呂宗浩，王金全，喬增強(qiáng)，李信福，劉 杰

（1. 懷化市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所，湖南 懷化 418000；2. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所，北京 100081；3. 內(nèi)蒙古凱程匯德農(nóng)牧科技有限公司，內(nèi)蒙古 包頭 014060）

近年來，隨著我國牛羊養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展和對(duì)粗飼料的需求不斷增加，常規(guī)粗飼料不足問題日益顯現(xiàn)，飼料原料的緊缺己經(jīng)成為阻礙飼料產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重要因素之一。因此，加大對(duì)非常規(guī)飼料資源的研究，是保障我國牛羊養(yǎng)殖業(yè)持續(xù)、健康發(fā)展的重要途徑之一。

有些非常規(guī)飼料資源營養(yǎng)價(jià)值很高，如檸條、沙柳等的粗蛋白質(zhì)含量高，是優(yōu)質(zhì)的植物性蛋白質(zhì)補(bǔ)充飼料，具有飼料資源開發(fā)潛力。當(dāng)前，對(duì)檸條、沙柳研究大多集中于對(duì)其營養(yǎng)成分的測(cè)定，加上灌木類植物中單寧含量較高，當(dāng)家畜過量采食這些植物后，會(huì)引起不良反應(yīng)甚至中毒[1-2]。因此，檸條等副產(chǎn)物的加工利用方式主要有揉絲、粉碎、青貯等[3-5]，在提高檸條等副產(chǎn)物利用率方面發(fā)揮了重要作用。而對(duì)檸條、沙柳進(jìn)行制粒處理的研究報(bào)道比較少。鑒于此，本研究結(jié)合實(shí)際，將檸條、沙柳制成顆粒飼料，替代玉米秸稈顆粒飼料飼喂小尾寒羊，探索飼喂檸條、沙柳顆粒飼料對(duì)小尾寒羊血清中生化、免疫和抗氧化指標(biāo)的影響，為其在養(yǎng)殖中的推廣應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 檸條、沙柳和玉米秸稈顆粒飼料的制備

1.1.1 檸條、沙柳和玉米秸稈的收割

采用大型灌木平茬收割機(jī)、玉米收割機(jī)進(jìn)行檸條、沙柳和玉米秸稈的平茬和收割。再將收割后的檸條、沙柳和玉米秸稈用專用的揉絲粉碎機(jī)揉絲粉碎為2～4 cm 的絲段，為加工顆粒飼料做準(zhǔn)備。

1.1.2 檸條、沙柳和玉米秸稈制粒

經(jīng)過揉絲粉碎后，根據(jù)飼喂動(dòng)物的營養(yǎng)需求量，添加不同比例的精飼料、微量元素、礦物質(zhì)、粘合劑等，通過制粒機(jī)壓制成直徑為0.5～1.5 cm 的顆粒。

1.2 試驗(yàn)羊的選擇與分組

選擇健康、體重相近(31.33 ± 2.28 kg)、生長狀況良好的5 月齡小尾寒羊90 只，隨機(jī)分為3 組(保證各組體重之間無顯著性差異)，即對(duì)照組(飼喂玉米秸稈顆粒料)、檸條組(飼喂檸條顆粒料)和沙柳組(飼喂沙柳顆粒料)，每組30 頭，分圈飼養(yǎng)。

1.3 飼養(yǎng)管理

預(yù)試期15 d，主要適應(yīng)環(huán)境和飼料；正試期165 d，飼喂顆粒全混合日糧，每天早晚各1 次。日常衛(wèi)生、消毒和防疫免疫工作按照既定程序進(jìn)行。整個(gè)試驗(yàn)持續(xù)6 個(gè)月，所有羊只自由采食及飲水。試驗(yàn)期間應(yīng)觀察小尾寒羊的健康狀況，采食、飲水、糞便是否發(fā)生改變，如果發(fā)現(xiàn)改變及時(shí)處理，并做好詳細(xì)記錄。

1.4 日糧組成

參照我國《肉羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(NY/T 816-2004)[6]，設(shè)計(jì)普通精飼料配方為20%玉米、5%豆粕、3%次粉、2%噴漿玉米皮，粗飼料按照試驗(yàn)設(shè)計(jì)進(jìn)行搭配，精粗比例為30 ∶ 70；所有飼料均勻混合，制備成全混合型顆粒日糧進(jìn)行飼喂。試驗(yàn)各組日糧組成及營養(yǎng)水平如表1 所列。

表1 日糧組成及營養(yǎng)水平Table 1 Diet composition and nutritional level%

1.5 樣品采集與檢測(cè)

