楊坤祥 黃彬

手足口?。╤and-foot-mouth disease，HFMD）是由腸道病毒（Enterovirus，EV）感染引起的一種兒童傳染病［1］。2008年5月，衛(wèi)生部將手足口病納入法定報(bào)告的丙類傳染?。?］。引起手足口病的主要腸道病毒類型有腸道病毒71 型（Enterovirus71，EV71）、柯薩奇病毒A 組6 型、10 型和16 型（Cox-sackievirusA，CA6，CA10，CA16）等，而EV71 是近年來引起嬰幼兒手足口病重癥和死亡的主要病原體［2］。目前對(duì)EV71 感染尚缺乏有效抗病毒藥物，預(yù)防性疫苗接種是控制EV71 感染引起手足口病最有效的方法［3］。2016年底惠州市正式啟動(dòng)EV71 滅活疫苗接種。本研究通過分析惠州市近五年的手足口病發(fā)病率和EV71 疫苗接種率，結(jié)合本院EV71 疫苗接種前后時(shí)間段的手足口病病例的病原學(xué)特征，初步了解EV71 疫苗接種對(duì)手足口病流行的影響，為制定疫苗接種策略提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 病例來源

①手足口病發(fā)病資料：惠州市各級(jí)醫(yī)療機(jī)構(gòu)通過“中國(guó)疾病監(jiān)測(cè)報(bào)告信息系統(tǒng)”報(bào)告的2014～2018年全市手足口病病例資料；②EV71 滅活疫苗接種資料從“中國(guó)免疫規(guī)劃信息管理系統(tǒng)”中提取2017年1月至2018年12月廣東省惠州市每月報(bào)告的EV71 滅活疫苗接種情況報(bào)表資料；③2014年1月至2018年12月五年間本院手足口病專科收治的4 692 例手足口病住院患兒，根據(jù)廣東省醫(yī)療機(jī)構(gòu)病案統(tǒng)計(jì)管理系統(tǒng)的住院病案首頁的診斷，病例分型為“危重”的劃分為“重癥組”；病例分型為“一般”的劃分為“輕癥組”；根據(jù)接種時(shí)間段分為疫苗接種前（2014年至2016年）和疫苗接種后（2017年至2018年）。

1.2 EV71 疫苗接種率估算方法

根據(jù)疫苗接種報(bào)表資料中的EV71 疫苗接種劑次數(shù)，假設(shè)平均接種劑次為兩劑，將報(bào)告接種劑次數(shù)（n）除以2，得到報(bào)告接種數(shù)（a）；然后用報(bào)告接種數(shù)除以6月齡～5 歲兒童應(yīng)接種人數(shù)（b），得到估算接種率（f）。估算公式為：a=n/2，f=a/b。

1.3 標(biāo)本采集

腸道病毒核酸檢測(cè)標(biāo)本為入院24 h 內(nèi)采集的患兒肛拭子標(biāo)本。常規(guī)消毒后采用無菌聚酯纖維塑料柄拭子插入患兒肛門2～3 cm，自肛門周圍皺襞處拭取，或在肛門內(nèi)輕輕旋轉(zhuǎn)涂擦，然后立即將拭子裝入加有1 mL 生理鹽水的無菌拭子采集管中。

1.4 儀器和方法

儀器為ABI 7500 型實(shí)時(shí)熒光定量PCR 基因擴(kuò)增儀（ABI，美國(guó)）；腸道病毒核酸檢測(cè)系列試劑盒（EV71 型、CAl6 型、通用腸道病毒型）由中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司提供。

1.5 病毒核酸提取和熒光定量PCR 檢測(cè)

樣本核酸提取采用中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司生產(chǎn)的核酸提取試劑盒（離心柱法），具體操作步驟和完全按照試劑盒說明書指引進(jìn)行。擴(kuò)增反應(yīng)體系和結(jié)果判讀按照腸道病毒EV71/CA16/EVs 核酸檢測(cè)系列試劑盒說明書操作和設(shè)置，每次試驗(yàn)均檢測(cè)空白對(duì)照、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品，滿足質(zhì)量控制要求時(shí)才進(jìn)行檢測(cè)結(jié)果的判定。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

應(yīng)用SPSS 20.0 軟件進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料用n（%）表示，不同腸道病毒和不同年份間的比較采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 手足口病發(fā)病率

2014 至2018年惠州市手足口病每年報(bào)告發(fā)病人數(shù)分別為29 590、28 160、26 397、28 961 和22 859例，發(fā)病率分別為636/10 萬、601/10 萬、556/10 萬、607/10 萬和479/10 萬。見圖1。

圖1 2014～2018年惠州市手足口病發(fā)病率情況Figure 1 The incidence of HFMD from 2014 to 2018 in Huizhou

