彭文婧，張 紅

（1首都醫(yī)科大學(xué)石景山教學(xué)醫(yī)院<北京市石景山醫(yī)院>兒科 北京 100043）

（2北京順義區(qū)婦幼保健院兒科 北京 101300）

隨著醫(yī)療技術(shù)的進(jìn)步，醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室在做出實(shí)驗(yàn)決定時(shí)通常會(huì)使用自動(dòng)化的多元分析來測試血液樣本。但是，此方法在確定異型淋巴細(xì)胞時(shí)會(huì)產(chǎn)生錯(cuò)誤。因此，在對血液病患者或發(fā)熱性疾病患者的細(xì)胞形態(tài)進(jìn)行觀察時(shí)，應(yīng)結(jié)合手工推片的方法，異型淋巴細(xì)胞是臨床試驗(yàn)中非常重要的參考項(xiàng)目[1]。EB病毒感染是患者傳染性單核細(xì)胞增多癥病的主要原因。患者最初具有許多臨床癥狀，但沒有明顯的癥狀，這使診斷變得困難。這項(xiàng)研究討論了患者傳染性單核細(xì)胞增多癥中異型淋巴細(xì)胞和EB濃度之間關(guān)系的研究。結(jié)果如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

2018年2月—2020年8月，選擇本院65例傳染性單核細(xì)胞增多癥患者。男42例，女23例。患者年齡為6～15歲，平均（8.68±1.95）歲。把患者按照異型淋巴細(xì)胞數(shù)量分成A、B、C、D、E五組。其中A組中有4名患者，異型淋巴細(xì)胞數(shù)量為1%～5%；B組有9位患者，異型淋巴細(xì)胞數(shù)量為6%～10%；C組有13例患者，異型淋巴細(xì)胞數(shù)量為11%～15%；D組有17例患者，異型淋巴細(xì)胞數(shù)量為16%～20%；E組有22例患者，異型淋巴細(xì)胞數(shù)量為20%以上。幾組患者年齡、性別等一般資料比較均差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合《臨床血液學(xué)與檢驗(yàn)》中兒童IM臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)；均經(jīng)過明確異淋及EB載量檢測。排除標(biāo)準(zhǔn)：篩選排除傳單診斷依據(jù)不充足的兒童，篩選排除并存細(xì)菌感染、支原體感染、噬血細(xì)胞綜合征、免疫缺陷的傳單兒童。

1.2 方法

1.2.1傳染性單核細(xì)胞增多癥患者的臨床表現(xiàn) 在65例患者中，有52例發(fā)燒，48例有淋巴結(jié)腫大，50例有喉嚨痛，33例有肝脾腫大現(xiàn)象，14例有皮疹癥狀。還有水腫27例。

1.2.2傳染性單核細(xì)胞增多癥患者的實(shí)驗(yàn)室檢查 定期的血液檢查發(fā)現(xiàn)，65例患者的白細(xì)胞計(jì)數(shù)水平為（12～34）×109/L。其中，17例白細(xì)胞計(jì)數(shù)水平低于20×109/L。48例白細(xì)胞計(jì)數(shù)等于或超過20×109/L。患者的異型淋巴細(xì)胞數(shù)量的3%～58%。根據(jù)異型淋巴細(xì)胞數(shù)量分組，A組中的4例患者，從1%～5%；B組中的9例患者，從6%～10%；C組中的13例患者，異型淋巴細(xì)胞數(shù)量為11%～15%；D組中17例患者的比例為16%～20%。E組中有22例患者異型淋巴細(xì)胞的比例為20%以上。

所有患者入院后均接受血液檢查。從患者的靜脈中抽取2 mL血液樣品后，將樣品用EDTA作為抗凝劑處理，并送至實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行分析。除血液樣本外，還將分離出的淋巴細(xì)胞溶液添加到淋巴細(xì)胞懸浮液中，將50μLDNAμL添加到樣本管中，混合均勻，倒入沸水中10 min，然后將樣本突然升至4℃。第二天，將樣本放入離心機(jī)并離心，離心后取出離心機(jī)樣品并儲(chǔ)存在-20℃環(huán)境下。分別稀釋成1×102cop異型淋巴細(xì)胞數(shù)量/μL、1×103cop異型淋巴細(xì)胞數(shù)量/μL、1×104cop異型淋巴細(xì)胞數(shù)量/μL和1×105cop異型淋巴細(xì)胞數(shù)量/μL，4種，將該標(biāo)準(zhǔn)物保持在-20℃環(huán)境下[4]。此后，對5μL樣品進(jìn)行熒光PCR。根據(jù)容器選擇0.2 mL離心管，并根據(jù)相關(guān)要求確定合適的分批條件。在94℃下變性1 min，然后在72℃下延長處理1 min。在55℃下退火處理1 min。上循環(huán)執(zhí)行30次。反應(yīng)過程完成后，自動(dòng)記錄數(shù)據(jù)，校正熒光值并記錄結(jié)果。相關(guān)系數(shù)為r＞0.98，并且該陰性質(zhì)控品未出現(xiàn)任何數(shù)值。之后，根據(jù)記錄器的記錄結(jié)果，將自動(dòng)檢查并計(jì)數(shù)以確定樣本中的病毒數(shù)量[5]。

1.3 觀察指標(biāo)

