◎林剛健,楊 挺,方如意
(臺(tái)州市食品檢驗(yàn)檢測中心,浙江 臺(tái)州 318000)
有機(jī)氯類農(nóng)藥(OCPs)是一類高效廣譜殺蟲劑,廣泛應(yīng)用于殺滅農(nóng)業(yè)害蟲,曾是各國殺蟲劑中使用最廣泛的一大類[1]。這類農(nóng)藥化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,脂溶性強(qiáng),殘效期長,易在體內(nèi)蓄積,造成慢性中毒,嚴(yán)重危及人體健康,果蔬中的農(nóng)藥殘留問題近年來越來越引起人們重視。目前常用的果蔬中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留分析方法是混合有機(jī)溶劑提取、濃硫酸凈化、氣相分析[2],此方法的缺點(diǎn)是操作復(fù)雜,分析時(shí)間長,溶劑用量大,環(huán)境污染重。因此,有必要建立一種簡單、快速測定果蔬中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量方法。
凝膠滲透色譜作為一種自動(dòng)化的分離技術(shù),在農(nóng)藥殘留分析中得到了推廣和應(yīng)用[3-5]。本研究運(yùn)用凝膠滲透色譜替代硫酸凈化,有效地克服了硫酸凈化回收率偏低的難題,建立的氣相色譜-質(zhì)譜分析方法,具有操作簡便、分析速度快、分離效能高、檢測靈敏度高等優(yōu)點(diǎn),適合于甜玉米中多種痕量有機(jī)氯農(nóng)藥的測定。
HPSE-EVS 高效壓力溶劑萃取系統(tǒng)(萊伯泰科公司);Auto Clean 全自動(dòng)凝膠滲透系統(tǒng)(萊伯泰科公司):具可變波長紫外檢測器,高效不銹鋼凝膠凈化柱;Auto EVA-60 全自動(dòng)平行濃縮儀(睿科儀器有限公司);N-EVAP-24 氮吹儀(美國Organomation);7890A-5975C 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國Agilent公司)。
乙腈(色譜純,德國Merck);乙酸乙酯(色譜純,德國Merck);環(huán)己烷(色譜純,德國Merck);正己烷(色譜純,德國Merck);17 種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品(100 μg·mL-1,農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測所);有機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)中間液(5 mg·L-1,溶劑為正己烷)。
分別從有機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)中間液移取4 μL、10 μL、20 μL、50 μL 和100 μL 至1 mL 容量瓶中,正己烷定容至刻度,標(biāo)準(zhǔn)工作液濃度為20 ng·mL-1、50 ng·mL-1、100 ng·mL-1、250 ng·mL-1和500 ng·mL-1.
1.4.1 樣品提取
稱取10 g 試樣(精確至0.01 g)與10 g 硅藻土混合,移入加速溶劑萃取儀的34 mL 萃取池中,在10.34 MPa 壓力、80 ℃條件下,加熱5 min,用乙腈靜態(tài)萃取3 min,循環(huán)2 次,然后用池體積60%的乙腈(20.4 mL)沖洗萃取池,并用氮?dú)獯祾?00 s。萃取完畢,將萃取液混勻,取萃取液體積的1/4 待凈化,萃取液收集到60 mL 收集管中。
1.4.2 濃縮
將收集管置于氮吹儀中,35 ℃溫度下濃縮到近干,用乙酸乙酯-環(huán)己烷混合溶劑定容至2 mL。1.4.3 凈化
將樣液過0.22 μm 濾膜,進(jìn)行凝膠凈化并收集,將收集液置于濃縮儀中,在溫度35 ℃、壓力4 psi 條件下濃縮至1 mL,上機(jī)分析。
1.4.4 儀器條件
(1)凝膠色譜條件。色譜柱:Bio-Beads SX3(萊伯泰科);流動(dòng)相:乙酸乙酯和環(huán)己烷1∶1(體積比);紫外檢測器波長:254 nm;上樣體積:2 mL;流速:5 mL·min-1;程序時(shí)間:25 min;收集時(shí)間:10~20 min;將收集液置于濃縮儀中,溫度35 ℃:壓力4 psi;濃縮至1 mL,上機(jī)分析。
