田岳飏 高會霞 孫 倩 李硯峰 張 志

石家莊市第五醫(yī)院檢驗科，河北石家莊 050021

布魯菌是一種革蘭陰性桿菌及兼性胞內(nèi)菌，對人和動物都有極大危害。布魯菌病是由布魯氏菌引起的世界范圍內(nèi)最常見的人畜共患病之一[1]。雖然其在澳大利亞、新西蘭、日本、加拿大和部分歐洲國家在內(nèi)的一些發(fā)達國家已經(jīng)基本被消滅，但是在中東地區(qū)、地中海地區(qū)、非洲、拉丁美洲及亞洲部分地區(qū)依舊是重要的公共衛(wèi)生問題之一[2-4]。在我國，布魯菌病多見于內(nèi)蒙古、黑龍江、吉林、新疆等有較多放牧區(qū)域的地區(qū)。近年來，隨著中國畜牧業(yè)的快速發(fā)展，布魯菌病的發(fā)病率也在快速上升，逐漸成為重要公共衛(wèi)生問題之一[5]。本研究就布魯菌病的臨床特征開展描述性研究，旨在為布魯菌病的防治提供更多的理論借鑒。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016 年1 月—2018 年12 月石家莊市第五醫(yī)院收治219 例布魯菌病患者。納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)血清試管凝集試驗(SAT)和細菌血培養(yǎng)實驗確診布魯菌?。虎诰橥?。排除標(biāo)準(zhǔn)：①自身存在免疫性疾病。按不同年齡段[6-8]分為＜20 歲、20～＜40 歲、40～60 歲和＞60 歲組，四組例數(shù)分別為9、43、105 和62 例。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)

SAT：將患者血清標(biāo)本均分成5 份，分別放到5 個試管中，進行稀釋后分別加入0.5 mL 的試管凝集抗原。分別測量這5 個試管中血清標(biāo)本的比濁度，據(jù)此判定檢測結(jié)果。當(dāng)血清標(biāo)本的抗血清效價在1∶100以上時，即可判定該血清標(biāo)本SAT 的結(jié)果為陽性[9]。SAT 為我國布魯菌病早期診斷的法定正式試驗[10]。

細菌血培養(yǎng)較血清學(xué)檢查更為準(zhǔn)確和可靠，血培養(yǎng)方法為將采集的血液注入法國生物梅里埃Bact/Alert 120 血培養(yǎng)儀專用中和培養(yǎng)瓶內(nèi)進行培養(yǎng)。當(dāng)培養(yǎng)瓶陽性報警后，用注射器抽取瓶內(nèi)培養(yǎng)物制備涂片并進行革蘭染色鏡檢，然后轉(zhuǎn)種血瓊脂平板，置于35℃、6% CO2恒溫箱中培養(yǎng)。血培養(yǎng)陽性對無明顯接觸史、臨床癥狀不典型、誤診和漏診的布魯菌病患者的確診極其重要[11]。

1.3 觀察指標(biāo)

收集記錄四組生理生化檢測結(jié)果[C 反應(yīng)蛋白(CRP)和T 細胞亞群檢測]及并發(fā)癥發(fā)生情況等。T 細胞亞群主要包括CD3+T 細胞、CD4+T 細胞和CD8+T 細胞。并發(fā)癥：肝臟疾病(肝炎、肝功損傷、慢性乙型肝炎、非酒精性脂肪肝)、高血壓、睪丸炎、腰椎骨質(zhì)增生、椎間盤突出和肺部感染，均由臨床醫(yī)師確診。

1.4 檢測方法與判定標(biāo)準(zhǔn)

CRP：入院后，清晨空腹采血2～3 mL，置于含促凝劑的白色真空管中。采用日立7600 全自動生化分析儀進行分析。CRP＞10 mg/L 為異常。T 細胞亞群：入院后，清晨空腹全血2～3 mL，置于不含促凝劑的真空管中。采用直接熒光免疫法，取一只BD 淋巴細胞亞群絕對計數(shù)管，加入CD4/CD8/CD3試劑各10 μL；反向加樣法加入待測全血50 μL，渦旋混勻，室溫避光孵育20 min；采用反向加樣法加入10 倍稀釋后的溶血素450 μL，渦旋混勻，室溫避光孵育15 min；通過BD FACSCanto Ⅱ流式細胞儀進行檢測。CD3+T 細胞＜0.56%或＞0.76%為異常；CD4+T 細 胞＜0.38%或＞0.52%為異常；CD8+T 細胞＜0.22%或＞0.32%為異常。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 22.0 對所得數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)分析，計數(shù)資料采用例數(shù)和百分率表示，多組間整體比較采用Fisher 確切概率或χ2檢驗，兩兩比較采用Bonferroni方法校正。以P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 四組T 細胞亞群及CRP 檢測結(jié)果比較

