陳圣君，李波，陳國柱，楊丹

急性腦梗死主要因腦部動脈粥樣硬化和血栓造成局部腦組織區(qū)域血液供應(yīng)障礙，導(dǎo)致腦組織急性缺血缺氧性病變壞死，進(jìn)而產(chǎn)生對應(yīng)的神經(jīng)功能缺失表現(xiàn)［1］。據(jù)統(tǒng)計，急性腦梗死發(fā)病率約占臨床腦血管疾病的80%，是人類常見死亡原因之一，嚴(yán)重威脅人們的生命健康與生活質(zhì)量［2］。研究提示，對急性腦梗死患者實施超早期及急性治療是減緩腦組織損傷的有效措施，而及時診斷與準(zhǔn)確評估患者病情是早期干預(yù)的前提，對患者的康復(fù)及預(yù)后至關(guān)重要［3］。因此，為急性腦梗死臨床診斷尋求科學(xué)靈敏的血清學(xué)指標(biāo)具有重要研究價值。視錐蛋白樣蛋白1（VILIP-1）可與鈣離子結(jié)合，參與維持腦部神經(jīng)功能正常運行，已有研究表明，VILIP-1指標(biāo)可用于評估老年早期腦萎縮程度［4］。CXC型趨化因子配體16（CXCL16）屬于趨化因子CXC家族，當(dāng)其表達(dá)量高于參考范圍時，能夠激活機體免疫反應(yīng)并加速動脈粥樣硬化形成［5］。另外，近年來研究發(fā)現(xiàn)，腦血管缺血性疾病的發(fā)生通常伴隨抗心磷脂抗體（ACA）水平的升高［6］，由此認(rèn)為該指標(biāo)可在一定程度上反映血管內(nèi)皮損傷程度?；诖?，本研究探討了血清VILIP-1、CXCL16及ACA水平與急性腦梗死患者病情及預(yù)后的相關(guān)性，以期為臨床急性腦梗死的早期診斷提供參考，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年6月—2020年8月杭州市富陽區(qū)第一人民醫(yī)院收治的急性腦梗死患者（急性腦梗死組，n=116），以及同期在本院健康體檢者（對照組，n=60）作為研究對象。急性腦梗死組患者根據(jù)神經(jīng)功能損傷程度分為輕、中、重度損傷亞組（n=36、48、32），根據(jù)顱腦電子計算機斷層掃描（CT）檢查的腦梗死面積分為大、中、小面積梗死亞組（n=30、55、31），根據(jù)改良Rankin量表（mRS）分為預(yù)后良好、預(yù)后不良亞組（n=70、46）。

對照組中男32例、女28例，年齡35～75歲，平均年齡（64.5±10.8）歲，體質(zhì)指數(shù)（BMI）18～27 kg/m2，平均BMI（23.6±2.4）kg/m2；急性腦梗死組中男66例、女50例，年齡38～77歲，平均年齡（65.7±11.5）歲，BMI 18～28 kg/m2，平均 BMI（23.8±2.6）kg/m2，合并高血壓68例、糖尿病40例、高脂血癥34例、飲酒史39例。兩組性別、年齡、BMI比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=0.203，t=0.678，t=0.496，P均>0.05）。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：符合《中國急性缺血性腦卒中診治指南2018》［7］中有關(guān)急性腦梗死患者的診斷標(biāo)準(zhǔn)；初次發(fā)病，既往無急性腦梗死史；發(fā)病至入院間隔時間<24 h；經(jīng)CT、MRI等影像學(xué)檢查確診；臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并惡性腫瘤、全身性感染疾病、自身免疫性疾病；腦部曾有外科手術(shù)史；心肝腎等重要器官功能嚴(yán)重?fù)p傷；腦出血；近期使用過抗凝藥物。

1.3 檢測方法 抽取研究對象外周靜脈血5 ml，以3 000 r/min離心15 min（離心半徑為13.5 cm）后收集上清液，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）法檢測血清VILIP-1、ACA水平，檢測試劑盒購自上海西唐生物科技有限公司；采用化學(xué)發(fā)光法檢測血清CXCL16水平，檢測試劑盒購自北京冬歌博業(yè)生物科技有限公司。所有操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.4 分組標(biāo)準(zhǔn) 梗死面積：采用CT測定腦梗死面積，腦梗死灶最大層面直徑<1.5 cm為小面積梗死，1.5～5.0 cm為中面積梗死，>5.0 cm為大面積梗死。

