趙淑鳳

棗強(qiáng)縣人民醫(yī)院,河北 衡水 053100

肺結(jié)核是乙類(lèi)傳染性疾病，常用的實(shí)驗(yàn)室診斷方法主要有比例法藥敏試驗(yàn)、羅氏固體培養(yǎng)、痰涂片鏡檢等，但是需要的時(shí)間較長(zhǎng)，不利于疾病的快速診斷和控制。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，快速核酸檢測(cè)系統(tǒng)在臨床上得以有效應(yīng)用，可以在2h內(nèi)快速檢測(cè)是否為結(jié)核感染，并且能夠快速檢測(cè)是否有耐藥性。本文以我院的肺結(jié)核患者為例，分析快速核酸檢測(cè)系統(tǒng)的應(yīng)用效果。

1 資料與方法

1.1一般資料 59例患者，男性52例，女性27例，年齡39歲～64歲，平均(51.6±3.4)歲；初次治療的患者有50例(84.75%)，復(fù)治的患者有9例(15.25%)。所有參與研究的患者均為肺結(jié)核確診患者。

1.2方法 所有患者在接受抗結(jié)核治療之前需要采集3份痰液標(biāo)本，分別為清晨時(shí)痰液、夜間痰液以及即時(shí)痰液，分別進(jìn)行痰培養(yǎng)、涂片檢查以及EasyNAT-TB檢測(cè)。痰培養(yǎng)結(jié)果為陽(yáng)性的標(biāo)本需要對(duì)其進(jìn)行比例法藥物敏感性試驗(yàn)以及菌種鑒定[1]。

2 結(jié) 果

表1 肺結(jié)核患者EasyNAT與痰培養(yǎng)、痰涂片檢驗(yàn)、細(xì)菌學(xué)檢測(cè)結(jié)果對(duì)比(n)%

3 討 論

涂片檢查：按照《結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)規(guī)程》進(jìn)行觀察，需要觀察300個(gè)視野。未發(fā)現(xiàn)抗酸桿菌則為抗酸桿菌(-)；300視野中包含1條～8條，則需要報(bào)告菌數(shù)；100視野中發(fā)現(xiàn)3條～9條，則為抗酸桿菌陽(yáng)性(1+)；10視野中抗酸桿菌1條～9條，則為抗酸桿菌陽(yáng)性(2+)；每視野中酸桿菌1條～9條，則為抗酸桿菌陽(yáng)性(3+)；每視野中抗酸桿菌≥10條，則為抗酸桿菌陽(yáng)性(3+)[3]。

EasyNAT-TB檢測(cè)：使用全自動(dòng)EasyNAT檢驗(yàn)儀、配套試劑，2h后觀察結(jié)果。取痰液或支氣管沖洗液等臨床標(biāo)本，經(jīng)液化處理、離心法提取DNA模板，用交叉引物擴(kuò)增技術(shù)(CPA)在63℃恒溫下完成結(jié)核分枝桿菌DNA的擴(kuò)增和雜交，然后在密閉的一次性核酸檢測(cè)裝置中用免疫層析乳膠標(biāo)記試紙條定性檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物。免疫層析顯色法技術(shù)：核酸檢測(cè)試紙條包被上特異性的核酸納米級(jí)膠體金顆粒和特別標(biāo)記的核酸探針，使擴(kuò)增后的檢測(cè)產(chǎn)物和膠體金顆粒結(jié)合，在試紙條的檢測(cè)線(xiàn)(T線(xiàn))上顯色來(lái)檢測(cè)DNA擴(kuò)增產(chǎn)物；如果無(wú)目標(biāo)DNA，特異性探針則將無(wú)法把擴(kuò)增產(chǎn)物與標(biāo)記物連接，結(jié)果無(wú)顯色。

痰培養(yǎng)方法:用于培養(yǎng)的標(biāo)本根據(jù)快速核酸檢測(cè)或涂片結(jié)果進(jìn)行選擇(3涂2培)，盡量選擇2份陽(yáng)性結(jié)果的標(biāo)本進(jìn)行培養(yǎng)，每份標(biāo)本接種2個(gè)羅氏培養(yǎng)管。取1ml～2ml標(biāo)本，對(duì)其進(jìn)行常規(guī)消化、離心處理，而后取0.5ml沉淀物接種在羅氏培養(yǎng)管內(nèi)，將其平放在溫度為37℃的培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)，次日觀察培養(yǎng)情況,并將培養(yǎng)管直立。培養(yǎng)第三天、第七天觀察培養(yǎng)情況,之后每周觀察一次，培養(yǎng)陽(yáng)性管進(jìn)行菌種鑒定和藥物敏感性試驗(yàn)，陰性培養(yǎng)管則需要繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)，并且需要持續(xù)培養(yǎng)到8周[2]才能報(bào)培養(yǎng)陰性。

根據(jù)以上方法的聯(lián)合使用，有利于及早發(fā)現(xiàn)肺結(jié)核，肺結(jié)核患者臨床診療的效果顯著提升，有利于提高治療有效性，盡早采取隔離治療等措施，降低該疾病的不良影響。

EasyNAT-TB應(yīng)用在肺結(jié)核疾病的診療中，其檢查結(jié)果與痰培養(yǎng)、痰涂片、細(xì)菌學(xué)檢測(cè)結(jié)果對(duì)比，均有顯著差異，但聯(lián)合應(yīng)用在肺結(jié)核的診療中，更有利于提高肺結(jié)核診斷的準(zhǔn)確性，進(jìn)而提高治療的及時(shí)性和有效性，在臨床上更有價(jià)值。