顏廷帥，時(shí)立波，劉海亮，裴龍飛，陳 玲，張寶千，竇寶存

[1.寧陽(yáng)縣林業(yè)保護(hù)發(fā)展中心，山東 寧陽(yáng) 271440；2.中化現(xiàn)代農(nóng)業(yè)（山東）有限公司，山東 濟(jì)南 250199；3.中化（海南）作物科技有限公司，海南 ?？?570100]

谷氨酸以蛋白質(zhì)的重要組成部分、多功能肽的組分及游離態(tài)存在于植物體內(nèi)，在氮素同化[1-2]、氨基酸合成與代謝[3-4]、葉綠素合成[5]、根系生長(zhǎng)調(diào)控[6]等過(guò)程中具有重要作用，被稱為核心氨基酸[7]。同時(shí)，外源施用谷氨酸具有促進(jìn)種子萌發(fā)[8-9]、葉綠素合成[10]、根系生長(zhǎng)[6]以及提升果實(shí)品質(zhì)[11-12]等效果。

氨基酸有L 型和D 型2 種光學(xué)異構(gòu)體，自然界的氨基酸主要以L 型存在。部分D 型氨基酸如D-絲氨酸、D-丙氨酸對(duì)植物生長(zhǎng)具有抑制作用，部分D型氨基酸如D-纈氨酸、D-脯氨酸、D-甲硫氨酸等對(duì)植物生長(zhǎng)具有促進(jìn)作用[13-18]。而關(guān)于D 型谷氨酸的研究目前較少。因此，筆者以玉米幼苗為試驗(yàn)材料，通過(guò)水培法研究了外源施加D/L-谷氨酸對(duì)玉米葉綠素含量以及根系和地上部生長(zhǎng)的影響，以期為谷氨酸的合理應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試材料

供試玉米品種為鄭單958，由河南省農(nóng)科院糧食作物研究所育成，2000 年通過(guò)審定。

1.2 試驗(yàn)方法

采用沙培育苗，待玉米長(zhǎng)至2 葉一心時(shí)挑選整齊一致的幼苗，將根用蒸餾水沖洗干凈，然后移入裝有1/8 Hoagland 和Arnon 營(yíng)養(yǎng)液的黑色塑料桶（上部開(kāi)口直徑25.5 cm，底部直徑22.5 cm，高27.0 cm）進(jìn)行水培[19]。

玉米移入水培桶3 d 后進(jìn)行處理，即在營(yíng)養(yǎng)液中添加2 種不同濃度（0.5 和5 mg/L）的D-谷氨酸和L-谷氨酸，分別記為0.5 D、0.5 L、5 D 和5 L；設(shè)不添加外源谷氨酸的處理為對(duì)照，記為CK。試驗(yàn)共5個(gè)處理，每處理3 次重復(fù)，共15 盆，隨機(jī)區(qū)組排列。保持各處理光照和溫度一致，每3 d 更換1 次營(yíng)養(yǎng)液。

1.3 采樣及測(cè)定方法

處理20 d 后，用直尺測(cè)量株高，用游標(biāo)卡尺測(cè)量莖基部莖粗。用95 %乙醇浸提比色法測(cè)定葉片單位面積葉綠素含量[20]，用Win RHIZO PRO 2007 根系分析系統(tǒng)軟件（Regent Instr. Inc., Canada）掃描并分析根長(zhǎng)、表面積、總體積以及不同徑級(jí)根長(zhǎng)和表面積[21]，之后將地上部和根系于105℃殺青30 min，75℃烘干至恒重，分別稱量其干重。

