杜新永 吳贊峰

中圖分類號：S859.79? ? ? ? 文獻標識碼：A? ? ? ? 文章編號：1673-1085（2021）5-0032-05

隨著抗生素濫用及細菌耐藥性增強，噬菌體作為一種可以（部分）替代抗生素的生物殺菌劑受到越來越多的關(guān)注。在白羽肉雞養(yǎng)殖實踐中，大腸桿菌、沙門氏菌是檢出率較高的兩大類病原菌（2020年肉雞檢出率分別是93.1%和53.0%）。通過大群實踐證明，肉雞養(yǎng)殖實踐中，噬菌體比抗生素具有使用優(yōu)勢的場景包括：①病原菌有較高的耐藥性，普通抗生素無法起效;②反復(fù)感染，抗生素耐藥性增強;③養(yǎng)殖動物肝腎受損，無法代謝抗生素的場景。2020年，青島潤達生物科技有限公司全部134組大群實驗結(jié)果中，客戶滿意度達到71.6%?？偠灾删w在白羽肉雞養(yǎng)殖過程中，可以（部分）替代抗生素，實現(xiàn)肉雞綠色養(yǎng)殖。

1? 噬菌體的發(fā)現(xiàn)及其應(yīng)用

噬菌體（bacteriophage， phage）是感染細菌、

真菌、藻類、放線菌或螺旋體等微生物的病毒的總稱，因部分能引起宿主菌的裂解，故稱為噬菌體。100年前（Frederick， 1915; Felix dHerelle， 1917）被發(fā)現(xiàn)時，就已經(jīng)形成了共同的結(jié)論：噬菌體是地球上的古老生物之一，其存在之久、之廣泛，遠超人們的想象！

噬菌體發(fā)現(xiàn)之初，科學家們就注意到了其殺菌能力，以及用噬菌體預(yù)防或治療細菌性病毒的應(yīng)用潛力。20世紀20～30年代，德赫雷爾在巴黎巴斯德研究所試圖用噬菌體進行細菌性感染的治療。因為當時分子生物學知識的欠缺，治療效果不確切。同時隨著抗生素的發(fā)明，噬菌體治療逐漸被邊緣化。但前蘇聯(lián)、格魯吉亞和美國等多地分別開始了噬菌體治療的實驗基礎(chǔ)。最初的噬菌體治療范圍包括：外傷（燒傷）皮膚的銅綠假單胞菌防治;腹瀉類的志賀菌感染等。

隨著抗生素濫用導(dǎo)致細菌耐藥性越來越嚴重，噬菌體治療因其作用機理與抗生素不同，成為了替代或部分替代抗生素預(yù)防或治療細菌性感染的首選目標。包括中國在內(nèi)，科學家們在人類醫(yī)療、畜禽、水產(chǎn)養(yǎng)殖、經(jīng)濟作用種植等方面，均有較大規(guī)模的應(yīng)用案例。

2? 噬菌體與抗生素在細菌病治療方面的比較

噬菌體與抗生素殺菌機理不同，簡單來說，抗生素通過干擾細菌細胞壁、蛋白質(zhì)、核酸等正常代謝，導(dǎo)致細菌在分裂過程中，因不能正常合成新的子代細胞而死亡;而噬菌體通過侵染細菌，將自身的遺傳物質(zhì)注入到細菌體內(nèi)，借助細胞的生命系統(tǒng)完成自己的生理過程，最終裂解細菌（親代）而殺死細菌。因此，噬菌體殺菌效果比抗生素快，表現(xiàn)在臨床應(yīng)用中，起效更快，效果更確切。

細菌形成各種耐藥性機制，針對抗生素的治療，包括修飾抗生素、降解抗生素、將胞內(nèi)抗生素泵出體外等方案;而噬菌體與抗生素作用機理不同，因此，對抗生素的耐受菌，對噬菌體敏感。與此同時，細菌對噬菌體也有類似于抗生素耐受的抗性，包括修飾細胞壁受體、形成莢膜或多糖基質(zhì)阻礙噬菌體吸附、噬菌體核酸泵出系統(tǒng)、流產(chǎn)系統(tǒng)等。在細菌與噬菌體的共進化過程中，噬菌體也會通過自我的生物進化，對抗細菌的各種抗性系統(tǒng)，與抗生素的化學不變性有著明顯的區(qū)別。噬菌體與抗生素殺菌異同點見表1。

3? 噬菌體治療的特點

噬菌體作為生物制劑，與抗生素相比有著比較明顯的特點，其優(yōu)點包括：①起效快：2～4 h有效殺滅病原菌，緩解/消除癥狀，

改善養(yǎng)殖動物的精神狀態(tài);②環(huán)境友好：無殘留、無污染、不形成超級細菌，“雞尾酒”復(fù)合療法：針對多種病原菌;③可以進入血液循環(huán)，凈化體內(nèi)病原菌;④作為活的生物，噬菌體對糞便中病原菌有一定的凈化作用。

