王曉萌，張卓，朱鋒，屈婧怡，李佳偉，鎖然

（河北農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科技學(xué)院，河北保定 071000）

白藜蘆醇（Resveratrol，RES）是許多植物受到刺激時產(chǎn)生的一種抗毒素，化學(xué)式為C14H12O3。如圖1 所示，天然的RES 有順、反兩種結(jié)構(gòu)，自然界中主要以反式構(gòu)象存在[1-2]。RES 因其抗氧化[3]、抗腫瘤[4]和免疫調(diào)節(jié)[5]作用而被廣泛應(yīng)用在具有防治疾病及保健美容功能的保健品中。巨噬細(xì)胞作為先天免疫系統(tǒng)的一部分，是形成抵御體內(nèi)外部或內(nèi)部危險信號的第一道防線，主要負(fù)責(zé)吞噬細(xì)胞、清除機(jī)體損傷處組織和細(xì)胞的壞死碎片以及病原體等[6]。巨噬細(xì)胞容易獲得、便于培養(yǎng)且可進(jìn)行純化，這是其可以作為實驗細(xì)胞的重要原因[7]。本文綜述了RES 對巨噬細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)活性的研究進(jìn)展，并從作用途徑或物質(zhì)基礎(chǔ)的角度進(jìn)行歸納總結(jié)，以期為RES 在葡萄酒中的進(jìn)一步開發(fā)利用提供理論依據(jù)。

圖1 RES 的順式和反式結(jié)構(gòu)

1 RES 對巨噬細(xì)胞引發(fā)炎癥的抑制作用

RES 的炎癥抑制作用已被諸多試驗證實，該作用也是免疫調(diào)節(jié)功能活性作用的基礎(chǔ)[8]。RES 具有雙向調(diào)節(jié)作用，既可以直接抑制炎癥反應(yīng)，也可以間接通過巨噬細(xì)胞調(diào)節(jié)炎癥介質(zhì)發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用[9-10]。

1.1 對巨噬細(xì)胞釋放炎癥介質(zhì)的抑制作用

RES 通過上調(diào)細(xì)胞因子中的抗炎細(xì)胞因子和下調(diào)促炎細(xì)胞因子，維持炎癥介質(zhì)的正常水平狀態(tài)[11]，本文主要從細(xì)胞因子中的白介素和干擾素展開論述。

1.1.1 白介素的炎癥抑制作用

白介素是最常用的細(xì)胞因子之一，RES 可以通過調(diào)節(jié)白介素水平來降低巨噬細(xì)胞釋放的炎癥介質(zhì)[12]。Ahmed 等[13]研究了從抗癌物質(zhì)中提取的薺苧黃酮/5,6,7-三甲氧基黃酮和RES 的雜交種，可有效攔截巨噬細(xì)胞依賴的促炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生。為了揭示有效的抗炎分子，采用不同化合物（1 μmol/L）對脂多糖誘導(dǎo)的RAW 264.7 巨噬細(xì)胞進(jìn)行了生物學(xué)評估，發(fā)現(xiàn)低濃度NO、PGE2、IL-6、TNF-α 和IL-1β對巨噬細(xì)胞的誘導(dǎo)生成抑制率分別為44.76%、35.71%、53.48%、29.39% 和41.02%，其中IL-6 促炎因子的抑制率最高，證實薺苧黃酮/5,6,7-三甲氧基黃酮和RES 的雜交種可通過抑制IL-6 等細(xì)胞因子來調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞應(yīng)答。Kimura 等[14]研究了RES 處理的M2 巨噬細(xì)胞培養(yǎng)液對血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)-C 誘導(dǎo)的人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞（HLECs）的遷移、侵襲和管形成的影響，RES 抑制M2 巨噬細(xì)胞IL-10和MCP-1 的產(chǎn)生，從而促進(jìn)TGF-β1 的產(chǎn)生。這些研究結(jié)果表明RES 的抗腫瘤和抗轉(zhuǎn)移作用部分是通過M2 巨噬細(xì)胞調(diào)節(jié)對白介素在內(nèi)的細(xì)胞因子，來抑制淋巴管生成從而達(dá)到免疫調(diào)節(jié)的作用。Emeric 等[15]研究IL-1β 治療后人原發(fā)性軟骨細(xì)胞和巨噬細(xì)胞促炎癥旁分泌的相互作用，發(fā)現(xiàn)RES 對促炎標(biāo)志物的分泌有較強(qiáng)的抑制作用，IL-1β 激活軟骨細(xì)胞NF-κB，誘導(dǎo)IL-6 分泌并激活巨噬細(xì)胞中的STAT3蛋白。此外，STAT3 能夠積極調(diào)節(jié)IL-6 的分泌：共培養(yǎng)時，IL-6 水平較單核巨噬細(xì)胞增加了一倍。這些實驗證實了共培養(yǎng)模型在炎癥性關(guān)節(jié)炎相關(guān)過程中的有效性，并為預(yù)防和治療骨關(guān)節(jié)炎開辟了潛在的新途徑。

