李智博 田園園 嚴雨姮

1 確山縣人民醫(yī)院感染科，河南省駐馬店市 463200；2 確山縣人民醫(yī)院普外科，河南省駐馬店市 463200；3 鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院感染科，河南省鄭州市 450052

肝細胞肝癌(HCC)是全球最常見惡性疾病之一，每年約有84.1萬例新增HCC患者，死亡約78.2萬例[1]。乙型肝炎病毒感染是我國肝癌發(fā)病的主要原因；肝癌患者發(fā)病隱匿，被確診時多已處于中晚期，治療效果和預(yù)后不佳。探討HCC發(fā)生發(fā)展的分子機制，尋找有效的腫瘤標志物和治療靶點，是提高HCC患者整體生存率的重要途徑。E2F轉(zhuǎn)錄因子家族位于細胞周期信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的下游，通過調(diào)控大量參與細胞周期進程的靶基因的表達，控制細胞的增殖、分化、衰老和凋亡等過程，與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[2]。E2F5基因所在的8q21.2基因位點在HCC細胞中過表達，而過表達的E2F5會導(dǎo)致不可控的細胞周期進展，并與其他致癌因子共同作用促成腫瘤轉(zhuǎn)化，而敲除E2F5可顯著抑制HCC細胞的遷移和侵襲能力[3]。本研究通過從TCGA數(shù)據(jù)庫獲取HCC患者E2F5基因表達情況及臨床資料，探討了E2F5的表達水平與HCC患者預(yù)后的關(guān)系，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1.1 資料來源 從癌癥基因組圖譜(TCGA)數(shù)據(jù)庫(https://www.cancer.gov/tcga/)獲取HCC組織的E2F5表達譜及患者的臨床資料，運用R軟件(http://www.r-project.org)對數(shù)據(jù)進行整理，剔除E2F5基因表達情況、一般資料、血清生化指標、臨床病理特征或預(yù)后數(shù)據(jù)不完整的患者。結(jié)果共得到有完整數(shù)據(jù)的343例HCC患者(其中包括有相應(yīng)配對癌旁組織的患者50例)的相關(guān)資料。根據(jù)HCC組織中E2F5的中位表達水平將納入研究的343例HCC患者分為E2F5低表達組(171例)和E2F5高表達組(172例)。

1.2 分析指標 (1)比較HCC患者癌組織和其癌旁正常組織中E2F5的表達水平；(2)比較E2F5低表達和E2F5高表達組患者的性別、年齡、病理學(xué)分級、TNM分期、血清AFP水平、ki-67水平及整體生存率。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 23.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)分析。計量資料以x±s表示，兩組間均數(shù)比較采用t檢驗；計數(shù)資料以%表示，組間比較采用χ2檢驗。采用Kaplan-Meier法比較E2F5高表達組與E2F5低表達組患者的整體生存率。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 HCC患者的癌組織和癌旁正常組織中E2F5表達水平的比較 50例HCC患者的癌組織的E2F5表達水平(7.70±1.21)顯著高于其癌旁正常組織(6.37±0.62)的表達水平，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t′=12.163，P<0.05)。

2.2 E2F5低表達組和E2F5高表達組HCC患者的一般情況及臨床病理特征比較 E2F5高表達組患者的病理學(xué)分級、TNM分期、血清AFP水平、血清ki-67水平均顯著高于E2F5低表達組患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；兩組患者的性別、年齡比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 E2F5低表達組和E2F5高表達組HCC患者的一般情況及臨床病理特征比較

2.3 E2F5的表達水平與HCC患者預(yù)后的關(guān)系 Kaplan-Meier生存曲線顯示，E2F5高表達組HCC患者的中位生存期為50個月，E2F5低表達組HCC患者的中位生存期為80個月；E2F5高表達組HCC患者的整體生存率低于E2F5低表達組患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見圖1。

圖1 E2F5表達水平與HCC患者預(yù)后的關(guān)系

3 討 論

E2F轉(zhuǎn)錄因子家族的蛋白質(zhì)由8種基因編碼，其產(chǎn)物形成了一個核心轉(zhuǎn)錄軸，能對細胞周期進行精細調(diào)節(jié)。E2Fs具有高度相似的DNA結(jié)合域(TTCCCGCC)，對DNA損傷修復(fù)、細胞增殖、細胞分化、細胞周期和細胞凋亡、代謝及血管生成等生物學(xué)過程具有重要調(diào)節(jié)作用，參與了人類腫瘤的發(fā)生發(fā)展。E2F5是E2F家族成員之一，在前列腺癌患者中，E2F5通過調(diào)控TFPI2、MMP-2和MMP-9促進前列腺癌細胞的侵襲、轉(zhuǎn)移和集落形成[4]；在食管癌患者中，E2F5的過表達與食管癌根治術(shù)后患者的不良預(yù)后密切相關(guān)[5]。與正常肝組織相比，HCC組織中的E2F5表達顯著上調(diào)，而敲除E2F5可阻滯G0/G1細胞周期進而抑制肝癌細胞的增殖并促進其凋亡；轉(zhuǎn)錄因子FOXN3可以通過下調(diào)E2F5的表達而抑制肝癌細胞增殖；在乙肝相關(guān)的HCC患者中，過表達的miR-181a通過靶向E2F5作用在體外可促進腫瘤細胞生長，在體內(nèi)可促進腫瘤形成[3，6-7]。

血清ki-67蛋白參與細胞周期中除G0期外的各階段的生物過程，是一種細胞增殖活躍的標志物。在HCC患者中，高水平Ki-67提示腫瘤具有高度侵襲性，如腫瘤已處于晚期、發(fā)生門靜脈侵犯和肝內(nèi)轉(zhuǎn)移，與患者的不良預(yù)后密切相關(guān)[8-9]。血清AFP是肝癌患者篩查診斷、療效評價和復(fù)發(fā)判斷的常規(guī)檢測指標。本研究對E2F5表達水平與肝癌患者預(yù)后的關(guān)系等進行研究發(fā)現(xiàn)，HCC患者癌組織的E2F5表達水平顯著高于其癌旁正常組織，E2F5高表達組HCC患者的病理學(xué)分級、TNM分期、血清AFP水平、血清ki-67水平均顯著高于E2F5低表達組HCC患者，患者的整體生存率也顯著低于E2F5低表達組患者，提示E2F5高表達可能與HCC患者的不良預(yù)后密切相關(guān)，可為尋找有效的腫瘤標志物和治療靶點、為臨床肝癌的靶向治療提供參考。目前的研究尚不能明確E2F5是HCC發(fā)生的驅(qū)動因素，只發(fā)現(xiàn)其與腫瘤分期/分級有關(guān)而已，明確E2F5在HCC進展中的分子機制還需要進一步進行深入的研究[10]。