胡銀娥

人體皮膚進行創(chuàng)傷修復時，成纖維細胞異常增殖，膠原過度沉積可形成瘢痕疙瘩，呈浸潤性生長，與正常皮膚無明顯邊界，單純手術切除復發(fā)率高，嚴重影響病人身心健康。近年來，越來越多的研究表明，成纖維細胞的增殖和凋亡對瘢痕疙瘩的形成有關鍵作用，但具體機制尚不完全明確。腫瘤壞死因子α刺激基因-6（TSG-6）是由腫瘤壞死因子α誘導的炎癥相關基因，已有報道表明，TSG-6可能通過抑制核因子-KB信號通路活性，促進瘢痕疙瘩成纖維細胞凋亡，但關于TSG-6在瘢痕疙瘩不同部位中表達差異的研究尚未見報道。CXC趨化因子配體8（CXCL8）在瘢痕疙瘩組織中異常表達，是病情持續(xù)發(fā)展的重要原因。本研究通過分析瘢痕疙瘩不同部位中TSG-6、CXCL8的表達，探討TSG-6、CXCL8對瘢痕疙瘩的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

資料概況：瘢痕疙瘩組織均來自2016年3月至2018年10月在河南大學淮河醫(yī)院進行手術切除聯(lián)合放射療法治療的瘢痕疙瘩病人25例，其中男11例，女14例，年齡范圍12～39歲，年齡（34.24±6.25）歲，發(fā)病部位有耳部、前胸、后背，依次為10例、9例、6例。標本經(jīng)病理學檢查證實，在直視及鏡下區(qū)分各標本為浸潤部（與正常皮膚交界處，表面潮紅）、增生部（隆起明顯，暗紅色）、老化部（中央凹陷，色淡）。25例中，浸潤部、增生部、老化部例數(shù)分別為12例、11例、2例。

診斷標準：（1）瘢痕超過原損傷邊緣，向周圍正常皮膚組織浸潤生長；（2）瘢痕界限不明確，1年內(nèi)無自發(fā)消退征象；（3）手術切除后復發(fā)，且瘢痕范圍超過原范圍。以上符合任意一條即可確診為瘢痕疙瘩。

納入標準：（1）標本來源的瘢痕疙瘩病人在術前6個月未進行任何藥物治療；（2）標本來源病人6個月內(nèi)未進行任何局部放射治療；（3）病程超過1年；（4）瘢痕疙瘩最大直徑應符合以下標準：2 cm≤耳部≤4 cm；7 cm≤前胸、后背≤10 cm。

排除標準：（1）伴有腫瘤等其他嚴重疾病者。（2）臨床資料不完整者。正常皮膚組織取自本院四肢外傷手術病人，共17例，其中男9例，女8例，年齡范圍21～45歲，年齡（36.81±5.31）歲。所有標本取材均經(jīng)病人或其近親屬知情并簽署同意書，本研究符合《世界醫(yī)學協(xié)會赫爾辛基宣言》相關要求。

1.2 研究方法

浸潤部、增生部、老化部、正常皮膚組織經(jīng)裂解、離心，保留上清液，用酶聯(lián)免疫吸附法檢測TSG-6蛋白、CXCL8蛋白、凋亡相關蛋白B淋巴細胞瘤-2（Bcl-2）、第二個線粒體衍生的半胱天冬酶激活蛋白（Smac）、半胱氨酸蛋白酶（caspase-3）、黑色素瘤凋亡抑制蛋白（Livin）、p53，以及膠原代謝相關蛋白轉(zhuǎn)化生長因子-β1（TGF-β1）、I型膠原（COL-I）、基質(zhì)金屬蛋白酶2（MMP-2）、胰島素樣生長因子-1（IGF-1）。試劑盒均購于上海生工生物公司。