在試驗(yàn)最后一天，晨飼前每組隨機(jī)選取6 只小尾寒羊進(jìn)行靜脈采血，每只采血10 mL，血液37 ℃水浴靜置30 min，轉(zhuǎn)入離心機(jī)3 000 r·min-1，離心10 min，分離血清，保存到-20 ℃?zhèn)錅y(cè)?？偟鞍住椎鞍?、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、丙二醛、超氧化物歧化酶、總抗氧化能力、白細(xì)胞介素1、白細(xì)胞介素6、腫瘤壞死因子-α 含量均由北京金海科隅生物科技發(fā)展有限公司進(jìn)行檢測(cè)。

1.6 統(tǒng)計(jì)分析

使用Excel 整理數(shù)據(jù)，采用SPSS 19.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析，通過Duncan 法進(jìn)行多重比較，P＜ 0.05 作為差異顯著的判斷標(biāo)準(zhǔn)。試驗(yàn)結(jié)果均用平均值 ± 標(biāo)準(zhǔn)誤(SEM)表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 玉米秸稈、檸條和沙柳對(duì)小尾寒羊血清中生化指標(biāo)的影響

各組小尾寒羊血清中總蛋白、白蛋白含量差異不顯著(P＞ 0.05)，對(duì)照組血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量顯著高于沙柳組(P＜ 0.05)，對(duì)照組和檸條組血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量差異不顯著，但從測(cè)定值上看，檸條組血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量高于對(duì)照組(表2)。

表2 玉米秸稈、檸條和沙柳對(duì)小尾寒羊血清中生化指標(biāo)的影響Table 2 Effects of corn straw, Caragana korshinskii and Salix psammophila on biochemical indexes in the serum of Small-tailed Han sheep

2.2 玉米秸稈、檸條和沙柳對(duì)小尾寒羊血清中抗氧化指標(biāo)的影響

各組小尾寒羊血清中超氧化物歧化酶、丙二醛、總抗氧化能力差異顯著(P＜ 0.05)。從測(cè)定值上看，檸條組血清中丙二醛含量最低，檸條組血清中超氧化物歧化酶、總抗氧化能力最高(表3)。

表3 玉米秸稈、檸條和沙柳對(duì)小尾寒羊血清中抗氧化指標(biāo)的影響Table 3 Effects of corn straw, Caragana korshinskii and Salix psammophila on antioxidant indexes in serum of Small-tailed Han sheep

2.3 玉米秸稈、檸條和沙柳對(duì)小尾寒羊血清中細(xì)胞免疫相關(guān)因子的影響

各組小尾寒羊血清中白細(xì)胞介素1、白細(xì)胞介素6、腫瘤壞死因子-α 含量差異顯著(P＜ 0.05)。從測(cè)定值上看，檸條組血清中白細(xì)胞介素1、白細(xì)胞介素6、腫瘤壞死因子-α 含量最低(表4)。

表4 玉米秸稈、檸條和沙柳對(duì)小尾寒羊血清中細(xì)胞免疫相關(guān)因子的影響Table 4 Effects of corn stalk, Caragana korshinskii and Salix psammophila on cellular immune related factors in serum of Small-tailed Han sheep pg·mL-1

3 討論

3.1 對(duì)小尾寒羊血清生化指標(biāo)的影響

顆粒飼料經(jīng)過小尾寒羊采食后，營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入體內(nèi)，隨著血液將其運(yùn)送到機(jī)體各處，因此血液生化相關(guān)指標(biāo)能夠很好地反映小尾寒羊?qū)︻w粒飼料的影響。血清總蛋白是由白蛋白和球蛋白組成的[7]。三者的含量可反映機(jī)體蛋白質(zhì)的吸收和代謝狀況，血清總蛋白含量高有利于促進(jìn)動(dòng)物的生長發(fā)育和提高飼料報(bào)酬[8]，總蛋白和白蛋白的含量高低能反映蛋白質(zhì)代謝是否旺盛，當(dāng)其含量越高越能說明肝臟合成蛋白質(zhì)速度越快，蛋白體有較高沉積，有利于動(dòng)物生長發(fā)育。在本研究中，對(duì)照組、檸條組和沙柳組小尾寒羊血清中總蛋白、白蛋白含量差異不顯著(P＞ 0.05)，說明檸條、沙柳與玉米秸稈相比對(duì)小尾寒羊的蛋白質(zhì)代謝和蛋白質(zhì)的吸收無明顯改變。

谷丙轉(zhuǎn)氨酶是最常用于肝臟生理功能的重要指標(biāo)[9]，在非必需氨基酸和蛋白質(zhì)的分解過程中，起著很重要的中介作用[10]。谷丙轉(zhuǎn)氨酶是廣泛存在于動(dòng)物線粒體中的氨基酸轉(zhuǎn)氨酶，活性過高說明肝臟功能有可能受損。有研究表明，飼糧中添加構(gòu)樹(Broussonetia papyrifera)葉粉，谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性與對(duì)照組差異不顯著，未對(duì)育肥豬的肝臟產(chǎn)生不良影響[11]。本研究中，沙柳組谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量顯著低于對(duì)照組，說明沙柳顆粒飼料有降低小尾寒羊血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量的趨勢(shì)，有利于小尾寒羊的肝臟健康。

