李春花，雷萌桐，蔡進(jìn)忠，孫建，羅松格來 ，閆鴻斌， 賈萬忠

(1.青海大學(xué)畜牧獸醫(yī)科學(xué)院，西寧 810016；2.青海省玉樹州治多縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，治多 815499；3.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所 家畜疫病病原生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室國家動(dòng)物包蟲病專業(yè)實(shí)驗(yàn)室，蘭州 730046)

腸道寄生蟲病是犬常見的寄生蟲病之一，可引起犬營養(yǎng)不良、消瘦、貧血、胃腸道癥狀及神經(jīng)癥狀，重者可導(dǎo)致全身衰弱死亡[1]。我國北方牧區(qū)是細(xì)粒棘球絳蟲(Echinococcusgranulosus)感染率較高的地區(qū)，尤其是青藏高原，由于受生產(chǎn)和生活方式、自然生態(tài)﹑生物因素及牧民文化水平等的影響，造成動(dòng)物和人畜間棘球蚴病的高度流行[1,2]，使棘球蚴病成為危害嚴(yán)重的人獸共患病地方病。藏犬是牧業(yè)區(qū)少數(shù)民族的朋友和其財(cái)產(chǎn)及牛羊的衛(wèi)士，與牧民的生產(chǎn)、生活休戚相關(guān)。我省牧業(yè)區(qū)目前有牧羊藏犬約92萬只，此外有野犬和其它犬類及數(shù)量眾多的狼、狐貍等食肉動(dòng)物存在。藏犬絳蟲病是牧區(qū)的常見多發(fā)病，由于復(fù)雜的循環(huán)生態(tài)鏈的構(gòu)成，形成了絳蟲和絳蟲蚴病在人、畜和野生動(dòng)物間感染的普遍性，給防控與凈化帶來了困難[3]。

隨著我國經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，人民生活水平的提高，養(yǎng)犬成為一種新的生活時(shí)尚，發(fā)展迅速。因此，我國對(duì)犬類疫病的研究越來越受到重視。目前，對(duì)犬細(xì)粒棘球絳蟲的調(diào)查較多，應(yīng)用吡喹酮片劑防治的方法也較為成熟[8-10]，但存在對(duì)牧區(qū)藏犬用藥不便的難題。因此，采用綜合防控技術(shù)措施是防治藏區(qū)犬及傳播病的有效手段，其中，選用有效藥物及其適用劑型是取得良好防治效果的關(guān)鍵。為了優(yōu)化給藥途徑，提高驅(qū)蟲效果，我們研制了吡喹酮澆潑劑，進(jìn)而做了驅(qū)除藏犬腸道絳蟲的臨床試驗(yàn)與示范應(yīng)用。

1 材料與方法

1.1試驗(yàn)藥物

氫溴酸檳榔堿粉劑，類白色粉末，由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所提供；吡喹酮澆潑劑，青海大學(xué)畜牧獸醫(yī)科學(xué)院研制，每1mL含吡喹酮5mg;吡喹酮片劑，商品名血蟲凈，青海九梁農(nóng)牧科技有限公司生產(chǎn)，每片含吡喹酮100mg;犬細(xì)粒棘球絳蟲抗原檢測(cè)試劑盒，批號(hào)20151119、20160222、20160928、20180309，深圳市康百得生物科技有限公司生產(chǎn)。

1.2試驗(yàn)動(dòng)物

2016年4月，在玉樹州治多縣加吉博洛鎮(zhèn)，對(duì)未使用任何抗寄生蟲藥物的34只藏犬(其中14只平時(shí)未拴養(yǎng))，每只犬采集新鮮糞便約5g帶回實(shí)驗(yàn)室，置-80℃冰箱冷凍9d，采用ELISA法檢測(cè)犬糞便棘球絳蟲蟲體抗原，按操作步驟檢查犬棘球絳蟲糞抗原[3]。

1.3驅(qū)蟲試驗(yàn)

1.3.1分組 將34只犬按戶編為3組。其中第1組11只，為吡喹酮片劑5mg/kg劑量試驗(yàn)組；第2組12只，為吡喹酮澆潑劑10mg/kg劑量試驗(yàn)組；第3組11只，為陽性對(duì)照組。

1.3.2給藥 在試驗(yàn)前逐只稱重、記錄，第1組按5mg/kg體重劑量將吡喹酮片劑藥片包于肉片中給藥；第2組按10mg/kg體重劑量將吡喹酮澆潑劑用無針頭注射器吸取藥液沿犬背中線澆潑于皮膚；第3組對(duì)照犬不給藥。