神經(jīng)功能損傷程度：根據(jù)美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表（NIHSS）評分評價急性腦梗死組患者神經(jīng)功能損傷程度［8］，NIHSS評分0～15分為輕度損傷，16～30分為中度損傷，31～45分為重度損傷。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比較 急性腦梗死組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.0.5），見表1。

表1 兩組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比較（±s）Table 1 Comparison of serum levels of VILIP-1，CXCL16 and ACA between acute cerebral infarction patients and healthy examinees

表1 兩組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比較（±s）Table 1 Comparison of serum levels of VILIP-1，CXCL16 and ACA between acute cerebral infarction patients and healthy examinees

注：VILIP-1=視錐蛋白樣蛋白1，CXCL16=CXC型趨化因子配體16，ACA=抗心磷脂抗體

ACA（mg/L）對照組 60 1.25±0.33 1.45±0.42 0.33±0.10急性腦梗死組 116 8.53±2.84 2.47±0.83 1.17±0.38 t值 -19.760 -8.937 -16.803 P值 <0.001 <0.001 <0.001組別 例數(shù) VILIP-1（μg/L）CXCL16（μg/L）

2.2 輕、中、重度損傷亞組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比較 輕、中、重度損傷亞組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。其中中、重度損傷亞組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平高于輕度損傷亞組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；重度損傷亞組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平高于中度損傷亞組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表2。

表2 輕、中、重度損傷亞組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比較（±s）Table 2 Comparison of serum levels of VILIP-1，CXCL16 and ACA in mild，moderate and severe neurological impairment subgroups

表2 輕、中、重度損傷亞組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比較（±s）Table 2 Comparison of serum levels of VILIP-1，CXCL16 and ACA in mild，moderate and severe neurological impairment subgroups

注：與輕度損傷亞組比較，aP<0.05；與中度損傷亞組比較，bP<0.05

ACA（mg/L）組別 例數(shù) VILIP-1（μg/L）CXCL16（μg/L）輕度損傷亞組 36 6.27±1.73 1.90±0.54 0.84±0.27中度損傷亞組 48 8.55±2.28a 2.46±0.65a 1.26±0.29a重度損傷亞組 32 11.03±2.51ab 3.12±0.87ab 1.42±0.36ab F值 39.951 26.733 34.258 P值 <0.001 <0.001 <0.001

2.3 大、中、小面積梗死亞組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比較 大、中、小面積梗死亞組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。其中中、大面積梗死亞組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平高于小面積梗死亞組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；大面積梗死亞組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平高于中面積梗死亞組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表3。

表3 大、中、小面積梗死亞組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比較（±s）Table 3 Comparison of serum levels of VILIP-1，CXCL16 and ACA in small，medium and large infarction subgroups

表3 大、中、小面積梗死亞組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比較（±s）Table 3 Comparison of serum levels of VILIP-1，CXCL16 and ACA in small，medium and large infarction subgroups

注：與小面積梗死亞組比較，aP<0.05；與中面積梗死亞組比較，bP<0.05

ACA（mg/L）小面積梗死亞組 31 6.68±1.82 1.96±0.54 0.92±0.36中面積梗死亞組 55 8.19±2.49a 2.36±0.70a 1.19±0.34a大面積梗死亞組 30 11.05±2.58ab 3.19±0.80ab 1.40±0.35ab F值 27.172 25.471 14.376 P值 <0.001 <0.001 <0.001組別 例數(shù) VILIP-1（μg/L）CXCL16（μg/L）

2.4 預(yù)后良好、預(yù)后不良亞組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比較 預(yù)后不良亞組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平高于預(yù)后良好亞組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表4。

表4 預(yù)后良好、預(yù)后不良亞組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比較（±s）Table 4 Comparison of serum levels of VILIP-1，CXCL16 and ACA in good and poor prognosis subgroups

表4 預(yù)后良好、預(yù)后不良亞組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比較（±s）Table 4 Comparison of serum levels of VILIP-1，CXCL16 and ACA in good and poor prognosis subgroups

