曾賓，王忠良，張宇達(dá)，肖維茹

梅州市中心血站，廣東 梅州 514011

機(jī)采血小板在臨床輸血應(yīng)用廣泛，枸櫞酸鹽反應(yīng)是機(jī)采血小板獻(xiàn)血者中最常見(jiàn)的獻(xiàn)血反應(yīng)[1]。常規(guī)血液保存液中的枸櫞酸鈉易與游離血清中的Ca2+結(jié)合，形成難于離解的可溶性枸櫞酸鈉鈣螯合物。如果進(jìn)入體內(nèi)的枸櫞酸鈉過(guò)多過(guò)快，超過(guò)機(jī)體骨鈣動(dòng)員入血以及肝臟代謝能力，則出現(xiàn)枸櫞酸中毒反應(yīng)，表現(xiàn)為獻(xiàn)血者口周及面部麻木、手足抽搐等臨床表現(xiàn)，嚴(yán)重時(shí)可能出現(xiàn)心律不齊、室顫及心臟停博等。目前機(jī)采血小板的相關(guān)研究?jī)?nèi)容主要為血細(xì)胞分離機(jī)、采集血小板效率影響因素，以及獻(xiàn)血反應(yīng)發(fā)生情況等[2]。本研究觀察了不同含量的枸櫞酸鈉對(duì)獻(xiàn)血者血清Ca2+的干擾，以及體質(zhì)量、性別與血清Ca2+干擾率、枸櫞酸鈉中毒反應(yīng)的相關(guān)性，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇梅州中心血站2018年3～5月期間男女各100例機(jī)采血小板獻(xiàn)血者，均符合《獻(xiàn)血法》中外周指端血血小板(Plt)＞150×109/L的規(guī)定。年齡18～55歲，中位年齡36.5歲。

1.2 標(biāo)本采集 獻(xiàn)血前和機(jī)采血小板后采集靜脈枸櫞酸鈉抗凝血5 mL(抗凝管中枸櫞酸鈉濃度為32.1 g/L)，將采集的全血標(biāo)本2 000 r/min離心10 min，分離上層血清，每份標(biāo)本取100μL樣本用于檢測(cè)，并在當(dāng)天完成檢測(cè)。

1.3 檢測(cè)儀器及試劑 四通道半自動(dòng)生化分析儀(XD811F)；MCS+增強(qiáng)型多功能血細(xì)胞采集儀(美國(guó)Haemonetics Corporation)。分析純枸櫞酸鈉(C6H5Na3O7·2H2O)(天津市凱通化學(xué)試劑有限公司)。

1.4 檢測(cè)方法 采用鄰甲酚酞鉻合酮比色法[3]，用生化分析儀平行兩次檢測(cè)血清Ca2+濃度，以均值為定值，將分析純枸櫞酸鈉分別配制成0.037 g/mL、0.073 g/mL、0.15 g/mL、0.37 g/mL、0.55 g/mL、0.73 g/mL的不同濃度的枸櫞酸鈉溶液，將其加入到100μL到已定值的血清中，然后再用生化分析儀平行兩次測(cè)定血清Ca2+濃度。采用鄰甲酚酞鉻合酮比色法檢測(cè)機(jī)采血小板前后的獻(xiàn)血者樣本中的血清Ca2+濃度并計(jì)算干擾率，干擾率=加入不同含量枸櫞酸鈉血清Ca2+測(cè)定值/不含枸櫞酸鈉血清Ca2+測(cè)定值。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 枸櫞酸鈉濃度與所檢測(cè)血清游離Ca2+濃度干擾率的相關(guān)性 經(jīng)Pearson相關(guān)分析顯示，血清加入枸櫞酸鈉的濃度與血清游離Ca2+的干擾率呈正相關(guān)性(r=0.984，P＜0.05)，見(jiàn)表1和圖1。

圖1 機(jī)采血小板獻(xiàn)血者血清中加入不同濃度枸櫞酸鈉與血清游離Ca2+干擾率散點(diǎn)圖

表1 不同濃度的枸櫞酸鈉與檢測(cè)血清游離Ca2+的干擾率的關(guān)系

2.2 機(jī)采血小板獻(xiàn)血者性別、體質(zhì)量與血清游離Ca2+干擾率的關(guān)系 男性獻(xiàn)血者捐獻(xiàn)機(jī)采血小板時(shí)，體質(zhì)量60～75 kg組游離Ca2+的干擾率為0.85～0.98時(shí)比例明顯高于體質(zhì)量55～59 kg組，女性55～65 kg組相應(yīng)明顯高于50～54 kg組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=11.490、16.931，P＜0.05)。其中以干擾率為0.52～0.70的女性獻(xiàn)血者中毒比例最高(100%，10/10)，見(jiàn)表2。

表2 機(jī)采血小板獻(xiàn)血者性別、體質(zhì)量與血清游離Ca2+干擾率的關(guān)系[例(%)]