四組CD3+T 細胞、CD4+T 細胞、CRP 異常率比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均P ＜0.05)，CD8+T 細胞異常率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P ＞0.05)。進一步兩兩比較，＞60 歲組CD3+T 細胞異常率低于40～60 歲組，40～60 歲組CD4+T 細胞異常率低于20～＜40、＞60 歲組，20～＜40 歲組CRP 異常率低于40～60 歲、＞60 歲組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均P ＜0.008)。見表1。

表1 四組T 細胞亞群及CRP 檢測結(jié)果比較[例(%)]

2.2 四組并發(fā)癥發(fā)生情況比較

四組肝臟疾病、睪丸炎、腰椎骨質(zhì)增生和肺部感染比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均P ＜0.05)，椎間盤突出和高血壓發(fā)生率比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(均P ＞0.05)。進一步兩兩比較，＞60 歲組肝臟疾病、睪丸炎發(fā)生率高于20～＜40 歲、40～60 歲組，腰椎骨質(zhì)增發(fā)生率高于＜20 歲、20～＜40 歲、40～60 歲組，20～＜40 歲、40～60 歲組肺部感染發(fā)生率均低于＜20 歲組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均P ＜0.008)。見表2。

表2 四組并發(fā)癥發(fā)生情況比較[例(%)]

3 討論

布魯菌病是由布魯菌引起的動物源性傳染病，其分布范圍遍布世界，雖病死率較低，但是仍然是一種嚴重的人畜共患病[12]。布魯菌病近年來在我國發(fā)病呈上升趨勢，這可能與大力發(fā)展農(nóng)村經(jīng)濟使畜牧業(yè)相較之前得到了更大發(fā)展有關(guān)[13]。隨著農(nóng)村養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，牛奶成了常用食品，同時城鎮(zhèn)家庭養(yǎng)寵物者增多，均可能與布魯菌病發(fā)病率升高有關(guān)，也與發(fā)病人群及發(fā)病季節(jié)性變異有關(guān)[14]。目前其流行形式以多發(fā)、分散的點狀流行代替大規(guī)模的流行，除職業(yè)人群外，老年、青少年亦有流行[15-16]。故應(yīng)加強對民眾衛(wèi)生知識的普及，提高人們的防病意識和環(huán)保意識。

布魯菌作為一種胞內(nèi)菌，自皮膚或黏膜侵入人體后，在吞噬細胞內(nèi)生長繁殖形成局部原發(fā)病灶，當(dāng)繁殖到了一定程度會使細胞破裂，進入淋巴和血液循環(huán)中繼續(xù)生長、繁殖，直至遍布全身[17-18]。布魯菌一旦死亡破裂，會向人體釋放內(nèi)毒素，造成菌血癥，引起人體發(fā)熱及一些其他的癥狀，此時就會觸發(fā)機體的免疫變態(tài)反應(yīng)來應(yīng)對[19]。而T 細胞亞群是一個判斷機體免疫水平的重要指標(biāo)。T 細胞亞群的檢測結(jié)果可以為判斷布魯菌病患者的免疫狀況提供依據(jù)[20]。通過孫嵩[21]的研究可知，CRP 屬于炎癥反應(yīng)的一種非特異性標(biāo)志物，CRP 的高低是對機體感染程度的直接反映，與本研究結(jié)果一致，提示在對布魯菌病進行診治時，可將CRP 作為一項判斷布魯菌病患者機體炎癥嚴重程度的輔助指標(biāo)。

布魯菌病臨床癥狀和實驗室特征多變，并且可以模仿其他傳染性和非傳染性的疾病，對準(zhǔn)確診斷造成了不小的干擾?；颊叩呐R床癥狀表現(xiàn)廣泛，包括發(fā)熱、頭痛、乏力、關(guān)節(jié)疼痛等。其中，最常見的癥狀為發(fā)熱和乏力，其次為多汗、體虛和肌肉酸痛[22]。布魯菌病還經(jīng)常導(dǎo)致全身性感染，若不及時治療則會轉(zhuǎn)化為慢性疾病，反復(fù)發(fā)病?；颊甙l(fā)病時常伴隨一些并發(fā)癥，常見的有關(guān)節(jié)炎、脊柱炎、睪丸炎等[23]。根據(jù)本研究結(jié)果，提示在面對布魯菌病患者時，臨床醫(yī)師應(yīng)注意患者并發(fā)癥的發(fā)生，尤其是20 歲以下患者發(fā)生肺部感染，60 歲以上患者發(fā)生肝臟疾病、睪丸炎和腰椎骨質(zhì)增生的可能。

本研究仍有一定的局限性，如收集資料的區(qū)域相對較小，但是相對集中的區(qū)域能代表當(dāng)?shù)匦l(wèi)生學(xué)水平，結(jié)果也具有可靠性。但結(jié)論的推廣仍需要進一步規(guī)模更大的流行病學(xué)調(diào)查研究。