王 軍，黃文達(dá)，薛思為

（惠陽(yáng)三和醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東惠州 516211）

慢性乙肝是發(fā)病率較高的慢性傳染病，該病癥因感染乙肝病毒（HBV）所致。相關(guān)調(diào)查顯示，全球人口中約35%感染過(guò)HBV，其中15%～30%HBV攜帶者會(huì)發(fā)展為肝硬化[1]。HBV DNA是診斷HBV感染最直接的指標(biāo)，其特異性、靈敏性較高，HBV攜帶者的傳染性強(qiáng)弱與HBV DNA定量水平密切相關(guān)，其在判斷病毒復(fù)制程度和抗病毒藥物治療效果中具有重要價(jià)值，但該指標(biāo)對(duì)檢測(cè)儀器和環(huán)境要求較高[2]。乙型肝炎表面抗原（HBsAg）是HBV感染的重要標(biāo)志物，在HBV感染患者中，HBsAg亞病毒顆粒數(shù)量與成熟病毒顆粒相比明顯更多，即便經(jīng)藥物抑制病毒復(fù)制，HBsAg仍在持續(xù)合成與分泌，因此其水平與肝病的發(fā)展存在密切關(guān)聯(lián)[3]。本研究旨在探討慢性乙肝和肝硬化患者HBV DNA與HBsAg的相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析惠陽(yáng)三和醫(yī)院2019年1月至2020年10月收治的105例肝病患者的臨床資料，按照不同疾病類型分為3組。將37例慢性乙肝患者納入A組，其中男性23例，女性14例；年齡26～64歲，平均（38.61±8.27）歲；其中乙型肝炎E抗原（HBeAg）陽(yáng)性25例。將32例代償期肝硬化患者納入B組，其中男性20例，女性12例；年齡24～65歲，平均（38.56±8.18）歲；其中HBeAg陽(yáng)性22例。將36例失代償期肝硬化患者納入C組，其中男性25例，女性11例；年齡25～63歲，平均（38.68±8.37）歲；其中HBeAg陽(yáng)性24例。3組患者一般資料相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），組間具有可比性。研究經(jīng)院內(nèi)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患者均符合《慢性乙型肝炎防治指南（2015年更新版）》[4]中的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)；肝硬化患者符合《臨床肝臟病學(xué)》[5]中的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)；患者無(wú)抗病毒治療史；初診患者。排除標(biāo)準(zhǔn)：其他原因所致的肝炎或肝硬化患者；擬診肝癌患者；患者入組前有提高血細(xì)胞、降酶藥物治療史。

1.2 方法 采集3組患者空腹肘靜脈血5 mL，室溫下放置30 min，離心處理（轉(zhuǎn)速3 000 r/min，半徑9 cm，時(shí)間14 min），取上層血清備檢，采用圣湘SLAN96實(shí)時(shí)定量PCR儀對(duì)HBV DNA定量水平進(jìn)行檢測(cè)；采用化學(xué)發(fā)光法對(duì)HBsAg定量水平進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)儀器為羅氏ROCH601化學(xué)發(fā)光免疫分析儀。

1.3 觀察指標(biāo) ①比較3組患者HBV DNA和HBsAg定量水平。②觀察并比較3組HBeAg陽(yáng)性患者HBV DNA和HBsAg定量水平。③分析3組患者HBV DNA與HBsAg的相關(guān)性。④分析HBV DNA、HBsAg與肝硬化程度的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 24.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以（±s）表示，采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用重復(fù)測(cè)量方差分析；符合正態(tài)分布的數(shù)據(jù)相關(guān)性分析采用Pearson檢驗(yàn)，不符合正態(tài)分布的數(shù)據(jù)數(shù)據(jù)相關(guān)性分析使用Spearman檢驗(yàn)。以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3組患者HBV DNA、HBsAg水平 A組患者HBV DNA、HBsAg水平均顯著高于B組、C組，且B組顯著高于C組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 3組患者HBV DNA、HBsAg水平比較(±s,IgIU/mL)

表1 3組患者HBV DNA、HBsAg水平比較(±s,IgIU/mL)

注：與A組比，*P＜0.05，與B組比，#P＜0.05。HBV：乙肝病毒；HBsAg：乙型肝炎表面抗原。

組別 例數(shù) HBV DNA HBsAg A組 37 7.59±1.16 3.93±0.69 B組 32 6.61±1.05* 3.54±0.37*C組 36 5.58±0.98*# 2.71±0.33*#F值 32.347 56.991 P值 ＜0.05 ＜0.05

2.2 3組HBeAg陽(yáng)性患者HBV DNA、HBsAg水平 A組HBeAg陽(yáng)性患者25例，B組HBeAg陽(yáng)性患者22例；C組HBeAg陽(yáng)性患者24例。A組HBeAg陽(yáng)性患者HBV DNA、HBsAg水平均顯著高于B組、C組，B組HBeAg陽(yáng)性患者HBsAg定量水平顯著高于C組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）；B組、C組HBeAg陽(yáng)性患者HBV DNA定量水平經(jīng)比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），見(jiàn)表2。

表2 3組HBeAg陽(yáng)性患者HBV DNA、HBsAg水平比較(±s,IgIU/mL)

表2 3組HBeAg陽(yáng)性患者HBV DNA、HBsAg水平比較(±s,IgIU/mL)

注：與A組比，＊P＜0.05，與B組比，#P＜0.05。

組別 例數(shù) HBV DNA HBsAg A組 25 7.69±1.10 4.31±0.56 B組 22 6.85±0.97* 3.76±0.45*C組 24 6.41±0.81* 3.11±0.41*#F值 11.043 38.366 P值 ＜0.05 ＜0.05