(2)GC-MS 條件。色譜柱:DB-5MS,30 m×0.25 mm×0.25 μm;進(jìn)樣口溫度:250 ℃;不分流進(jìn)樣;載氣流速:1.0 mL·min-1;恒流模式;進(jìn)樣量:1.0 μL;柱溫:60 ℃保持2 min,以15 ℃·min-1升至210 ℃;再以6 ℃·min-1升至230 ℃,保持8 min;后程序升溫至280 ℃保持5 min。
離子源:電子轟擊源,70 eV;四極桿溫度:150 ℃;離子源溫度:230 ℃;輔助加熱溫度:280 ℃;溶劑延遲時(shí)間:8.0 min;掃描模式:SIM?;衔锉A魰r(shí)間,定量和定性離子見表1。
表1 17 種有機(jī)氯化合物保留時(shí)間,定量和定性離子表
2.1.1 濃縮溫度優(yōu)化
本次實(shí)驗(yàn)在濃縮環(huán)節(jié)分別采取45 ℃、40 ℃、35 ℃,進(jìn)行實(shí)驗(yàn)并測定回收率。結(jié)果如表2所示。
表2 17 種有機(jī)氯化合物在不同溫度濃縮條件下的回收率表
樣品在45 ℃、40 ℃、35 ℃條件下進(jìn)行濃縮,回收率分別為26.8%~95.0%、45.8%~80.7%、80.8%~112.9%,本方法采用35 ℃進(jìn)行濃縮。
2.1.2 氮吹針角度優(yōu)化
在35 ℃條件下,分別采用氮吹針垂直于液面和氮吹針緊貼管壁,兩種角度進(jìn)行濃縮,發(fā)現(xiàn)后者回收率更高,所以采用氮吹針傾斜進(jìn)行濃縮。
2.2.1 有機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)液總離子流譜圖
17 種有機(jī)氯化合物標(biāo)準(zhǔn)液總離子流譜圖如圖1所示。
圖1 有機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)液總離子流譜圖(50 ng·mL-1)
2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線線性和檢出限
對標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液進(jìn)行稀釋,依次配制成20 ng·mL-1、50 ng·mL-1、100 ng·mL-1、250 ng·mL-1和500 ng·mL-1的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣。以工作液濃度為橫坐標(biāo)以峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得出相應(yīng)的相關(guān)系數(shù)(R2),并且根據(jù)圖譜噪聲的3 倍得出化合物的檢出限。17 種有機(jī)氯化合物的相關(guān)系數(shù)和檢出限見表3,可見17 種化合物的相關(guān)系數(shù)均在0.99 以上。
表3 17 種有機(jī)氯化合物相關(guān)系數(shù)和檢出限表
2.2.3 精密度試驗(yàn)
對17 種有機(jī)氯化合物進(jìn)行6 組平行樣加標(biāo)回收,加標(biāo)濃度為50 ng·mL-1,通過對6 組平行樣圖譜數(shù)據(jù)進(jìn)行分析計(jì)算,得出相應(yīng)化合物的加標(biāo)平均值和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD),具體數(shù)據(jù)見表4。通過表4 可見17 種有機(jī)氯化合物RSD為2.7%~9.6%。
表4 17 種有機(jī)氯化合物精密度表
本文建立了應(yīng)用GPC凈化—GC/MS法測定甜玉米中多種痕量有機(jī)氯農(nóng)藥的方法。樣品在35 ℃條件下采用氮吹針傾斜萃取濃縮、凝膠滲透色譜凈化,GC/MS檢測和確證,50 ng·mL-1濃度加標(biāo)回收。本方法回收率為76.2%~109.8%,RSD為2.7%~9.6%,標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)0.996 2~0.999 0,該方法具有操作簡便、分析速度快、分離效能高、檢測靈敏度高等特點(diǎn),適合于甜玉米中多種痕量有機(jī)氯農(nóng)藥的測定。