ACA（mg/L）預(yù)后良好亞組 70 7.21±2.29 2.11±0.62 1.02±0.34預(yù)后不良亞組 46 10.53±2.42 3.01±0.81 1.40±0.33 t值 7.468 6.805 5.856 P值 <0.001 <0.001 <0.001組別 例數(shù) VILIP-1（μg/L）CXCL16（μg/L）

2.5 血清VILIP-1、CXCL16、ACA預(yù)測急性腦梗死預(yù)后分析 繪制血清VILIP-1、CXCL16、ACA預(yù)測急性腦梗死預(yù)后的ROC曲線，結(jié)果顯示，血清VILIP-1、CXCL16、ACA預(yù)測急性腦梗死預(yù)后的AUC分別為0.848、0.820、0.784（表5、圖1）。

圖1 血清VILIP-1、CXCL16、ACA預(yù)測急性腦梗死預(yù)后的ROC曲線Figure 1 ROC curve analysis of serum VILIP-1，CXCL16 and ACA in predicting the prognosis of acute cerebral infarction

表5 血清VILIP-1、CXCL16、ACA預(yù)測急性腦梗死預(yù)后的AUC、靈敏度、特異度Table 5 The AUC，sensitivity and specificity of serum VILIP-1，CXCL16 and ACA in predicting the prognosis of acute cerebral infarction

3 討論

急性腦梗死具有起病急、發(fā)病率高、致殘率高、病死率高等特點，嚴(yán)重威脅患者的生命安全，也給患者家庭帶來了沉重的負(fù)擔(dān)。因此，尋找準(zhǔn)確且有效的檢測指標(biāo)，及時干預(yù)治療對于急性腦梗死的臨床防治工作意義重大。ACA是一種以血小板和內(nèi)皮細(xì)胞膜上帶負(fù)電荷的心磷脂為靶抗原的自身抗體，可與內(nèi)皮細(xì)胞上的磷脂結(jié)合蛋白相互結(jié)合，使得細(xì)胞膜磷脂成分減少，前列腺素合成量降低，同時介導(dǎo)花生四烯酸大量釋放，引起血管內(nèi)皮損傷，且隨著局部血管收縮，血小板聚合效果增強，影響機體的抗凝作用，進(jìn)而導(dǎo)致血栓形成風(fēng)險增加［10-11］。本研究結(jié)果顯示，急性腦梗死組血清ACA水平高于對照組，提示ACA指標(biāo)在腦梗死發(fā)病過程發(fā)揮了一定的作用。急性腦梗死可由動脈硬化發(fā)展而來，患者發(fā)病過程中內(nèi)皮細(xì)胞受到損傷導(dǎo)致細(xì)胞膜上的磷脂成分暴露，并刺激機體產(chǎn)生ACA，進(jìn)一步誘發(fā)血栓形成，從而引發(fā)惡性循環(huán)［12-13］。

VILIP-1屬于小分子胞質(zhì)蛋白，主要表達(dá)于腦部神經(jīng)元，具有較高的神經(jīng)系統(tǒng)特異性；其可通過結(jié)合鈣離子并調(diào)控鈣平衡發(fā)揮相關(guān)生物學(xué)作用。本研究結(jié)果顯示，急性腦梗死組血清VILIP-1水平高于對照組，表明VILIP-1指標(biāo)一定程度上可評估腦梗死發(fā)病情況。已有研究表明，VILIP-1能夠驅(qū)動腦脊液中的tau蛋白，使其聚集并對神經(jīng)元產(chǎn)生毒性，導(dǎo)致微管蛋白失效，從而引起神經(jīng)功能衰退［14-15］。由此可見，VILIP-1水平與腦損傷疾病進(jìn)展均有一定的相關(guān)性，可作為腦部損傷的敏感標(biāo)志物。而急性腦梗死患者腦組織因缺血缺氧，致使腦部神經(jīng)元受損，進(jìn)而使胞內(nèi)的VILIP-1大量釋放到細(xì)胞外，并進(jìn)入外周血，因此血清VILIP-1水平呈升高表現(xiàn)［16］。