本次研究主要的觀察指標(biāo)是各組患者的EB濃度。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。正態(tài)分布的計(jì)量資料采用（±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用頻數(shù)和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 傳染性單核細(xì)胞增多癥患者的治療與預(yù)后

患者接受青霉素G治療1周，并肌肉注射100萬單位α-ITF，持續(xù)5 d。服藥并注意其他患者的癥狀。治療后，檢查患者的血象。所有患者的血象均正常，均順利治愈并出院。

2.2 患者的異型淋巴細(xì)胞數(shù)量和EB病毒濃度的關(guān)系

實(shí)驗(yàn)室測試結(jié)果表明，傳染性單核細(xì)胞增多癥的形成與異型淋巴細(xì)胞的數(shù)目之間存在一定的正相關(guān)性?；颊咧挟愋土馨图?xì)胞的數(shù)目在一定程度上增加，EB病毒的濃度也在增加，見表1。

表1 患者異型淋巴細(xì)胞數(shù)目與EB濃度統(tǒng)計(jì)（傳染性單核細(xì)胞增多癥±s）

表1 患者異型淋巴細(xì)胞數(shù)目與EB濃度統(tǒng)計(jì)（傳染性單核細(xì)胞增多癥±s）

注：EB病毒濃度與異型淋巴細(xì)胞的數(shù)目有正相關(guān)關(guān)系。

組別 例數(shù) 異型淋巴/% EB病毒濃度/images/BZ_37_1351_1170_1373_1213.png±s A組 4 1～5 2.8±1.27 B組 9 6～10 3.3±1.36 C組 13 11～15 4.7±1.26 D組 17 16～20 5.1±1.28 E組 22 ＞20 6.3±1.34 cP值 - - ＜0.05

3.討論

實(shí)驗(yàn)分析表明，在大多數(shù)患者中，傳染性單核細(xì)胞增多癥男性超過10%，因此EB病毒是診斷患者的重要標(biāo)準(zhǔn)。隨著患者數(shù)量的增加，EB病毒濃度也增加。由于EB病毒感染，單核-巨噬細(xì)胞出現(xiàn)明顯增生現(xiàn)象[6-7]。同時(shí)，EB病毒會(huì)改變B細(xì)胞的表面，產(chǎn)生新的抗原性物質(zhì)，從而產(chǎn)生并激活具有相同相互作用活性的B細(xì)胞和T細(xì)胞。B細(xì)胞和T細(xì)胞會(huì)在患者體內(nèi)降低，并產(chǎn)生大量異型淋巴細(xì)胞，如果不完全了解異型淋巴細(xì)胞的相應(yīng)屬性，則很可能會(huì)造成誤診的后果。傳染性單核細(xì)胞增多癥通常在患者發(fā)病后的第三天出現(xiàn)在患者體內(nèi)，其數(shù)量在患病后一周內(nèi)增加，并且這種增加在2～3周內(nèi)可達(dá)到約40%[8]。因此，在重新診斷患者時(shí)，應(yīng)廣泛考慮患者出現(xiàn)的臨床癥狀，并應(yīng)使用異型淋巴細(xì)胞值和用于確定患者狀況的相應(yīng)功能。在這項(xiàng)研究中，發(fā)現(xiàn)當(dāng)患者的EB濃度增加時(shí)，身體的異型淋巴細(xì)胞數(shù)量也會(huì)增加。它可以用作患者診斷的重要參考指南。因此，通過定義患者異型淋巴細(xì)胞，可以清楚地定義患者傳染性單核細(xì)胞增多癥數(shù)目[9]。

值得注意的是異型淋巴細(xì)胞也會(huì)引起其他病毒感染。例如，在感染了巨細(xì)胞病毒，變種病毒和登革熱病毒的患者的血液涂片中均發(fā)現(xiàn)了異型淋巴細(xì)胞。這使得更加難以診斷IM。如果檢查者無法識(shí)別異型淋巴細(xì)胞?；蛘?，沒有足夠的嚴(yán)格測試來查明可能導(dǎo)致誤診異常淋巴細(xì)胞的數(shù)量。當(dāng)今醫(yī)院中的主要篩檢驗(yàn)統(tǒng)越來越多地實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化，人工分片已嚴(yán)重缺乏。這是漏報(bào)異型淋巴細(xì)胞的主要原因。為此原因，異型淋巴細(xì)胞檢測需要改進(jìn)，必要時(shí)應(yīng)進(jìn)行其他檢驗(yàn)。同時(shí)，實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)有望增加研究，應(yīng)用新的診斷技術(shù)。提高異型淋巴細(xì)胞判斷的準(zhǔn)確性，確保IM能夠及時(shí)地確診[10]。

綜上所述，本文對2018年2月—2020年8月在石景山醫(yī)院接受治療的65例傳染性單核細(xì)胞增多癥病患者分成了5組探討傳染性單核細(xì)胞增多癥患者的異型淋巴細(xì)胞數(shù)量與EB病毒濃度之間的相關(guān)性，實(shí)驗(yàn)室測試結(jié)果表明，傳染性單核細(xì)胞增多癥的形成與異型淋巴細(xì)胞的數(shù)目之間存在一定的相關(guān)性。患者中異型淋巴細(xì)胞的數(shù)目在一定程度上增加，EB病毒的濃度也在隨之增加。