高曄

(安陽市中心血站 質(zhì)控科，河南 安陽 455000)

獲得性免疫缺陷綜合征(acquired immunodeficiency syndrome，AIDS)是人類免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus，HIV)引起的傳染性極強(qiáng)的免疫缺陷綜合征，可通過血液、性接觸、母嬰等方式傳播。HIV可直接破壞人體的免疫系統(tǒng)，造成免疫功能下降，易引發(fā)反復(fù)感染。AIDS病死率極高，當(dāng)前仍未發(fā)現(xiàn)特效藥物，且人們生活方式、思想轉(zhuǎn)變、性生活提前等導(dǎo)致AIDS的發(fā)生率呈現(xiàn)逐年升高的趨勢[1-2]。因此，及時(shí)發(fā)現(xiàn)AIDS患者并開展科學(xué)的診治是控制病情進(jìn)展和傳染源以及改善患者生存質(zhì)量的關(guān)鍵。蛋白印跡檢測法、放射免疫沉淀法為診斷AIDS的“金標(biāo)準(zhǔn)”，可有效對AIDS進(jìn)行準(zhǔn)確判斷，但操作較復(fù)雜，價(jià)格較昂貴，出結(jié)果時(shí)間較長，不利于高危人群篩查工作的進(jìn)行[3-4]。膠體金法、酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)為篩查AIDS患者HIV抗體的常用方式，但選用哪種檢查方式更好，還需進(jìn)一步研究。本研究比較膠體金法與ELISA在AIDS高危人群HIV抗體篩查中的應(yīng)用價(jià)值，為臨床提供更有效的篩查AIDS的方法。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2019年1月至2020年8月安陽市中心血站接收的144例AIDS高危者作為研究對象。本研究經(jīng)安陽市中心血站醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批通過。研究對象及家屬簽署知情同意書。144例AIDS高危者：女67例，男77例；年齡22～58歲，平均(38.26±6.25)歲；體質(zhì)量指數(shù)18.5～26.4 kg·m-2，平均(22.36±1.33)kg·m-2；小學(xué)及以下24例，高中及初中58例，大專及以上62例；已婚49例，未婚95例。

1.2 選取標(biāo)準(zhǔn)(1)納入標(biāo)準(zhǔn)：①存在HIV感染高危行為且2～4周內(nèi)存在皮疹、腹瀉、惡心、頭痛、腹痛、全身不適、嘔吐、疲乏無力等癥狀；②存在感染HIV的高危風(fēng)險(xiǎn)：③高危人群(嫖娼、賣淫、同性戀者、靜脈吸毒、娛樂場所從業(yè)人員)、高危因素(不正規(guī)輸血、高危性行為)；④經(jīng)蛋白印跡檢測法明確病情；⑤進(jìn)行ELISA、膠體金法檢測。(2)排除標(biāo)準(zhǔn)：①已進(jìn)行免疫治療；②精神異常、認(rèn)知障礙；③合并心、腎、肝功能障礙；④伴惡性腫瘤；⑤機(jī)體嚴(yán)重感染；⑥合并其他免疫系統(tǒng)疾病；⑦凝血功能障礙；⑧依從性較差。

1.3 檢測方法采集所有入選者靜脈血約3 mL，置于抗凝管中，以3 000 r·min-1離心速度、10 cm離心半徑持續(xù)離心10 min，分離，取上清液，放置于-20 ℃冰箱內(nèi)保存待檢。分別采用蛋白印跡檢測法、膠體金法、ELISA檢查HIV抗體，相關(guān)儀器：ZMX988B洗板機(jī)(北京天石醫(yī)療用品制作所)、9602酶標(biāo)儀(北京普朗公司)、微量加樣器(上海求精生化試劑儀器有限公司)，以上儀器均經(jīng)校準(zhǔn)，性能優(yōu)良。蛋白印跡檢測法、膠體金法、ELISA試劑盒分別購自上海酶聯(lián)生物科技有限公司、廣州萬孚生物技術(shù)有限公司、上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司。所有操作均由檢驗(yàn)科高年資醫(yī)生嚴(yán)格依據(jù)儀器、試劑盒說明實(shí)施。