2 結(jié)果

2.1 一般資料比較

兩組研究對象性別、年齡、BMI比較，差異無統(tǒng)計學意義（

P＞

0.05），見表1。

表1 瘢痕疙瘩25例與外傷手術17例一般資料比較

2.2 四組皮膚組織TGS-6蛋白、CXCL8蛋白表達量比較

對照組、老化部組、增生部組、浸潤部組相比，TSG-6蛋白表達量依次降低，差異有統(tǒng)計學意義（

P

＜0.05），CXCL8蛋白表達量依次升高，差異有統(tǒng)計學意義（

P

＜0.05），見表2。

表2 瘢痕疙瘩25例與外傷手術17例皮膚組織TGS-6蛋白、CXCL8蛋白表達量比較/±s

2.3 四組皮膚組織凋亡相關蛋白表達量比較

對照組、老化部組、增生部組、浸潤部組相比，Smac、Caspase-3、P53表達量依次降低，差異有統(tǒng)計學意義（

P

＜0.05），Bcl-2、Livin表達量依次升高，差異有統(tǒng)計學意義（

P

＜0.05），見表3。

表3 瘢痕疙瘩25例與外傷手術17例皮膚組織凋亡相關蛋白表達量比較/（ng/mL，±s）

2.4 四組皮膚組織膠原代謝相關蛋白表達量比較

對照組、老化部組、增生部組、浸潤部組相比，TGF-β1、COL-1、MMP-2表達量依次升高，差異有統(tǒng)計學意義（

P

＜0.05），IGF-1表達量依次降低，差異有統(tǒng)計學意義（

P

＜0.05），見表4。

表4 瘢痕疙瘩25例與外傷手術17例皮膚組織膠原代謝相關蛋白表達量比較/（ng/mL，±s）

2.5 瘢痕疙瘩病人TGS-6蛋白、CXCL8蛋白與凋亡相關蛋白表達量的相關性分析

Pearson相關分析顯示，瘢痕疙瘩病人TGS-6蛋白表達量與Bcl-2、Livin均呈負相關，與Smac、Caspase-3、P53均呈正相關（均

P

＜0.05）；CXCL8蛋白表達量與Bcl-2、Livin均呈正相關，與Smac、Caspase-3、P53均呈負相關（均

P

＜0.05），見表5。

表5 TGS-6蛋白、CXCL8蛋白與凋亡相關蛋白表達量的相關性分析

2.6 瘢痕疙瘩病人TGS-6蛋白、CXCL8蛋白與膠原代謝相關蛋白表達量的相關性分析

根據(jù)表6的Pearson相關分析顯示，瘢痕疙瘩病人TGS-6蛋白表達量與TGF-β1、COL-1、MMP-2均呈負相關（

P

＜0.05），與IGF-1呈正相關（

P

＜0.05）；CXCL8蛋白表達量與TGF-β1、COL-1、MMP-2均呈正相關（

P

＜0.05），與IGF-1呈負相關（

P

＜0.05）。

表6 TGS-6蛋白、CXCL8蛋白與膠原代謝相關蛋白表達量的相關性分析

3 討論

瘢痕的形成是傷口愈合的自然結(jié)果，然而成纖維細胞過度分泌細胞外基質(zhì)時，可導致瘢痕疙瘩的發(fā)生。組織學研究已經(jīng)表明，膠原等細胞外基質(zhì)主要由成纖維細胞合成和分泌，成纖維細胞在參與受損組織修復，形成瘢痕過程中發(fā)揮重要作用。因此，抑制成纖維細胞增殖或誘導成纖維細胞凋亡是瘢痕疙瘩治療的關鍵。

TSG-6可以抑制膠原Ⅰ、Ⅱ合成，誘導成纖維細胞凋亡，減輕瘢痕病情，已被證實與瘢痕形成密切相關。有研究發(fā)現(xiàn)，病理性瘢痕組織中TSG-6呈低表達，發(fā)揮著減少細胞凋亡，促進膠原合成代謝的作用。CXCL8能夠調(diào)節(jié)細胞外基質(zhì)的合成以及細胞的增殖與凋亡，在瘢痕疙瘩發(fā)生中起到促進作用。林苗苗等通過體外實驗發(fā)現(xiàn)，抑制瘢痕疙瘩成纖維細胞的增殖，CXCL8表達降低，CXCL8與瘢痕疙瘩的形成關系密切。本研究發(fā)現(xiàn)對照組、老化部組、增生部組、浸潤部組相比，TSG-6蛋白表達量依次降低，CXCL8蛋白表達量依次升高，差異有統(tǒng)計學意義。提示TSG-6、CXCL8可能參與瘢痕疙瘩的形成與發(fā)展，對應了瘢痕疙瘩呈浸潤式的生長方式。