本研究結(jié)果顯示，急性腦梗死組血清CXCL16水平高于對照組。有關(guān)研究結(jié)果表明，炎性反應(yīng)是腦梗死發(fā)生后進(jìn)一步誘發(fā)腦損傷進(jìn)展的關(guān)鍵病理過程，是導(dǎo)致血管內(nèi)皮與神經(jīng)功能損傷惡化的重要因素［17］。CXCL16屬于趨化因子，可在細(xì)胞區(qū)及淋巴結(jié)中表達(dá)，通過參與炎性反應(yīng)和新生血管形成維持機體免疫系統(tǒng)的自我穩(wěn)定；而當(dāng)組織發(fā)生病變時，CXCL16作為血管源性因子在誘導(dǎo)血管生成的同時也易導(dǎo)致斑塊不穩(wěn)定性增加，引發(fā)出血及破裂［18-19］。XING等［20］研究顯示，CXCL16水平與急性冠脈綜合征病情及炎癥嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，對腦損傷疾病進(jìn)展有促進(jìn)作用。發(fā)生腦梗死后，激活的膠質(zhì)細(xì)胞將釋放腫瘤壞死因子、白介素等炎性因子，隨著促炎信號的增強，內(nèi)皮細(xì)胞趨化因子及其受體水平上調(diào)，趨化功能逐漸加強，導(dǎo)致CXCL16從細(xì)胞表面脫落而參與淋巴細(xì)胞群的遷移，血清CXCL16表達(dá)量增加。

NIHSS評分是評價腦血管疾病后神經(jīng)功能損傷程度的重要標(biāo)準(zhǔn)，可綜合評估腦梗死患者的腦損傷嚴(yán)重程度；此外，可通過腦部影像學(xué)檢查評判患者腦梗死面積，梗死面積越大意味著患者動脈供血區(qū)腦組織壞死和軟化情況越嚴(yán)重。本研究將急性腦梗死患者按NIHSS評分、梗死面積及預(yù)后情況分亞組并進(jìn)行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平隨著急性腦梗死患者NIHSS評分的升高、梗死面積的增大呈逐漸上升趨勢，提示血清VILIP-1、CXCL16、ACA參與神經(jīng)功能損傷過程，是評估腦梗死患者病情嚴(yán)重程度的敏感指標(biāo)。腦梗死面積指腦組織壞死、軟化區(qū)域大小，其與神經(jīng)功能損傷是急性腦梗死發(fā)生發(fā)展過程中兩個同時存在且相互影響的病理生理特征。隨著腦梗死斑塊的擴(kuò)大，大量ACA被刺激形成，促使血小板聚合，且可在一定程度上推動局部炎性反應(yīng)發(fā)生。此外，隨著腦梗死病情不斷發(fā)展，患者腦組織神經(jīng)元發(fā)生變性甚至凋亡，即神經(jīng)元損傷，使得其中的VILIP-1因子表達(dá)失常并進(jìn)入血液循環(huán)系統(tǒng)，引發(fā)血清VILIP-1水平上升；且神經(jīng)元損傷可促進(jìn)促炎性信號釋放，從而導(dǎo)致趨化因子CXCL16發(fā)生高表達(dá)。另外，本研究結(jié)果顯示，預(yù)后不良的急性腦梗死患者血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平高于預(yù)后良好者，且血清VILIP-1、CXCL16、ACA預(yù)測急性腦梗死預(yù)后情況的AUC分別為0.848、0.820、0.784，說明VILIP-1、CXCL16及ACA指標(biāo)對于腦梗死患者預(yù)后情況具有較好的診斷作用及預(yù)測價值。

綜上所述，急性腦梗死患者機體血清VILIP-1、CXCL16及ACA水平較健康人群明顯上升，且各指標(biāo)的表達(dá)與腦梗死損傷程度分型及臨床預(yù)后密切相關(guān)，可作為預(yù)測急性腦梗死預(yù)后情況的有效指標(biāo)。

作者貢獻(xiàn)：陳圣君進(jìn)行文章構(gòu)思與設(shè)計、統(tǒng)計學(xué)結(jié)果分析、撰寫論文；李波、陳國柱進(jìn)行研究實施、資料收集整理、質(zhì)量控制與文章修訂；楊丹進(jìn)行文章審校，并對文章整體負(fù)責(zé)。

本文無利益沖突。