噬菌體用于細菌性疾病治療的缺點包括：①僅限于細菌性疾病的防治;②噬菌體是生物活性制劑，在貯藏、運輸過程中，活性可能會有損失;③噬菌體與細菌之間的寄生關(guān)系特異強，缺乏廣譜性，需要生產(chǎn)廠家對客戶進行“定制服務(wù)”。

根據(jù)青島潤達生物有限公司在肉雞養(yǎng)殖場推廣噬菌體的實踐，與抗生素相比，噬菌體比較有優(yōu)勢的應(yīng)用場景包括：①病原菌有較高的耐藥性，普通抗生素無法起效的場景;②養(yǎng)殖動物反復(fù)感染，抗生素耐藥性增強的場景;③養(yǎng)殖動物肝腎受損，無法代謝抗生素的場景。上述場景中使用噬菌體產(chǎn)品，控制細菌性病害的效果要明顯優(yōu)于抗生素治療。噬菌體電鏡圖見圖1。

4? 禽類病料檢測中細菌檢出情況

根據(jù)青島潤達生物工程有限公司提供的數(shù)據(jù)，2020年共處理肉雞（包括白羽肉雞、黃雞、817等品種）病料1308份，其中大腸桿菌檢出率為93.3%，沙門氏菌檢出率51.0%。青島潤達生物2020年對不同肉雞品種的病原細菌檢測情況見表1，不同季度大腸桿菌、沙門氏菌檢出結(jié)果見圖2 A和B。

圖2展示的是2020年4個季度的細菌檢出數(shù)目，不同時期送檢量不同，但是細菌病的檢出率均很高。因此，使用噬菌體保障肉雞綠色養(yǎng)殖非常有必要。

5? 噬菌體大群實驗結(jié)果

為了驗證噬菌體在白羽肉雞養(yǎng)殖過程中對死淘率的控制，青島潤達生物科技有限公司在煙臺某雞場進行了噬菌體與抗生素的對比實驗。其中，1號舍為對照組;2～4號舍為實驗組（其中，3號舍噬菌體用量為0.3 mL/只雞;2號舍、

4號舍均為0.5 mL/只雞），5號舍采用抗生素治療方案。

經(jīng)過7 d的治療，分別統(tǒng)計使用前3 d與使用（含當天）后4d的平均死淘情況，結(jié)果見圖3。其中，4號雞舍死淘率較高，與2號雞舍平均之后，使用前的死淘統(tǒng)計數(shù)據(jù)為15.3只雞/d，使用后為19.4只雞/d，即沒有降低死淘效果;3號雞舍死淘下降最為明顯，從30只/d降到16只/d，優(yōu)于抗生素的治療組（14只/d降至11.2只/d）?？傮w來說，噬菌體治療細菌性感染有一定的效果，但本組實驗說明噬菌體治療的量效關(guān)系不明顯。

使用噬菌體后，雞群狀態(tài)得到明顯改善，精神狀態(tài)，呼吸道癥狀，雞群糞便都明顯優(yōu)于抗生素組。而且，對死淘肉雞進行解剖，觀察其中包心包肝的發(fā)生率，可以清楚地看出，使用噬菌體治療能夠有效地降低白羽肉雞的包心包肝發(fā)生率，見圖4。

綜合分析青島潤達生物科技有限公司在2020年得出的134組噬菌體大群實驗結(jié)果，根據(jù)養(yǎng)殖戶反饋的結(jié)果，成功案例達71.6%（見圖5）。其中，客戶主要關(guān)注點為降低死淘率、改善過料情況、出欄體重、料肉比等指標，客戶滿意是指效果明顯，客戶認可相關(guān)產(chǎn)品，并在后續(xù)主動購買相關(guān)產(chǎn)品?？蛻舨粷M意是指不認同實驗效果，拒絕購買相關(guān)產(chǎn)品。其中，部分客戶提出產(chǎn)品定制要求，但表示結(jié)果不滿意，圖5未展示出相關(guān)數(shù)據(jù)。

6? 結(jié)語

噬菌體作為一種古老的生物，在億萬年的進化過程中，與細菌的共進化關(guān)系從未停止過。而動物作為進化層次較高的生物，早已注意到了這兩者的關(guān)系，并且選擇性地將噬菌體作為天然的細菌“克星”在體內(nèi)存留。比如，有報道稱在人類的肺部發(fā)現(xiàn)了能夠裂解肺炎克雷伯菌的噬菌體。青島潤達生物科技有限公司通過近幾年的生產(chǎn)、產(chǎn)品推廣實踐，證明噬菌體是能夠替代（或部分替代）抗生素控制肉雞養(yǎng)殖過程中的生物制劑，能夠確保實現(xiàn)白羽肉雞的綠色養(yǎng)殖。