丁建娥 尹 艷 姜丹丹 董秀梅 邵淑玲

青島市黃島區(qū)人民醫(yī)院,山東 青島 266400

當(dāng)前由于抗生素的長期廣泛使用，使抗生素抗體有較高的發(fā)生率。本文結(jié)合病例對由抗生素抗體引起直接抗人球蛋白試驗(yàn)(Direct Antiglobulin Test，DAT)陽性，及是否引發(fā)溶血進(jìn)行探討。

1 資料與方法

1.1臨床資料 2019年12月-2020年4月我院11例由于使用抗生素產(chǎn)生抗體的患者，利用本院醫(yī)院信息管理系統(tǒng)1.15.0對患者病史進(jìn)行采集。

1.2試劑與儀器 BX-1型樣本釋放劑,抗體篩選細(xì)胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ，低離子抗人球蛋白卡，抗生素類致敏紅細(xì)胞試劑盒；DIANA免疫微柱孵育器，醫(yī)用離心機(jī)，全自動(dòng)血型分析儀。

1.3研究方法

1.3.1DAT及不規(guī)則抗體篩查試驗(yàn) 將患者標(biāo)本3000r/min離心5分鐘后，使用微柱凝膠卡在IH1000全自動(dòng)血型分析儀上完成，稀釋、加樣、孵育、離心、結(jié)果判讀均由儀器自動(dòng)完成。

1.3.2抗生素類藥物致敏紅細(xì)胞檢測 取藥物抗體檢測試劑卡，向正?？字邢燃尤?5ul 2～2.5%正常細(xì)胞，隨后加入50ul樣本血漿混勻；向?qū)?yīng)藥物的致敏細(xì)胞孔中先加入對應(yīng)的25ul2～2.5%致敏紅細(xì)胞，隨后加入50ul樣本血漿混勻；37℃孵育1h后離心,觀察結(jié)果。

1.3.3溶血情況判斷 通過電子病歷系統(tǒng)查詢患者血紅蛋白、紅細(xì)胞壓積、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、總膽紅素、間接膽紅素及乳酸脫氫酶等生化結(jié)果，判斷其體內(nèi)是否出現(xiàn)溶血反應(yīng)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS23.0軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料采用配對t檢驗(yàn)，P<0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1患者基本信息 11例抗生素抗體陽性患者抗生素皮膚測試實(shí)驗(yàn)均為陰性，其基本信息見表1。

2.2藥物抗體檢測結(jié)果 根據(jù)患者所用抗生素進(jìn)行藥物抗體檢測發(fā)現(xiàn)，11例患者中有6例(54.5%)患者存在哌拉西林他唑巴坦抗體，2例(18.2%)存在頭孢哌酮舒巴坦抗體，2例(18.2%)存在頭孢西丁抗體，1例(9.1%)存在頭孢他啶抗體，抗體陽性程度詳見表1。

2.3不規(guī)則抗體篩查結(jié)果 11例患者不規(guī)則抗體篩查結(jié)果均為陰性，見表1。

表1 患者基本信息及藥物抗體、不規(guī)則抗體、直抗結(jié)果分布

2.5患者各項(xiàng)化驗(yàn)指標(biāo) 患者入院和在使用抗生素治療3-7天后的檢測結(jié)果見表2。從表中可以看出，患者在出現(xiàn)抗生素抗體時(shí)，其血紅蛋白明顯降低(P<0.05),但溶血性指標(biāo)在應(yīng)用抗生素前后無明顯差異(P>0.05)。

表2 患者應(yīng)用抗生素治療前后各項(xiàng)化驗(yàn)結(jié)果

3 討 論

直接抗人球蛋白試驗(yàn)是檢測紅細(xì)胞表面是否致敏相應(yīng)免疫球蛋白或補(bǔ)體的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)[1]。近年來隨著各種抗生素的廣泛使用，由抗生素抗體致敏的紅細(xì)胞DAT陽性率越來越高[2],而藥物致敏的DAT陽性是造成患者溶血的重要原因[3]，因此正確理解抗生素等藥物抗體誘導(dǎo)的DAT 陽性與患者溶血關(guān)系就顯得尤為重要。

本研究根據(jù)患者所用抗生素進(jìn)行相應(yīng)藥物抗體的檢測，發(fā)現(xiàn)抗生素抗體的陽性程度并未與直抗陽性程度保持一致，這可能與藥物在體內(nèi)濃度與體外試劑盒中抗生素致敏紅細(xì)胞濃度不一致，以及患者對抗生素的免疫應(yīng)答能力等有關(guān)。

由表2可以看出，上述患者在產(chǎn)生抗抗生素抗體后大部分僅是引起輕中度貧血，并未引起自身溶血的癥狀(如血紅蛋白尿、脾大、黃疸、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)>5%等)[4]，與之前學(xué)者報(bào)道基本一致，即使用過青霉素后大約只有3%的人會(huì)出現(xiàn) DAT 陽性，而在這3% DAT 陽性患者中，只有不到5%的患者會(huì)出現(xiàn)溶血性貧血[5]。但由于本文例數(shù)較少，還有待于日后詳細(xì)研究證實(shí)。

由于藥物抗體的存在會(huì)造成抗體篩查及交叉配血困難，導(dǎo)致臨床不能及時(shí)放心的用血，以致延誤最佳救治時(shí)機(jī)。因此，臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立起對藥物類抗體的檢測，對就醫(yī)人群的合理使用抗生素及安全用血提供保障。