陳小雪 李冉冉
近些年,人們對食品安全加強了關注,也使得罌粟殼被摻入食品制作過程這一問題及現(xiàn)象得以暴露,所以非常有必要加大對食品安全的檢查力度。目前檢測食品中是否含有罌粟殼成分的檢測方法較多,有比色法、極譜法、氣相色譜法等等,但是這些方法操作較為繁瑣,需要做較多準備工作,同時這些方法有干擾因素較多、靈敏度低、儀器昂貴等不足及缺陷。筆者通過實驗,建立了能夠快速檢驗食品中含有罌粟殼成分的方法。實驗結果顯示,采用競爭抑制免疫層析法檢測食品中的罌粟殼成分,具有快捷、準確、高效的特點,值得進一步推廣。
一、材料與方法
1.材料來源。此次研究所用樣本,皆來自于餐飲食品安全監(jiān)督和食品刑事案件偵辦過程中的抽樣樣品,共計30份。抽樣品種包括鹵湯、火鍋底料、燒烤調味料等。
2.儀器與試劑。此次檢測,主要使用高效液相色譜—串聯(lián)質譜儀檢測、罌粟殼快速檢測卡,由無錫中德伯爾生物技術有限公司生產,研究前已對生產日期及質量進行檢測,明確其不會影響研究最終結果。
3.檢測原理。高效液相色譜—串聯(lián)質譜儀檢測:樣品被水或鹽酸溶液分散,乙腈提取后,經鹽析分層,采用MCX柱進行凈化,離心,之后使用液相色譜—串聯(lián)質譜儀進行檢測,使用外標法對那可汀、蒂巴因、罌粟堿定量,內標法對可待因、嗎啡定量。
罌粟殼快速檢測卡:基于競爭抑制免疫層析原理,罌粟殼成分流動中會與膠體金標記的特異性單克隆抗體結合,從而抑制抗體和NC膜檢測線上的抗原偶聯(lián)物結合,檢測線如若與樣本接觸后不變色,則為陽性;相反的,檢測線處顯現(xiàn)紅色,則為陰性。
4.檢測項目。在檢測過程中,主要對罌粟堿、那可汀、嗎啡、可待因、嗎啡等5種成分進行檢測,這些為罌粟殼主要成分,如果在樣品中發(fā)現(xiàn)這些成分,便可以肯定食品中曾加入罌粟殼。
5.統(tǒng)計方法。數(shù)據(jù)錄入采用Epi Data 3.1軟件,數(shù)據(jù)分析采用SPSS19.0軟件,確保數(shù)據(jù)分析中有人為因素干擾,并進一步提升數(shù)據(jù)分析的有效性,此外,使用卡方檢驗進行比較。
二、結果
1.競爭抑制免疫層析法檢測結果。在抽檢的30份樣品中,陽性樣本4份、陰性樣本26份,食品合格率為86.67%,詳見表1。值得一提的是,所有檢測出陽性的樣本,皆有不同含量的嗎啡、可待因、那可汀、罌粟堿,但是并未檢測出蒂巴因成分。
2.高效液相色譜—串聯(lián)質譜法檢測結果。在采用競爭抑制免疫層析法檢驗出的4份含有罌粟殼成分的樣品中,采用高效液相色譜—串聯(lián)質譜法進行再次驗證,目的是認清競爭抑制免疫層析法的檢驗質量和檢驗有效性。其中,嗎啡檢測值在236μg/kg-298μg/kg,可待因檢測值在50μg/kg-57μg/kg,那可汀檢測值在11μg/kg-16μg/kg,罌粟堿檢測值在17μg/kg-19μg/kg。
3.競爭抑制免疫層析法與第二次檢測的符合率。對采用競爭抑制免疫層析法檢測的樣本進行二次抽查與檢驗,發(fā)現(xiàn)高效液相色譜—串聯(lián)質譜法檢測結果與競爭抑制免疫層析法檢測結果一致,可以確定競爭抑制免疫層析法可用于檢測粟殼成分,因此,可以肯定的是,競爭抑制免疫層析法與第二次檢測的符合率為100%。
三、討論
隨著人們生活水平的提高,外出就餐的機會越來越多,對于食品安全的關注度自然會大幅度提升。在近些年的食品監(jiān)督工作中,發(fā)現(xiàn)很多不法商販為了吸引顧客、提升收益,會有意地在鹵制品、火鍋底料、燒烤調味料中加入罌粟殼,吃后讓人上癮。但罌粟殼含有有害成分,吃后會嚴重危害大眾的身體健康。比如,罌粟殼除了會讓消費者對食物產生成癮性,還會對人體的肝臟、心臟有一定的毒害作用,長期食用,甚至還會出現(xiàn)發(fā)冷、出虛汗、面黃肌瘦、犯困等癥狀,嚴重的會造成急性中毒,癥狀包括低血壓、呼吸抑制、昏迷、瞳孔變小等,也有因過度食用而造成死亡的案例。
為了打擊市面上銷售罌粟殼或用于加工其他調味品的行為,早在2005年國家就已出臺相關政策與法規(guī),明令禁止將罌粟殼放入食品中,同時也加大了食品中罌粟殼的檢測。雖然,當前可以檢測食品中是否含有罌粟殼成分的方法有很多,但出于低成本、高效率的考量,我們此次主要圍繞競爭抑制免疫層析法展開探究,對30份抽查樣本進行測驗,并采用高效液相色譜—串聯(lián)質譜法進行第二輪測驗,進一步明確競爭抑制免疫層析法在其中起到的作用,為今后應用該方法檢驗食品中的罌粟殼成分奠定基礎。經檢驗,30份樣品中,有4份為陽性樣本,合格率為86.67%,之后采用高效液相色譜—串聯(lián)質譜法進行新一輪檢測,發(fā)現(xiàn)檢測結果與競爭抑制免疫層析法檢測結果相同,兩種檢測結果符合率為100%。由此可見,競爭抑制免疫層析法在檢測食物罌粟殼成分中具有突出成效,值得在食品監(jiān)督中進一步推廣使用。
(基金項目:新疆維吾爾自治區(qū)自然科學基金資助項目(2020D01A11)。)