1.4 觀察指標(biāo)(1)以蛋白印跡檢測法的檢測結(jié)果為“金標(biāo)準(zhǔn)”，統(tǒng)計(jì)膠體金法、ELISA檢測HIV抗體的結(jié)果。(2)比較ELISA、膠體金法對HIV抗體的診斷效能，包括靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度、漏診率、誤診率、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)數(shù)資料(診斷效能)以率(%)表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 膠體金法、ELISA檢測HIV抗體的結(jié)果144例AIDS高危者經(jīng)蛋白印跡檢測法證實(shí)65例HIV抗體陽性，79例陰性。經(jīng)ELISA檢出HIV抗體陽性64例，陰性80例。經(jīng)膠體金法檢出HIV抗體陽性63例，陰性81例。見表1。

表1 蛋白印跡檢測法、膠體金法、ELISA檢測HIV抗體的結(jié)果(n)

2.2 ELISA、膠體金法對HIV抗體的診斷效能ELISA診斷HIV抗體的靈敏度、準(zhǔn)確度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值高于膠體金法，漏診率、誤診率低于膠體金法(P<0.05)。見表2。

表2 ELISA、膠體金法對HIV抗體的診斷效能比較(%)

3 討論

HIV可對人體免疫系統(tǒng)進(jìn)行攻擊，損傷T淋巴細(xì)胞，導(dǎo)致機(jī)體免疫功能逐漸喪失，易受到病原菌入侵，發(fā)生感染性疾病，進(jìn)而引發(fā)一系列惡性疾病，最終導(dǎo)致死亡，目前為止尚無根治病例[5]。近年來，人們思想轉(zhuǎn)變、性生活提前以及人口流動(dòng)性大等致使我國AIDS患者逐漸增多。臨床對AIDS患者的治療尚無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)由于HIV突變率較高，疫苗研制也非常困難[6-7]。針對AIDS以預(yù)防為主。需要加強(qiáng)AIDS宣傳力度及范圍，增加人們防范、保護(hù)意識，進(jìn)而減少傳播。采取快速、準(zhǔn)確、有效的篩查方式也是防治AIDS的重要措施。

檢查AIDS的方式較多，其中蛋白印跡檢測法、放射免疫沉淀法為診斷該病的“金標(biāo)準(zhǔn)”，準(zhǔn)確度較高，但價(jià)格昂貴、操作復(fù)雜、等待結(jié)果時(shí)間較長，不利于臨床早期篩查工作。免疫熒光檢測法、ELISA、明膠顆粒凝集試驗(yàn)、膠體金法為臨床篩查AIDS高危人群常用的檢查方式，其中膠體金法、ELISA應(yīng)用最多。在本研究中，144例AIDS高危者經(jīng)蛋白印跡檢測法證實(shí)65例陽性，79例陰性，ELISA診斷HIV抗體的靈敏度、準(zhǔn)確度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值高于膠體金法，漏診率、誤診率低于膠體金法。這表明與膠體金法比較，將ELISA應(yīng)用于AIDS高危人群HIV抗體篩查中，可提高診斷靈敏度、準(zhǔn)確度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值，降低漏診率、誤診率，有助于提高AIDS檢出率，為臨床診斷提供可靠的信息支持，從而指導(dǎo)臨床治療方案的制定。該方法可作為一種準(zhǔn)確、便捷、快速的檢測方法進(jìn)行推廣。膠體金法僅需采集指尖血即可進(jìn)行檢測，操作簡單、方便，出結(jié)果速度較快，便于攜帶，非常有利于AIDS的篩查工作，但準(zhǔn)確度較低，特異度不高，易出現(xiàn)誤診、漏診，不利于準(zhǔn)確鑒別AIDS。ELISA是檢測AIDS的一種常用的血清學(xué)免疫測定方法，通過將抗原/抗體吸附在固相載體表面，再采用酶標(biāo)記抗原-抗體反應(yīng)技術(shù)，使載體易于標(biāo)準(zhǔn)化，可同時(shí)檢測血清免疫球蛋白G、免疫球蛋白M、免疫球蛋白A，故可提高準(zhǔn)確度；ELISA穩(wěn)定性好，不受血樣本中溶血、脂血的影響，不需要特殊設(shè)備，室溫下即可操作，可一次檢測多份樣本；ELISA檢測窗口期短，可及時(shí)發(fā)生早期HIV感染，提高HIV檢出率[8-10]。

與膠體金法比較，采用ELISA篩查AIDS高危人群HIV抗體的靈敏度、準(zhǔn)確度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值較高，漏診率、誤診率較低。這有助于提高AIDS檢出率。