2.3 機(jī)采血小板獻(xiàn)血者的性別、體質(zhì)量對(duì)其血清游離Ca2+干擾率的影響及與獻(xiàn)血者枸櫞酸鈉中毒程度率的關(guān)系 干擾率分別為0.52～0.70、0.70～0.85和0.85～0.98時(shí)，本組機(jī)采血小板獻(xiàn)血者枸櫞酸鈉中毒率依次為5.5%、23%和1.5%。男性獻(xiàn)血者體質(zhì)量55～59 kg組與60～75 kg組枸櫞酸鈉中毒率分別為21.4%(8/28)、6.94%(5/72)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=8.337，P＜0.05)；女性獻(xiàn)血者體質(zhì)量50～54 kg組與55～65 kg組枸櫞酸鈉中毒率分別為95.8%(23/24)、31.6%(24/76)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=30.231，P＜0.05)。本組單采血小板獻(xiàn)血者的枸櫞酸鈉中毒癥率30.0%(60/200)，其中男性獻(xiàn)血者為6.5%(13/100)、女性獻(xiàn)血者為23.5%(47/100)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=27.524，P＜0.05)，見(jiàn)表3。

表3 不同性別、體質(zhì)量的機(jī)采血小板獻(xiàn)血者與Ca2+干擾率的關(guān)系及枸櫞酸鈉中毒情況[例(%)]

3 討論

目前有關(guān)對(duì)機(jī)采血小板的研究多涉及的是血細(xì)胞分離機(jī)本身、獻(xiàn)血者血液因素對(duì)采集血小板效率的影響，以及機(jī)采血小板獻(xiàn)血者發(fā)生獻(xiàn)血反應(yīng)情況的分析[4-6]。本實(shí)驗(yàn)則對(duì)機(jī)采血小板過(guò)程中，枸櫞酸鈉(抗凝劑)含量對(duì)獻(xiàn)血者血清Ca2+干擾率做了研究。枸櫞酸鹽反應(yīng)是機(jī)采血小板獻(xiàn)血者中最常見(jiàn)的獻(xiàn)血反應(yīng)，因?yàn)槌Ｒ?guī)血液保存液中的枸櫞酸鈉容易與游離血清中的Ca2+結(jié)合，形成難于離解可溶性枸櫞酸鈉鈣螯合物；當(dāng)血液保存液中的枸櫞酸鈉隨血液返回獻(xiàn)血者體內(nèi)時(shí)，可使其血清Ca2+下降，反饋引起甲狀旁腺分泌甲狀旁腺素動(dòng)員骨鈣入血能力來(lái)維持血清Ca2+濃度[7-8]。如果進(jìn)入體內(nèi)的枸櫞酸鈉過(guò)多過(guò)快，超過(guò)機(jī)體骨鈣動(dòng)員入血以及肝臟代謝能力，則出現(xiàn)枸櫞酸中毒反應(yīng)，往往表現(xiàn)為口周及面部麻木、手足抽搐等癥狀，嚴(yán)重時(shí)可能出現(xiàn)心律不齊、室顫及心臟停博等[9-10]。

本組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示在所采集、分離的機(jī)采血小板獻(xiàn)血者血清中加入的枸櫞酸鈉(濃度)與血清游離Ca2+的干擾率之間呈負(fù)的直線相關(guān)關(guān)系(P＜0.05)，說(shuō)明枸櫞酸鈉對(duì)血清游離Ca2+有負(fù)干擾作用。本研究通過(guò)對(duì)機(jī)采血小板獻(xiàn)血者體質(zhì)量與血清游離Ca2+干擾率關(guān)系進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)：男性獻(xiàn)血者捐獻(xiàn)機(jī)采血小板時(shí)，體質(zhì)量60～75 kg組游離Ca2+的干擾率為0.85～0.98時(shí)比例明顯高于體質(zhì)量55～59 kg組；女性55～65 kg組相應(yīng)高于女性50～54 kg組，說(shuō)明枸櫞酸鈉對(duì)獻(xiàn)血者血清游離Ca2+干擾率隨著獻(xiàn)血者體質(zhì)量的增加而增加。進(jìn)一步分析了本組機(jī)采血小板獻(xiàn)血者枸櫞酸鈉中毒情況與獻(xiàn)血者性別、體質(zhì)量及其對(duì)獻(xiàn)血者血清游離Ca2+干擾率關(guān)系影響發(fā)現(xiàn)：(1)有枸櫞酸鈉中毒癥狀的女性獻(xiàn)血者明顯多于男性；(2)較低體質(zhì)量的獻(xiàn)血者枸櫞酸鈉中毒比例較高。究其原因，可能是由于女性獻(xiàn)血者普遍體質(zhì)量較輕，循環(huán)血量少，體內(nèi)的Ca2+水平較低，枸櫞酸鈉代謝能力和骨鈣動(dòng)員入血能力可能低于男性獻(xiàn)血者，同時(shí)女性體質(zhì)量偏輕，身體耐受性亦不及男性，故易出現(xiàn)枸櫞酸鹽中毒反應(yīng)[11]。

基于上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析，在篩選機(jī)采血小板獻(xiàn)血者時(shí)，應(yīng)該科學(xué)地依據(jù)獻(xiàn)血者不同個(gè)體差異與機(jī)采血小板過(guò)程中出現(xiàn)的不同情況，從獻(xiàn)血者的實(shí)際出發(fā)。例如對(duì)低體質(zhì)量獻(xiàn)血者，特別是低體質(zhì)量女性獻(xiàn)血者，可使用預(yù)防性口服鈣劑[12]，同時(shí)在機(jī)采過(guò)程中減慢循環(huán)速率，以有效減少獻(xiàn)血者枸櫞酸鈉中毒反應(yīng)，保護(hù)獻(xiàn)血者身體健康，推動(dòng)無(wú)償獻(xiàn)血事業(yè)更好、可持續(xù)發(fā)展。