陳睿琦 劉曉云

作者單位：遵義醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科，貴州，遵義563000

卵巢癌為女性生殖系統(tǒng)的常見惡性腫瘤，早期卵巢癌無明顯癥狀，多數(shù)患者確診時已處于中晚期，5年生存率較低，尤其是已經(jīng)發(fā)生轉(zhuǎn)移的晚期卵巢癌患者5年生存率低于30%［1］。上皮性卵巢癌（epithelial ovarian cancer，EOC）為卵巢癌最常見的類型，尋找新的有效的生物標(biāo)志物及治療手段是改善EOC 患者生存率的重要方式。高遷移率族蛋白A2（high mobility group protein A2，HMGA2）是近年來發(fā)現(xiàn)的與惡性腫瘤發(fā)生、浸潤和轉(zhuǎn)移存在密切聯(lián)系的染色質(zhì)非組蛋白，其在多種間質(zhì)性或上皮性惡性腫瘤組織中存在高表達［2］。白細胞介素?22（interleukin?22，IL?22）為T 輔助細胞22（T?helper cell 22，Th22）的效應(yīng)細胞因子，在腫瘤免疫逃逸機制中存在關(guān)鍵作用，研究證實IL?22 可促進結(jié)腸癌、乳腺癌等惡性腫瘤細胞增殖［3?4］。葉酸受體1（folate receptor 1，F(xiàn)OLR1）蛋白為糖基化磷脂酰肌醇偶聯(lián)糖蛋白，對于葉酸及其衍生物具有高度親和力，其在正常組織中表達很低，但在特定上皮來源惡性腫瘤組織中呈高表達［5］。本研究對EOC 患者血清HMGA2、IL?22、FOLR1 水平及與臨床病理特征和預(yù)后生存的相關(guān)性進行了探究，具體如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2018年10月至2020年9月收治的60例EOC 患者作為EOC 組，其中，EOC 患者平均年齡（51.3±3.8）歲，F(xiàn)IGO 分期Ⅰ期10 例、Ⅱ期13 例、Ⅲ期28 例、Ⅳ期9 例；分化程度：低分化17 例，中分化22例，高分化21 例；組織分型：漿液性囊腺癌34 例，非漿液性囊腺癌26 例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移：有11 例，無49 例；腹水：有14 例，無46 例。選擇60 例卵巢良性腫瘤患者作為良性組，其中內(nèi)功內(nèi)膜異位癥患者28例，宮頸癌前病變21 例，盆腔炎性包塊患者11 例，均術(shù)后證實卵巢無任何病變，平均年齡（51.7±3.8）歲。另選擇同期健康體檢者60 例作為健康組，平均年齡（51.5±4.4）歲，均自愿參與本研究，無卵巢疾病史，月經(jīng)及內(nèi)分泌功能正常。3 組研究對象年齡比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。所有患者知情同意，本實驗經(jīng)醫(yī)院倫理委員會同意批準。

納入標(biāo)準：①均符合卵巢腫瘤的相關(guān)診斷標(biāo)準［6］，并經(jīng)術(shù)后組織病理學(xué)檢查確診；②EOC 患者未接受放射治療、化學(xué)治療等；③均為首發(fā)病例。排除標(biāo)準：①預(yù)計生存期低于3 個月者；②合并其他惡性腫瘤者；③合并重要臟器功能障礙、系統(tǒng)疾病者；④無法配合完成研究者。

1.2 方法

EOC 患者及良性腫瘤患者入院次日清晨抽取5 mL 空腹靜脈血，健康體檢者入院當(dāng)日清晨抽取5 mL 空腹靜脈血，3 000 r/min 離心15 min 收取上清，-80℃保存待測。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測血清HMGA2、IL?22、FOLR1 水平，HMGA2、FOLR1試劑盒購自武漢博士德生物工程有限公司，IL?22試劑盒購自美國R&D 公司，680 全自動酶標(biāo)儀購自美國Bio?Rad 公司。嚴格依照儀器及試劑盒說明書進行各項操作。所有患者均符合EOC 手術(shù)相關(guān)指征，依照文獻［6］標(biāo)準進行治療，術(shù)后隨訪6 個月～2年，統(tǒng)計復(fù)發(fā)情況，所有患者均采用門診復(fù)診的形式進行隨訪，所有患者均配合完成隨訪，復(fù)發(fā)患者根據(jù)患者實際情況給予對癥治療。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS 19.0 軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以n（%）表示，計量資料以（）表示，兩組間比較采用t檢驗，多組間比較采用單因素方差分析。受試者工作特征曲線（Receiver operating curve，ROC）及曲線下面積（Area under the curve，AUC）評估HMGA2、IL?22、FOLR1 對于EOC 的診斷價值；Cox 回歸模型分析HMGA2、IL?22、FOLR1是否為影響EOC 患者生存率的危險因素。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組血清HMGA2、IL?22、FOLR1 水平比較