1.1.2 干擾素的炎癥抑制作用

干擾素除廣泛的抗病毒、抗腫瘤能力外，還可以調(diào)節(jié)天然免疫應(yīng)答和適應(yīng)性免疫應(yīng)答，對于細(xì)菌感染也發(fā)揮著一定的正向或負(fù)向調(diào)節(jié)作用[16]。Feng 等[17]證實RES 可增強(qiáng)LPS 激活的人巨噬細(xì)胞THP-1 的TNF-α 的產(chǎn)生。Saleh 等[18]比較了姜黃素（CUR）、RES和蘿卜硫素（SFN）在微量或不含有阿霉素（DOX）的情況下對脂多糖/干擾素-γ（LPS/IFN-γ）介導(dǎo)的炎癥的抗炎作用。在沒有或存在DOX 的情況下，用LPS/IFN-γ 刺激RAW 264.7 細(xì)胞，僅阿霉素不能刺激RAW 264.7 巨噬細(xì)胞的炎癥反應(yīng)；孵育24 h 后，一氧化氮的產(chǎn)生以及TNF-α 水平顯著上調(diào)，在轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)錄后水平上，RES 表現(xiàn)出對LPS/IFN-γ 刺激的巨噬細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用。Chung 等[19]提出了RES抑制IFN-γ 激活巨噬細(xì)胞炎癥反應(yīng)的JAK/STAT-1通路的新機(jī)制，也研究了RES 對IFN-γ 單獨刺激的巨噬細(xì)胞炎癥基因表達(dá)的影響：RES 可抑制IFN-γ誘導(dǎo)的一氧化氮（NO）、IFN-γ 誘導(dǎo)蛋白-10（IP-10）或IFN-γ 誘導(dǎo)的單核因子（MIG）在RAW 264.7 巨噬細(xì)胞中的產(chǎn)生；此外，RES 還降低了IFN-γ 誘導(dǎo)的誘導(dǎo)型NO 合成酶蛋白水平，表明植物抗毒素能在轉(zhuǎn)錄水平上下調(diào)炎癥基因。

1.2 對巨噬細(xì)胞引發(fā)炎癥反應(yīng)的抑制作用

RES 可以直接與細(xì)胞作用或間接降低蛋白的表達(dá)量來抑制炎癥反應(yīng)的發(fā)生[20-21]。Shin 等[22]研究了RES 對3T3-L1 肥大脂肪細(xì)胞和RAW 264.7 巨噬細(xì)胞共培養(yǎng)的炎癥變化和胰島素抵抗的影響，認(rèn)為RES改善脂肪細(xì)胞與巨噬細(xì)胞間的葡萄糖攝取，從而抑制炎癥反應(yīng)，脂肪細(xì)胞與巨噬細(xì)胞之間的相互作用會加重炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致脂肪細(xì)胞的胰島素抵抗，結(jié)果支持RES 對炎癥脂肪組織的炎癥和胰島素抵抗有有益的作用。Huang 等[23]發(fā)現(xiàn)順式RES 可抑制環(huán)氧合酶-2的表達(dá)和前列腺素E2的產(chǎn)生。順式RES 也能降低p38 MAPK 的磷酸化和c-Jun 蛋白的表達(dá)，證明了順式RES 可以通過抑制巨噬細(xì)胞中典型和非典型炎癥小體產(chǎn)生抗炎作用。Hitomi 等[24]對12 日齡的妊娠小鼠每日飼喂20～40 mg/kg 的RES，證明炎癥細(xì)胞因子在自然早產(chǎn)中起著重要作用。RES 具有較強(qiáng)的抗炎作用，可以通過抑制巨噬細(xì)胞介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)來預(yù)防病理性早產(chǎn)。