2 結(jié)果與分析

2.1 外源D/L-谷氨酸對(duì)玉米幼苗葉綠素含量的影響

由表1 可知，0.5 D 處理葉綠素a、葉綠素b 和總?cè)~綠素含量分別比CK 高14.68%、14.00%和14.37%，但差異未達(dá)顯著水平；0.5 L 處理的葉綠素a、葉綠素b 和總?cè)~綠素含量與CK 相當(dāng)；而5 D 和5 L 處理的葉綠素a、葉綠素b 和總?cè)~綠素含量分別比CK低33.31% 和26.68%、34.47% 和26.93%、33.79% 和26.76%，差異達(dá)顯著水平。由此可知，低濃度的外源D-谷氨酸處理可增加玉米幼苗葉綠素含量，而高濃度的外源D/L-谷氨酸顯著降低了玉米幼苗葉綠素含量。

表1 添加外源D/L-谷氨酸后玉米幼苗的葉綠素含量（mg/dm2）

2.2 外源D/L-谷氨酸對(duì)玉米幼苗生長(zhǎng)的影響

由表2 可知，0.5 L 和0.5 D 處理的莖粗、株高、地上部干重和根干重均優(yōu)于CK，其中0.5 L 和0.5 D 處理的莖粗顯著粗于CK，0.5 L 處理的地上部干重顯著重于CK，但0.5 L 與0.5 D 處理間各生長(zhǎng)指標(biāo)均無(wú)顯著差異；而5 L 和5 D 處理的莖粗、株高和地上部干重均差于CK，其中5 L 處理的株高顯著矮于CK，其他指標(biāo)與CK 差異不顯著。這表明0.5 mg/L D/L-谷氨酸均促進(jìn)了玉米幼苗地上部的生長(zhǎng)，而5 mg/L D/L-谷氨酸對(duì)玉米幼苗地上部的生長(zhǎng)表現(xiàn)出一定的抑制作用。

表2 添加外源D/L-谷氨酸后玉米幼苗的生長(zhǎng)情況

2.3 外源D/L-谷氨酸對(duì)玉米幼苗根系發(fā)育的影響

由表3 可知，0.5 L 和0.5 D 處理的總根長(zhǎng)顯著長(zhǎng)于CK，總根表面積和總根體積顯著高于CK；而5 L 和5 D 處理的總根長(zhǎng)短于CK，總根表面積和總根體積低于CK，但差異未達(dá)顯著水平；總根尖數(shù)方面，添加谷氨酸的各處理均與CK 無(wú)顯著差異，但0.5 D處理的總根尖數(shù)顯著高于0.5 L 處理和5 D 處理；各處理的根平均直徑無(wú)顯著性差異。這表明添加0.5 mg/L D/L-谷氨酸均顯著增加了玉米幼苗的總根長(zhǎng)、總根表面積和總根體積；而添加5 mg/L D/L-谷氨酸對(duì)玉米幼苗根系各項(xiàng)形態(tài)指標(biāo)均無(wú)顯著影響。

前人的研究表明，外源谷氨酸能夠?qū)е聰M南芥根系發(fā)育形成“主根短而側(cè)根較多”的特殊形態(tài)[6]。結(jié)合圖1 和表3 的數(shù)據(jù)可知，0.5 mg/L 的D-谷氨酸處理，玉米幼苗的總根尖數(shù)顯著多于同濃度的L-谷氨酸處理；5 mg/L 的D-谷氨酸處理總根尖數(shù)與同濃度的L-谷氨酸處理無(wú)顯著差異?？梢?jiàn)，低濃度D-谷氨酸能夠形成玉米幼苗根系“主根短而側(cè)根較多”的現(xiàn)象（圖1）。

圖1 添加外源D/L-谷氨酸后玉米幼苗根系的生長(zhǎng)情況

表3 添加外源D/L-谷氨酸后玉米幼苗的根系特征參數(shù)

