分發(fā)揮了一部分降脂的功效有關(guān)；同時(shí)，青貯黃梁木葉中存在的大量乳酸菌也可能通過協(xié)調(diào)腸道菌群來調(diào)控體脂的沉積。而飼糧添加黃梁木干粉出現(xiàn)的結(jié)果可能是由于黃梁木葉干粉影響了麻黃雞的生長(zhǎng)發(fā)育，進(jìn)而導(dǎo)致屠宰性能顯著差于對(duì)照組。

3.2 黃梁木葉對(duì)麻黃雞血清生化指標(biāo)的影響

血液是動(dòng)物機(jī)體的生命之源，主要參與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的運(yùn)輸和新陳代謝，調(diào)節(jié)體溫和酸堿平衡。在實(shí)際生產(chǎn)中，對(duì)畜禽體進(jìn)行血液生化指標(biāo)的檢測(cè)具有非常重要的意義，不但可以了解其營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的代謝情況，還可以評(píng)估動(dòng)物的健康狀態(tài)，揭露潛在疾病。其中，血清蛋白在肉雞血液中扮演著非常重要的角色。首先，血清TP的功能是多方面的，不僅可以保證血管內(nèi)外管壁正常的滲透壓，還可以調(diào)節(jié)各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在血液中的運(yùn)輸，同時(shí)也是機(jī)體免疫系統(tǒng)的一部分[19]。ALB具有修補(bǔ)組織、運(yùn)輸物質(zhì)和維持血液滲透壓的作用。由于血清的ALB主要在肝臟中合成，因此可以通過檢測(cè)ALB含量評(píng)估肝臟是否健康[20]。血清GLB主要具有免疫和運(yùn)輸物質(zhì)功能。此外，TG、TC、HDL和LDL是反映脂肪代謝的指標(biāo)，在一定程度上也可以衡量飲食是否均衡。在本試驗(yàn)中，B組、C組、D組麻黃雞血清GLU和TC含量較對(duì)照組極顯著降低，血清LDL含量有降低趨勢(shì)但差異并不顯著，這進(jìn)一步驗(yàn)證了黃梁木葉具有降脂和降糖的效果。除此之外，B組、C組和D組麻黃雞血清ALB、GLB、TP、Ca、P、TG、HDL和LDL含量與對(duì)照組相比均無顯著差異，間接說明飼糧添加青貯黃梁木葉對(duì)麻黃雞無毒害作用。

3.3 黃梁木葉對(duì)麻黃雞小腸形態(tài)的影響

小腸不僅是營(yíng)養(yǎng)吸收的主要場(chǎng)所，還是重要的免疫器官。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在小腸的吸收效率直接影響肉雞的生長(zhǎng)發(fā)育，其與小腸的形態(tài)密切相關(guān)。小腸形態(tài)主要包括絨毛高度、隱窩深度和V/C值等指標(biāo)，分別代表了小腸可吸收面積、腸道細(xì)胞生成速率和小腸功能的狀態(tài)等。絨毛高度提高和隱窩深度變淺均能表示小腸形態(tài)的改善，V/C值則可以反映小腸的吸收能力[21]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，飼糧添加5%黃梁木葉干粉顯著提高了麻黃雞回腸絨毛高度和V/C值；添加5%青貯黃梁木葉顯著提高了十二指腸和回腸的絨毛高度，顯著提高了十二指腸V/C值；添加5%接種乳酸菌青貯黃梁木葉顯著增加了盲腸相對(duì)長(zhǎng)度，顯著提高了十二指腸和回腸的絨毛高度，顯著提高了十二指腸和回腸V/C值。這表明黃梁木葉能在一定程度上改善小腸腸道的形態(tài)，但在相同添加量上，接種乳酸菌青貯黃梁木葉處理效果最佳(D組>C組>B組)。類似地，黃梁木葉這種改善動(dòng)物腸道形態(tài)的作用在辣木、桑葉等其他木本植物也有報(bào)道[22-24]，陶淑霞等[25]認(rèn)為發(fā)酵辣木中含有抗菌性的某些物質(zhì)在小腸中發(fā)揮作用后會(huì)影響麻黃雞小腸絨毛和杯狀細(xì)胞的發(fā)育進(jìn)而影響小腸各段的形態(tài)。相較于黃梁木葉中成分的作用而言，乳酸菌對(duì)腸道產(chǎn)生的影響效應(yīng)則更加明確。周響艷等[26]認(rèn)為，乳酸菌可能通過腸道營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)載體的mRNA表達(dá)上調(diào)對(duì)小腸絨毛生長(zhǎng)發(fā)育狀況產(chǎn)生影響。Jahromi等[26]研究顯示，乳酸菌可使肉雞腸道3種重要的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)載體的mRNA表達(dá)上調(diào)。

由此可見，飲食結(jié)構(gòu)、生活環(huán)境會(huì)影響腸道黏膜的形成，因此，在動(dòng)物生產(chǎn)中，應(yīng)給予其豐富的營(yíng)養(yǎng)和保證適宜的居住環(huán)境，以改善其腸道形態(tài)，提高腸道的免疫機(jī)能，促進(jìn)畜禽的健康。

4 結(jié) 論

飼糧添加一定量的黃梁木葉可以降低麻黃雞的血糖和血脂，并在一定程度上能夠促進(jìn)小腸的形態(tài)發(fā)育，5%接種乳酸菌青貯黃梁木葉有助于提高麻黃雞屠宰性能。在本試驗(yàn)條件下，接種乳酸菌青貯黃梁木葉的飼喂效果優(yōu)于青貯黃梁木葉和黃梁木葉干粉。