2 促進(jìn)M1/M2 巨噬細(xì)胞極化

巨噬細(xì)胞可以改變細(xì)胞分布，具有高度可塑性的表型，從而也改變細(xì)胞的形態(tài)和功能，能夠特殊化并顯示極化的功能特性[25]。Kimura 等[26]認(rèn)為RES 可以通過抑制淋巴管生成和腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞M2 的激活和分化來阻止腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移，RES（50 μmol/L 或5～50 μmol/L）抑制M2 巨噬細(xì)胞細(xì)胞因子的產(chǎn)生，從而促進(jìn)轉(zhuǎn)化生長因子-b1 的產(chǎn)生，RES（25 μmol/L 和50 μmol/L）抑制轉(zhuǎn)錄因子3 的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和激活因子的磷酸化，但不影響M2 巨噬細(xì)胞分化過程中RES 的表達(dá)。Jeong 等[27]為比較補(bǔ)充RES 或運動訓(xùn)練對高脂飲食小鼠巨噬細(xì)胞浸潤和從M1 到M2 枯否細(xì)胞轉(zhuǎn)換的效果，與正常飲食組相比，高脂飲食組M1 巨噬細(xì)胞標(biāo)志物CD11c mRNA表達(dá)明顯升高，促進(jìn)了巨噬細(xì)胞M1/M2 極化，同時實驗證明適度運動訓(xùn)練可抑制巨噬細(xì)胞浸潤，然而補(bǔ)充RES 并不足以改善肥胖誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞浸潤和轉(zhuǎn)換。Yu 等[28]將RES 通過上調(diào)內(nèi)源性IL-10 使巨噬細(xì)胞表型由M(LPS)重組為M(IL-4)，M（LPS）和M（IL-4）是一種新的命名法，多適用于肝臟，可以改善四氯化碳（CCl4）誘導(dǎo)的小鼠肝纖維化，體外實驗中RES 促進(jìn)了M(LPS)向M(IL-4)巨噬細(xì)胞的轉(zhuǎn)化，并提高了CD206 和iNOS 的表達(dá)，M(IL-4)和M(LPS)中IL-10含量均升高，RES 通過產(chǎn)生更多的IL-10 來減輕肝纖維化，促進(jìn)了M(LPS)向M(IL-4)樣巨噬細(xì)胞極化。

3 抑制巨噬細(xì)胞外基質(zhì)蛋白酶表達(dá)

動脈粥樣硬化斑塊的穩(wěn)定性決定了動脈粥樣硬化是否會導(dǎo)致穩(wěn)定型心絞痛或危及生命的急性冠脈綜合征。許多實驗表明，基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）在破壞斑塊穩(wěn)定性方面發(fā)揮關(guān)鍵作用[29]。Ge 等[30]通過Western blot 和酶譜分析表明，在誘導(dǎo)THP-1單核細(xì)胞向巨噬細(xì)胞分化過程中，EMMPRIN 表達(dá)和MMP-9 活性均顯著上調(diào)，并發(fā)現(xiàn)RES 可能通過激活PPARγ 下調(diào)EMMPRIN 和MMP-9 的表達(dá)，且RES 對PPARγ 的激活呈濃度依賴性。Oak 等[31]通過檢測MMP-2 蛋白的表達(dá)，證明紅葡萄酒中的多酚類化合物通過直接抑制血管平滑肌細(xì)胞的膜型1 型MMP，強(qiáng)烈抑制了MMP-2 的表達(dá)及其對凝血酶的反應(yīng)激活，并認(rèn)為基質(zhì)降解的抑制作用可能有助于其對心血管系統(tǒng)的有益作用。

4 結(jié)語

RES 具備諸多途徑來調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答，具有較好的應(yīng)用價值，其在葡萄、虎杖及花生等食品中含量較高，來源廣泛、安全性高，在植物資源開發(fā)中具有較大的挖掘潛力，有待于進(jìn)一步研究，以期應(yīng)用于葡萄酒及功能性食品等的制備中。