3 結(jié)論與討論

Forsum 等[16]的研究表明，無(wú)氮MS 培養(yǎng)基中添加1.47 mg/L D-谷氨酸對(duì)擬南芥的生長(zhǎng)無(wú)影響。而筆者的水培試驗(yàn)結(jié)果顯示，添加0.5 mg/L D-谷氨酸顯著促進(jìn)了玉米幼苗地上部的生長(zhǎng)；添加5 mg/L D-谷氨酸對(duì)玉米地上部生長(zhǎng)產(chǎn)生了一定的不利影響，顯著降低了玉米幼苗的葉綠素含量，但對(duì)根系的影響不明顯。由此可見(jiàn)，不同植物對(duì)外源D-谷氨酸的反應(yīng)濃度不同。

李宗菊等[22]在1/2MS 固體培養(yǎng)基中添加5 mg/L L-谷氨酸，所培養(yǎng)的滿天星的干重、葉綠素含量和凈光合速率均顯著增加；吳良?xì)g等[23]在營(yíng)養(yǎng)液中添加10 mg/L L-谷氨酸，所培養(yǎng)的水稻生物量顯著增加；武雪萍等[24]在營(yíng)養(yǎng)液中添加20 mg/L L-谷氨酸，提高了煙草的氨基酸含量、葉綠素含量及根系活力；主春福[25]在Hoagland 營(yíng)養(yǎng)液中添加7.35 mg/L L-谷氨酸，所培養(yǎng)的平邑甜茶的根長(zhǎng)和側(cè)根數(shù)量均增加，在Hoagland 營(yíng)養(yǎng)液中添加73.5 mg/L L-谷氨酸，所培養(yǎng)的平邑甜茶的根長(zhǎng)和側(cè)根數(shù)量均減少；曹小闖等[26]在MS 液體培養(yǎng)基中添加367 mg/L L-谷氨酸，所培養(yǎng)的小白菜生物量下降；楊靖等[27]在N6 培養(yǎng)基中添加882 mg/L L-谷氨酸，所培養(yǎng)的小麥、水稻、二棱大麥的生長(zhǎng)均受到抑制；孔凡婧[28]在營(yíng)養(yǎng)液中添加588 mg/L L-谷氨酸，所培養(yǎng)的紅松生物量卻增加了。由此可見(jiàn)，低濃度的L-谷氨酸對(duì)植物的生長(zhǎng)有促進(jìn)作用，但高濃度的L-谷氨酸對(duì)紅松除外的大部分植物的生長(zhǎng)均產(chǎn)生抑制作用。而在筆者的試驗(yàn)中，添加0.5 mg/L 的L-谷氨酸對(duì)玉米地上部生長(zhǎng)有顯著的促進(jìn)作用；添加5 mg/L 的L-谷氨酸對(duì)玉米幼苗地上部生長(zhǎng)有一定的抑制作用，表現(xiàn)為玉米株高顯著降低、葉綠素含量顯著下降，但對(duì)根系的影響不明顯。導(dǎo)致上述結(jié)果的原因可能是不同作物對(duì)L-谷氨酸濃度的敏感程度不同，多年生植物較當(dāng)年生植物耐受L-谷氨酸的能力更強(qiáng)。這也是添加588 mg/L 的L-谷氨酸時(shí)仍然能夠促進(jìn)紅松生長(zhǎng)的原因。

該試驗(yàn)結(jié)果還顯示，在低濃度（0.5 mg/L）下，D-谷氨酸對(duì)玉米幼苗地上部及根系生長(zhǎng)的促進(jìn)作用稍強(qiáng)于L-谷氨酸；在高濃度（5 mg/L）下，L-谷氨酸顯著降低了玉米幼苗的株高，但D-谷氨酸對(duì)玉米幼苗株高的影響不顯著，其他方面的影響在D/L-谷氨酸之間無(wú)明顯差異。

總體來(lái)看，沖施或水培條件下，低濃度（0.5 mg/L）的D/L-谷氨酸對(duì)玉米幼苗生長(zhǎng)表現(xiàn)出一定的促進(jìn)作用，而高濃度（5 mg/L） D/L-谷氨酸對(duì)玉米幼苗生長(zhǎng)表現(xiàn)出一定的抑制作用。