劉延忠，蔡 虎

（1. 甘肅省醫(yī)療器械檢驗檢測所，甘肅 蘭州 730070； 2. 陜西省醫(yī)療器械質(zhì)量監(jiān)督檢驗院，陜西 咸陽 712046）

月桂醇聚氧乙烯醚硫酸鈉（AES）為通過非離子月桂醇聚氧乙烯醚（AEO－3）經(jīng)硫酸化、中和等過程，由聚氧乙烯鏈連接親水基和疏水基的表面活性劑。其分子結(jié)構(gòu)具有氧乙烯基團(tuán)和硫酸化基團(tuán)，兼有非離子表面活性劑和陰離子表面活性劑（LAS）的優(yōu)點，具備雙重性能［1］，去污、乳化、潤濕、增溶、溶解、發(fā)泡等性能均好，抗硬水性強，配伍廣［2－3］，生物降解度高，對皮膚和眼睛的刺激性低［4－6］。此外，用 AES 部分取代 LAS 還可少用或不用磷酸鹽，并減少總活性物的用量。近年來，AES 被廣泛用于包括生物醫(yī)藥在內(nèi)的各個領(lǐng)域，尤其是一次性使用高分子醫(yī)療器械在末道清洗工藝中常選用一定濃度的AES 為清洗劑。比較傳統(tǒng)分光光度法［7－8］、兩相滴定法［9－10］、色譜法［11－12］、電化學(xué)法［13－14］后，本研究中選擇儀器普及率高、操作簡便、靈敏、快速和重復(fù)性好的分光光度法［15］測定醫(yī)療器械最終沖洗水中AES 的殘留量?，F(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

DU800 型紫外－可見分光光度計（美國Beckman公司）；KQ－100VDE 型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司，功率為 100 W，頻率為 45 kHz）；MS105DU 型電子分析天平（德國梅特勒－托利多公司，精度為十萬分之一）；分液漏斗（配有聚四氟旋塞，規(guī)格為250 mL）。

1.2 試藥

三氯甲烷（色譜純），亞甲藍(lán)（指示劑級），異丙醇（分析純），均購自國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；一水磷酸二氫鈉（分析純，上海麥克林生化科技有限公司）；AES 標(biāo)準(zhǔn)溶液（分析純，含量為98%，山東西亞化學(xué)試劑有限公司）；純化水（自制），最終沖洗水（西安× ×醫(yī)療器械有限公司，批號分別為 190516，190517，190518）。

2 方法與結(jié)果

2.1 定量分析原理

陽離子染料亞甲藍(lán)與LAS 作用，生成亞甲藍(lán)活性物質(zhì)，用三氯甲烷萃取，其吸光度與濃度成正比，用分光光度計在652 nm 波長處測量三氯甲烷層的吸光度，可對LAS 進(jìn)行定量分析。

2.2 溶液制備

取0.1 g AES，精密稱定，加水溶解，轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶中，定容，搖勻，保存于4 ℃冰箱內(nèi)，即得AES 貯備液。臨用新配，精密吸取AES 貯備液1.0 mL，置100 mL容量瓶中，用水定容，搖勻，即得AES 標(biāo)準(zhǔn)溶液。取一水磷酸二氫鈉25 g，溶于150 mL 水中，轉(zhuǎn)移至500 mL 容量瓶中，緩慢加入濃硫酸3.4 mL，搖勻；取亞甲藍(lán)15 mg，加25 mL 水溶解，轉(zhuǎn)移至容量瓶中，用水定容，搖勻，即得亞甲藍(lán)溶液。貯存于棕色試劑瓶中。

2.3 方法學(xué)考察

檢測限（LOD）和定量限（LOQ）考察：對于光譜法，可與空白信號區(qū)別的最小信號 XL由下列公式確定：式中，表示空白信號的平均值；Sb表示空白信號的標(biāo)準(zhǔn)偏差；k 為根據(jù)置信水平確定的系數(shù)，國際純粹與應(yīng)用化學(xué)聯(lián)合會建議取值為3。由上式可知，LOD 為能產(chǎn)生凈響應(yīng)信號的被測物的濃度或質(zhì)量。為確定空白信號的標(biāo)準(zhǔn)偏差和平均值，測定20 個空白樣品的響應(yīng)值（見表 1）。結(jié)果，Sb＝0.001 335，即 LOD 的凈響應(yīng)信號值為 0.004 004。配制 1，2，3 μg 的標(biāo)準(zhǔn)樣品，對 LOD 進(jìn)行復(fù)核，LOQ 為 LOD 的 3 倍，結(jié)果見表 2?？梢?，該方法的 LOD 為 1 μg，LOQ 為 3 μg。