2.3 HBV DNA與HBsAg的相關(guān)性Spearman相關(guān)性分析結(jié)果顯示，A組中，HBV DNA與HBsAg呈正相關(guān)（r=0.982，P＜0.05）；而B(niǎo)組、C組中，HBV DNA與HBsAg定量水平之間無(wú)明顯相關(guān)性（r=0.085、0.067，均P＞0.05），見(jiàn)表3。

表3 HBV DNA與HBsAg的相關(guān)性

2.4 HBV DNA與HBsAg定量水平與肝硬化程度的相關(guān)性Spearman相關(guān)性分析結(jié)果顯示，HBV DNA、HBsAg定量水平與肝硬化程度均呈負(fù)相關(guān)（r=-0.715、-0.504，均P＜0.05）。

3 討論

慢性乙肝是指患者感染HBV持續(xù)6個(gè)月以上，且肝臟出現(xiàn)不同炎癥壞死和（或）肝纖維化的疾病。全球有2億多慢性HBV感染者，而多數(shù)HBV感染患者隨著病情加重會(huì)發(fā)展為肝硬化，在國(guó)內(nèi)，約60%的HBV患者會(huì)轉(zhuǎn)化為肝硬化[6]。HBV DNA位于HBV核心內(nèi)，其是HBV感染的最直接證據(jù)，具有特異性、靈敏度較高的特點(diǎn)，其定量水平與病毒復(fù)制和傳染性存在密切關(guān)聯(lián)。HBsAg是HBV感染的重要標(biāo)志物，具有穩(wěn)定可靠的特點(diǎn)，可作為診斷HBV感染的重要依據(jù)，其是一種由乙型肝炎病毒S基因分泌而來(lái)的病毒包膜蛋白質(zhì)，可排放至細(xì)胞外。研究表明，與感染性成熟病毒顆粒相比，HBsAg亞病毒顆粒定量水平更高，在及時(shí)進(jìn)行抗病毒治療后，仍不能完全抑制病毒復(fù)制增生，HBsAg仍可持續(xù)合成與分泌[7]?？梢?jiàn)，HBsAg在HBV感染和疾病發(fā)展中發(fā)揮著重要作用。血清HBsAg是肝細(xì)胞核基因整合的共價(jià)閉合環(huán)DNA（cccDNA）的轉(zhuǎn)錄和翻譯結(jié)果，其滴度與cccDNA數(shù)量相關(guān)，因此，通過(guò)檢測(cè)血清HBsAg可反映肝細(xì)胞中cccDNA的轉(zhuǎn)錄和翻譯活性。由于HBV DNA只能反映HBV復(fù)制情況，而HBsAg可提供與HBV DNA不同的互補(bǔ)信息，因此可將HBsAg作為感染細(xì)胞數(shù)量的替代性指標(biāo)。

本研究結(jié)果顯示，A組患者HBV DNA、HBsAg水平均顯著高于B組、C組，B組顯著高于C組，提示HBV DNA、HBsAg定量水平隨著病情加重而逐漸降低。分析原因可能為HBV的入侵會(huì)改變?nèi)梭w機(jī)能，體內(nèi)細(xì)胞會(huì)更具有特異性，體液也會(huì)出現(xiàn)明顯的免疫應(yīng)答，進(jìn)而破壞肝細(xì)胞，隨著疾病的不斷發(fā)展，肝細(xì)胞的損壞范圍會(huì)繼續(xù)擴(kuò)大，增加肝部的纖維化容量，可能出現(xiàn)HBV DNA和HBsAg水平降低的情況[8]。本研究結(jié)果還顯示，A組HBeAg陽(yáng)性患者HBV DNA與HBsAg定量水平均顯著高于B組、C組，B組HBeAg陽(yáng)性患者HBsAg定量水平顯著高于C組，B組、C組HBeAg陽(yáng)性患者HBV DNA定量水平相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05），提示隨著慢性乙型肝炎向肝硬化進(jìn)展，患者肝損傷不斷加重，HBsAg和HBV DNA定量水平可能逐漸降低，但并不能完全說(shuō)明HBV復(fù)制不活躍，也可能與本研究樣本量少有關(guān)。

本研究結(jié)果顯示，HBV DNA、HBsAg在A組中呈正相關(guān)，在B組、C組中無(wú)明顯相關(guān)性，提示HBV DNA、HBsAg在疾病不同階段并不完全平行，分析原因可能與HBV DNA、HBsAg在不同疾病階段的合成和分泌路徑不完全相同有關(guān)[9]。Spearman相關(guān)性分析顯示，HBV DNA、HBsAg與肝硬化程度呈負(fù)相關(guān)，但HBsAg和HBV DNA定量較低的肝硬化患者，不等同于肝細(xì)胞內(nèi)cccDNA數(shù)量的相應(yīng)減少，仍需積極的抗病毒治療，加強(qiáng)腫瘤篩查，可聯(lián)合血清學(xué)和影像學(xué)檢查來(lái)提高早期肝癌的檢出率。

綜上，隨著病情加重，HBV DNA、HBsAg定量水平呈逐漸降低趨勢(shì)，且HBV DNA與HBsAg呈正相關(guān)，但其在不同疾病階段并不完全平行，HBV DAN、HBsAg與肝硬化呈負(fù)相關(guān)，臨床通過(guò)對(duì)HBV DNA、HBsAg進(jìn)行定量測(cè)定可有效預(yù)防肝硬化發(fā)展進(jìn)程。