3.2 對(duì)小尾寒羊血清抗氧化指標(biāo)的影響

在生理?xiàng)l件下，自由基類高活性分子的生成和清除維持在穩(wěn)態(tài)水平和平衡狀態(tài)[12]。當(dāng)自由基的生成超過機(jī)體的清除能力時(shí)，就會(huì)發(fā)生氧化還原平衡的紊亂，檢測(cè)動(dòng)物超氧化物歧化酶等抗氧化酶的變化能比較準(zhǔn)確地反映機(jī)體內(nèi)的抗氧化系統(tǒng)的情況，以此來評(píng)價(jià)機(jī)體的抗氧化能力[13]。總抗氧化能力是衡量機(jī)體抗氧化系統(tǒng)功能狀況的綜合性指標(biāo)[14]，其含量的高低是評(píng)價(jià)抗氧化能力的重要指標(biāo)之一。本研究中，檸條組超氧化物歧化酶含量和總抗氧化能力顯著高于對(duì)照組，說明檸條顆粒飼料對(duì)小尾寒羊抗氧化能力的影響優(yōu)于玉米秸稈飼料。大量的自由基誘導(dǎo)生物膜上的多不飽和脂肪酸過氧化產(chǎn)生脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛，因此，丙二醛含量的高低直接反映著動(dòng)物機(jī)體脂質(zhì)氧化的程度、自由基的代謝情況，從而間接地反映細(xì)胞的損傷程度[15]。本研究中，檸條組丙二醛的含量顯著低于對(duì)照組，說明檸條顆粒飼料比秸稈顆粒飼料對(duì)小尾寒羊細(xì)胞膜過氧化程度低，細(xì)胞膜受到的傷害輕。因此，本研究表明檸條顆粒飼料對(duì)小尾寒羊抗氧化能力的影響優(yōu)于玉米秸稈顆粒飼料，這與檸條具有抗氧化性是一致的[16]。

3.3 對(duì)小尾寒羊血清細(xì)胞免疫相關(guān)因子的影響

動(dòng)物血清中細(xì)胞因子在免疫應(yīng)答等過程中發(fā)揮著重要的作用[17]，能不同程度地反映機(jī)體健康狀況，其在機(jī)體炎癥和抗炎過程中發(fā)揮重要作用[18]。白細(xì)胞介素 1 是主要由單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的一種重要的細(xì)胞因子，可參加機(jī)體炎癥反應(yīng)。白細(xì)胞介素6 能夠誘導(dǎo)B 細(xì)胞的分化以及產(chǎn)生各種抗體，可使T 細(xì)胞活化增殖，參與機(jī)體的免疫應(yīng)答，是炎性反應(yīng)的促發(fā)劑[19]。而腫瘤壞死因子-α 是吞噬細(xì)胞產(chǎn)生的一種糖蛋白，是促炎性細(xì)胞因子[20]。有研究表明，細(xì)胞因子的過度分泌會(huì)對(duì)機(jī)體產(chǎn)生負(fù)面影響[21]，可抑制動(dòng)物生長，降低生產(chǎn)效率[22]。本研究中，檸條組小尾寒羊血清中白細(xì)胞介素 1、白細(xì)胞介素 6 和腫瘤壞死因子-α 的含量均顯著低于對(duì)照組，說明檸條顆粒飼料能夠抑制白細(xì)胞介素 1、白細(xì)胞介素 6 和腫瘤壞死因子-α 細(xì)胞因子的分泌，這可能與檸條具有抗炎性有關(guān)[23]。

4 結(jié)論

1)飼喂沙柳顆粒飼料與玉米秸稈顆粒飼料相比，能夠影響血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶水平，顯著降低血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量，說明沙柳顆粒飼料有降低小尾寒羊血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量的趨勢(shì)。因此，沙柳顆粒飼料在小尾寒羊日糧中應(yīng)用具有可行性，有利于小尾寒羊的肝臟健康。

2)飼喂檸條顆粒飼料與玉米秸稈顆粒飼料，可以提高小尾寒羊的抗氧化能力，能夠影響血清中細(xì)胞因子的水平，顯著降低血清中白細(xì)胞介素 1、白細(xì)胞介素 6 和腫瘤 壞死因子-α 的濃度。因此，檸條顆粒飼料飼喂小尾寒羊具有很高的開發(fā)潛力。