Bcl-2、Smac、caspase-3、Livin、p53等具有調(diào)控細胞凋亡的重要作用。瘢痕疙瘩病人經(jīng)過治療，成纖維細胞增殖受到抑制，抗凋亡蛋白Bcl-2表達降低，細胞增殖抑制因子P53表達升高，發(fā)揮抑制細胞增殖作用。張遠貴等研究了瘢痕疙瘩組織中Smac、caspase-3、Livin的表達，發(fā)現(xiàn)與正常組織相比，瘢痕疙瘩組織Smac、caspase-3表達較低，Livin表達較高，筆者分析凋亡抑制因子Livin基因的高表達可能對促凋亡因子Smac、caspase-3基因的表達產(chǎn)生了抑制作用，使得細胞凋亡作用弱于增殖作用，導致了瘢痕疙瘩的形成。本研究發(fā)現(xiàn)對照組、老化部組、增生部組、浸潤部組相比，細胞凋亡相關蛋白Smac、Caspase-3、P53表達量均依次降低，Bcl-2、Livin均依次升高，提示細胞凋亡蛋白在瘢痕形成與發(fā)展中發(fā)揮重要作用。

細胞外基質(zhì)膠原蛋白的合成和降解失衡是瘢痕疙瘩的重要形成原因。TGF-β1、COL-I、MMP-2、IGF-1表達可以反映膠原代謝變化，瘢痕疙瘩病人瘢痕組織中，COL-1過度沉積，是瘢痕組織的物質(zhì)基礎。TGF-β1在瘢痕疙瘩組織中表達上調(diào)，促進真皮成纖維細胞增殖、膠原形成及分化，也對MMP-2表達有促進作用。IGF-1對膠原蛋白的合成具有一定抑制作用，在病理性瘢痕中呈現(xiàn)低表達。本研究發(fā)現(xiàn)對照組、老化部組、增生部組、浸潤部組相比，膠原代謝相關蛋白IGF-1表達量依次降低，TGF-β1、COL-1、MMP-2表達量均依次升高，提示膠原蛋白可能參與瘢痕疙瘩的形成與發(fā)展。Pearson相關分析顯示，瘢痕疙瘩病人TGS-6蛋白表達量與Bcl-2、Livin、TGF-β1、COL-1、MMP-2均呈負相關，與Smac、Caspase-3、P53、IGF-1均呈正相關，提示TGS-6可能通過影響瘢痕疙瘩組織中凋亡抑制因子、膠原合成因子及促進促凋亡因子、膠原代謝因子表達，參與瘢痕疙瘩病理進程，或可為瘢痕治療提供參考依據(jù)。CXCL8蛋白表達量與Bcl-2、Livin、TGF-β1、COL-1、MMP-2均呈正相關，與Smac、Caspase-3、P53、IGF-1均呈負相關，推測CXCL8可能通過調(diào)控纖維細胞凋亡、膠原合成與代謝，參與瘢痕疙瘩的發(fā)生發(fā)展。

綜上所述，對照組、老化部、增生部、浸潤部皮膚組織中TSG-6蛋白表達量依次降低，CXCL8蛋白表達量依次升高，可能通過調(diào)節(jié)細胞增殖、凋亡及膠原蛋白合成、代謝，影響瘢痕疙瘩浸潤式生長，參與瘢痕疙瘩的發(fā)生發(fā)展。但本文也存在不足之處，對瘢痕疙瘩病人進行手術切除聯(lián)合放射性療法治療的預后情況并未進行后續(xù)分析，另外TSG-6、CXCL8對瘢痕疙瘩影響的具體機制也尚需進一步深入研究，這將是以后的研究重點。