表1 20 個空白樣品響應(yīng)值測定結(jié)果Tab.1 Determination results of response value of 20 blank samples

表2 標(biāo)準(zhǔn)樣品響應(yīng)值測定結(jié)果Tab.2 Determination results of response value of standard sample

標(biāo)準(zhǔn)曲線考察：取梨形分液漏斗7 只，按表3 分別加入純化水和一定體積AES 標(biāo)準(zhǔn)溶液，再分別加入25 mL亞甲藍(lán)溶液和5 mL 異丙醇，搖勻，用單標(biāo)線刻度吸管分別加入15 mL 三氯甲烷，密塞，劇烈振蕩30 s，置漏斗架上靜置分層，在各分液漏斗下出口處塞入少量處理后的脫脂棉（脫脂棉在索氏提取器中用三氯甲烷提取4 h，取出，干燥），將三氯甲烷層通過脫脂棉，置具塞錐形瓶中，即 得 AES 含 量 為 3.069，5.115，10.230，20.460，30.690，40.920 μg 的系列 AES 標(biāo)準(zhǔn)溶液，以三氯甲烷為空白溶液，在625 nm 波長處測定上述待測溶液的吸光度。以標(biāo)準(zhǔn)樣品的吸光度減去空白樣品的吸光度（Y）為縱坐標(biāo)，以標(biāo)準(zhǔn)樣品含量（X，μg）為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸。得回歸方程 Y ＝0.012 7 X －0.015 9（r ＝0.999 8，n ＝ 6）。結(jié)果表明，AES 含量在 3.069 ～ 40.920 μg 范圍內(nèi)與吸光度線性關(guān)系良好。

表3 AES 系列標(biāo)準(zhǔn)溶液配制方法（mL）Tab.3 Preparation method of AES series standard solution（mL）

加樣回收試驗：取分液漏斗7 只，分別加入100 mL最終沖洗水，其中6 只加入AES 標(biāo)準(zhǔn)溶液（質(zhì)量濃度為25 μg ／ mL）各 200 μL，加入亞甲藍(lán)溶液 25 mL、異丙醇5 mL、三氯甲烷15 mL，按標(biāo)準(zhǔn)曲線項下方法測定吸光度，計算回收率。結(jié)果見表4。

表4 AES 加樣回收試驗結(jié)果（n ＝6）Tab.4 Results of the recovery test of AES（n ＝6）

重復(fù)性試驗：由于樣品實測值低于LOD，故重復(fù)性試驗的 RSD 值采用加樣回收試驗的 RSD 值3.00%。

2.4 樣品殘留量測定

精密量取 3 批（批號分別為 190516，190517，190518）最終沖洗水各100 mL，分別置250 mL 分液漏斗中，按標(biāo)準(zhǔn)曲線考察項下方法操作，測定待測溶液在652 nm 波長處的吸光度，以純化水為空白對照，將樣品溶液測得的吸光度減去空白樣品的吸光度并帶入線性回歸方程，計算最終清洗水中AES 的殘留量。結(jié)果3 批最終沖洗水中均未檢出AES，均符合要求。

3 討論

參考《水質(zhì)陰離子表面活性劑的測定亞甲藍(lán)分光光度法（GB7494－87）》《水和廢水監(jiān)測分析方法（第四版）》中陰離子洗滌劑亞甲藍(lán)的分光光度測定方法，加入5 mL 異丙醇，以避免提取過程中因振搖而發(fā)生乳化現(xiàn)象。比較了pH 值對結(jié)果的影響，結(jié)果無論是否調(diào)節(jié)pH值，檢測結(jié)果均不存在差異，故最終未調(diào)節(jié)pH 值。萃取時，采用色譜純級別的三氯甲烷，極大降低了空白值，方法的 LOD 由 5 μg 降至 1 μg。同時，分離三氯甲烷層后無需再次定容，可直接測定，極大簡化了測定過程，減少了三氯甲烷的用量。比較了異丙醇的純度級別，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不論采用分析純或色譜純進(jìn)行測定，對空白值和檢測結(jié)果均無顯著影響。

綜上所述，本研究中建立的分光光度法LOD 低，靈敏度高，重復(fù)性好，可用于最終沖洗水中AES 殘留量的測定。