血清HMGA2、IL?22、FOLR1 水平比較結(jié)果：EOC 組>良性組>健康組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

表1 各組血清HMGA2、IL?22、FOLR1 水平比較（±s）Table 1 Comparison of serum HMGA2，IL?22 and FOLR1 levels in each group（±s）

表1 各組血清HMGA2、IL?22、FOLR1 水平比較（±s）Table 1 Comparison of serum HMGA2，IL?22 and FOLR1 levels in each group（±s）

組別健康組良性組EOC 組F 值P 值n 60 60 60 HMGA2（mg/L）22.5±5.7 58.7±6.9 253.7±58.3 29.257 0.000 IL?22（pg/mL）17.2±2.8 26.1±2.9 39.2±5.3 26.927 0.000 FOLR1（pg/mL）59.2±6.6 128.6±24.3 562.8±77.1 48.247 0.000

2.2 EOC 患者血清HMGA2、IL?22、FOLR1 與臨床病理特征的相關(guān)性分析

不同F(xiàn)IGO 分期、組織分化程度、病理類型、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腹水EOC 患者血清HMGA2、FOLR1、IL?22 水平比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。不同年齡血清HMGA2、IL?22、FOLR1 水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。見表2。

表2 EOC 患者血清HMGA2、IL?22、FOLR1 與臨床病理特征的相關(guān)性分析（±s）Table 2 Correlation analysis of serum HMGA2，IL?22，F(xiàn)OLR1 and clinicopathological characteristics in EOC patients（±s）

表2 EOC 患者血清HMGA2、IL?22、FOLR1 與臨床病理特征的相關(guān)性分析（±s）Table 2 Correlation analysis of serum HMGA2，IL?22，F(xiàn)OLR1 and clinicopathological characteristics in EOC patients（±s）

注：同意臨床病理特征內(nèi)比較，aP<0.05。

臨床病理特征年齡<50≥50 FIGO 分期Ⅰ～ⅡⅢ～Ⅳ病理類型漿液性囊腺癌非漿液性囊腺癌組織分化程度中低分化高分化淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移n HMGA2（mg/L）IL?22（pg/mL）FOLR1（pg/mL）21 39 251.8±55.6 255.4±59.7 38.6±4.9 39.5±5.5 556.7±75.3 563.1±77.8 23 37 214.7±47.5 263.2±66.0a 30.2±3.9 44.1±5.3a 487.7±70.2 581.3±79.5a 34 26 286.5±51.3 202.4±47.8a 38.1±5.5 39.2±6.0 687.4±82.9 446.9±61.3a 39 21 214.2±46.2 280.0±61.8a 35.2±4.9 47.2±5.3a 426.4±58.6 697.7±76.1a有無11 49 299.2±53.1 187.5±42.0a 46.3±5.1 38.2±4.9a 680.5±77.5 453.7±62.6a腹水有無14 46 262.5±52.8 209.7±44.4a 43.5±5.0 31.8±5.4a 586.5±77.1 492.5±73.9a

2.3 血清HMGA2、IL?22、FOLR1 診斷EOC 的ROC 曲線

血清HMGA2、IL?22、FOLR1聯(lián)合診斷比單獨診斷具有更好的靈敏度、特異度及準確度。見表3、圖1。

表3 血清HMGA2、IL?22、FOLR1診斷EOC的臨床價值（%）Table 3 The clinical value of serum HMGA2，IL?22，F(xiàn)OLR1 in the diagnosis of EOC（%）

圖1 HMGA2、IL?22、FOLR1 診斷EOC 的ROC 曲線Figure 1 ROC curve of HMGA2，IL?22，F(xiàn)OLR1 in the diagnosis of EOC

2.4 是否復(fù)發(fā)EOC 患者血清HMGA2、IL?22、FOLR1 水平比較

隨訪期間6 例出現(xiàn)復(fù)發(fā)，復(fù)發(fā)率為10.0%。復(fù)發(fā)組EOC 患者血清HMGA2、IL?22、FOLR1 水平明顯高于未復(fù)發(fā)組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表4。

表4 不同臨床結(jié)局EOC 患者血清HMGA2、IL?22、FOLR1水平比較（±s）Table 4 Comparison of serum HMGA2，IL?22 and FOLR1 levels in EOC pa tients with different clinical outcomes（±s）

組別未復(fù)發(fā)組復(fù)發(fā)組t 值P 值n 54 6 HMGA2（mg/L）227.4±53.1 292.6±61.5 2.812 0.007 IL?22（pg/mL）37.5±4.7 55.3±5.9 8.590 0.000 FOLR1（pg/mL）546.9±77.8 1057.3±91.6 14.997 0.000