2.2 EV71 疫苗估算接種率

2017年1 至12月，惠州市共報(bào)告EV71 疫苗接種劑次數(shù)為78 896 人次，每百名兒童（6月齡～5 歲）接種劑次數(shù)為17.64 人次，估算接種率為8.82%。2018年1 至12月，惠州市共報(bào)告EV71 疫苗接種劑次數(shù)為130 675 人次，每百名兒童（6月齡～5 歲）接種劑次數(shù)為29.04 人次，估算接種率為14.52%。

2.3 EV71 疫苗接種前后腸道病毒的構(gòu)成比較

EV71 疫苗接種前后腸道病毒構(gòu)成情況和統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果見表1～2。

表1 EV71 疫苗接種前后腸道病毒構(gòu)成情況［n（%）］Table 1 Enterovirus composition before and after EV71 vaccination［n（%）］

3 討論

EV71 滅活疫苗作為我國(guó)自主研發(fā)的疫苗，且生產(chǎn)企業(yè)有好幾家［4-5］，疫苗上市后的使用情況及對(duì)傳染病的防控效果值得我們高度關(guān)注。本研究顯示?；葜菔?014 至2017年的手足口病發(fā)病率每年均在500/10 萬以上。2018年發(fā)病率則降低一些，為479/10 萬，高于全國(guó)2008 至2017年年平均發(fā)病率（135/10 萬）［6］，也高于榆林地區(qū)2014 至2018年手足口病的年平均發(fā)病率（167/10 萬）［7］，比廣東省2016 至2017年的年發(fā)病水平也高（356/10 萬）［8］。說明惠州地區(qū)是手足口病的高發(fā)區(qū)，對(duì)腸道病毒的監(jiān)測(cè)和EV71 疫苗的接種非常有必要?；葜菔凶?016年底啟動(dòng)EV71 疫苗接種以來，2017年手足口病發(fā)病率并沒有下降，反而小幅度升高。原因可能跟2017年惠州市CA6 型腸道病毒大流行有關(guān)［9-10］。

表2 EV71 疫苗接種前后腸道病毒構(gòu)成情況統(tǒng)計(jì)學(xué)比較Table 2 Statistical comparison of Enterovirus composition before and after EV71 vaccination

本研究顯示，惠州市2017年的EV71 疫苗估算接種率僅為8.82%，低于廣東省2017年的平均接種率（10.07%）［11］，比深圳市（19.76%）［11］和中山市（14.49%）［11］等省內(nèi)城市都低，而汕頭市接種率僅為1.39%［11］，提示社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展水平和育兒觀念對(duì)第二類疫苗使用量有較大的影響［12］。到了2018年，惠州市的EV71 疫苗估算接種率上升到14.52%，較之前有較大幅度的提升，說明家長(zhǎng)們通過朋友或親戚同事有同齡小孩的交流發(fā)現(xiàn)，接種EV71 疫苗確實(shí)減少發(fā)病，從而對(duì)EV71 疫苗的接受程度逐漸增加［13］。增加對(duì)EV71 疫苗接種實(shí)例的宣傳，或者鼓勵(lì)接種過EV71 疫苗的兒童家長(zhǎng)向有需要的人群推薦可以提高EV71 疫苗的接種率。

本研究結(jié)果說明接種EV71 型滅活疫苗，有助于適齡兒童產(chǎn)生抗體而得到有效的保護(hù)，從而減少感染EV71 型腸道病毒引起的手足口病的發(fā)生。即使感染上EV71 型腸道病毒，也會(huì)因?yàn)榻臃N過疫苗產(chǎn)生抗體而使病情減輕，從而達(dá)到有效的防治。國(guó)內(nèi)的研究顯示［14-15］，接種兩次EV71 型滅活疫苗接種后28 d，檢測(cè)血清抗體陽轉(zhuǎn)率為88.1%～91.7%，對(duì)EV71 感染相關(guān)手足口病的保護(hù)效力達(dá)90%以上。所以EV71 型滅活疫苗的接種有效降低兒童EV71感染手足口病的發(fā)病率，尤其在減少手足口病的重癥及死亡病例方面具有非常重要的意義。由于腸道病毒各型別之間沒有交叉保護(hù)作用［16］，所以接種EV71 疫苗不能預(yù)防所有類型的手足口病，只對(duì)EV71 型手足口病有效，但能降低發(fā)病率和重癥率，是目前最經(jīng)濟(jì)、最有效的預(yù)防手段。

綜上所述，2014 至2018年惠州市手足口病發(fā)病率居高不下，EV71 疫苗接種率有待提高，EV71型滅活疫苗的接種能有效降低兒童EV71 感染手足口病的發(fā)病率。