2.5 影響EOC 患者生存率的Cox 回歸分析

Cox 單因素回歸分析顯示，F(xiàn)IGO 分期、組織分化程度、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、HMGA2、IL?22、FOLR1 異常升高是影響EOC 患者復(fù)發(fā)的危險因素；Cox 多因素回歸分析FIGO 分期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、HMGA2、IL?22、FOLR1 異常升高是導(dǎo)致EOC 患者復(fù)發(fā)的危險因素。見表5。

表5 影響EOC 患者復(fù)發(fā)的Cox 回歸分析Table 5 Cox regression analysis affecting the recurrence of EOC patients

3 討論

卵巢癌為惡性腫瘤，其與良性腫瘤相比，腫瘤細胞增殖旺盛，DNA 合成劇增。由于上皮性卵巢癌患者早期無特異性臨床癥狀，多數(shù)確診已處于中晚期，延誤了最佳治療時機，因此尋找高效的診斷方法為臨床上關(guān)注的重點內(nèi)容。

HMGA2 是高遷移率蛋白超家族的成員之一，其功能復(fù)雜，為胚胎發(fā)育早期高表達的蛋白，其在分化成熟的細胞中呈低表達，但在惡性增殖的腫瘤細胞中出現(xiàn)高表達，與腫瘤細胞惡性增殖分化存在密切關(guān)系。有研究指出［7］，卵巢癌組織中HMGA2 表達為陽性，可作為卵巢癌診斷的潛在腫瘤標(biāo)志物。本研究結(jié)果提示HMGA2 與EOC 的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。近年來研究發(fā)現(xiàn)［8］，HMGA2 表達水平與惡性腫瘤發(fā)生、發(fā)展、侵襲、轉(zhuǎn)移及預(yù)后存在密切關(guān)系，高表達HMGA2 患者往往腫瘤惡性程度更高、侵襲能力更強、進展更快、容易發(fā)生轉(zhuǎn)移和預(yù)后較差，這與本研究的結(jié)果相一致。研究認為［9］，CD4+T 細胞類型及其相關(guān)效應(yīng)細胞因子參與了多種惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展。IL?22 為Th22 細胞的效應(yīng)因子，其為IL?10 家族新成員，與IL?10 一樣參與了腫瘤免疫逃逸過程，二者在腫瘤、自身免疫性疾病、感染等發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮不同程度的作用，IL?22 在腫瘤疾病中更具特異性。研究證實［10?11］，在結(jié)腸癌、胃癌患者中IL?22 顯著上調(diào)，并在晚期患者中明顯高于早期患者。本研究結(jié)果提示，血清IL?22 在EOC 患者中存在異常高表達，并參與了EOC 腫瘤的病因?qū)W過程。研究認為［12］，IL?22 可通過活化致癌轉(zhuǎn)錄因子STAT3 誘導(dǎo)腫瘤發(fā)生和轉(zhuǎn)移，這可能是其在EOC 中發(fā)揮作用的主要機制。葉酸受體α 為FOLR1 基因編碼并通過糖基磷脂酰肌醇偶聯(lián)于細胞膜表面的單鏈糖蛋白，F(xiàn)OLR1 在多種惡性腫瘤細胞的側(cè)膜和底膜上高表達［13］。本研究中，EOC 患者血清FOLR1 水平明顯升高，其與HMGA2 均與EOC 患者臨床病理特征存在相關(guān)性。本研究ROC 分析結(jié)果提示，血清HMGA2、IL?22、FOLR1 聯(lián)合檢測在EOC 診斷中具有較好的臨床價值，可作為EOC 診斷的潛在分子標(biāo)志物。

本研究中，分析6 例復(fù)發(fā)EOC 患者，其血清HMGA2、IL?22、FOLR1水平明顯更高。提示，HMGA2、IL?22、FOLR1 異常升高與EOC 患者不良預(yù)后相關(guān)。Cox 回歸分析結(jié)果顯示，HMGA2、IL?22、FOLR1 異常升高是導(dǎo)致EOC 患者生存率降低的危險因素。研究指出，HMGA2 水平越高，卵巢癌患者預(yù)后越差［14］；趙航發(fā)現(xiàn)［15］，IL?22 與卵巢癌患者預(yù)后相關(guān)，其在正常人群中低表達，在卵巢癌患者中呈現(xiàn)高表達；梁振等報道顯示［16］，F(xiàn)OLR1 與卵巢癌患者預(yù)后生存較差有關(guān)。因此，血清HMGA2、IL?22、FOLR1 水平在一定程度上反映了EOC 患者預(yù)后情況。

綜上所述，血清HMGA2、IL?22、FOLR1 水平異常升高與EOC 發(fā)生發(fā)展、臨床生物學(xué)行為及預(yù)后存在密切聯(lián)系，可作為EOC 診斷的有效指標(biāo)。