1.3.3效果檢查 在給藥后第7d，先采集犬糞便，采用ELISA法檢測(cè)犬糞便中細(xì)粒棘球絳蟲蟲體抗原。然后采用氫溴酸檳榔堿瀉下法再進(jìn)行對(duì)犬細(xì)粒棘球絳蟲的驅(qū)除效果檢查，給藥后40～60min，收集被檢犬排出的糞便，用5%的甲醛溶液浸泡沉淀后棄去上清液，漂洗檢蟲，收集蟲體，計(jì)數(shù)統(tǒng)計(jì)。

1.4示范應(yīng)用效果檢查

2017～2019年應(yīng)用吡喹酮澆潑劑按10mg/kg劑量給藥，進(jìn)行驅(qū)蟲示范。給藥后7d采集犬糞樣，采用ELISA法進(jìn)行犬糞便抗原檢測(cè)，評(píng)價(jià)示范驅(qū)蟲效果。

1.5療效判斷

按常規(guī)方法計(jì)算驅(qū)凈率和粗計(jì)驅(qū)蟲率。

驅(qū)凈率=驅(qū)凈蟲體的動(dòng)物數(shù)/全部試驗(yàn)動(dòng)物數(shù)×100%

粗記驅(qū)蟲率=對(duì)照組平均殘留蟲體數(shù)-試驗(yàn)組平均殘留蟲體數(shù)/對(duì)照組平均殘留蟲體數(shù)×100%

1.6藥物反應(yīng)觀察

用藥后主要觀察試驗(yàn)犬的精神、食欲、糞便等變化情況，連續(xù)觀察12d。

2 結(jié)果

2.1給藥前糞抗原檢測(cè)結(jié)果

共檢測(cè)藏犬307只，檢出陽性34只，陽性率11.07%。ELISA法糞細(xì)粒棘球絳蟲蟲體抗原檢測(cè)結(jié)果及分組情況見表1。

表1 給藥前犬糞抗原ELISA法檢測(cè)結(jié)果

2.2對(duì)藏犬細(xì)粒棘球絳蟲的驅(qū)蟲效果

給藥后7d，吡喹酮片劑、澆潑劑驅(qū)除藏犬棘球絳蟲糞抗原檢測(cè)結(jié)果見表2。從表中可見，吡喹酮片劑5mg/kg、澆潑劑10mg/kg劑量驅(qū)除犬細(xì)粒棘球絳蟲的轉(zhuǎn)陰率均達(dá)100.0%。

表2 各試驗(yàn)組藏犬糞抗原ELISA法檢測(cè)結(jié)果

給藥后7d，采用氫溴酸檳榔堿瀉下法檢查驅(qū)除效果，吡喹酮片劑、澆潑劑對(duì)犬細(xì)粒棘球絳蟲的驅(qū)蟲效果見表3。從表中可見，陽性對(duì)照組細(xì)粒棘球絳蟲檢出率72.73%(8/11)，平均感染強(qiáng)度3728.1條(583～9054)；吡喹酮片劑5mg/kg、澆潑劑10mg/kg劑量驅(qū)除犬細(xì)粒棘球絳蟲的驅(qū)凈率與驅(qū)蟲率均達(dá)100%。

表3 各試驗(yàn)組藏犬細(xì)粒棘球絳蟲檢查統(tǒng)計(jì)結(jié)果

2.3防治效果

應(yīng)用吡喹酮澆潑劑對(duì)犬3年的示范驅(qū)蟲檢測(cè)結(jié)果見表4。結(jié)果顯示對(duì)犬驅(qū)蟲效果佳。

表4 不同年份用藥后犬糞抗原檢測(cè)結(jié)果

2.4安全性觀察

試驗(yàn)犬的精神、食欲、糞便等未見異常反應(yīng)。

3 討論與小結(jié)

3.1吡喹酮(Praziquantel PZQ)是一種高效、廣譜的驅(qū)絳藥,對(duì)血吸蟲、絳蟲、囊蟲具有較好的驅(qū)蟲效果[8，9]。為改進(jìn)給藥途徑，提供防治效果，吡喹酮?jiǎng)┬偷难邪l(fā)也受到人們的關(guān)注[10]。犬是細(xì)粒棘球絳蟲的終末宿主,也是防控包蟲病的關(guān)鍵。

本次試驗(yàn)與示范應(yīng)用結(jié)果表明，吡喹酮片劑、澆潑劑試驗(yàn)劑量對(duì)藏犬細(xì)粒棘球絳蟲驅(qū)凈率、粗計(jì)驅(qū)蟲率均達(dá)100%。兩種劑型的使用方法比較，澆潑劑給藥法簡便，牧戶易掌握使用，而片劑給藥較為復(fù)雜，有時(shí)發(fā)生部分犬吐出藥片的情況，影響驅(qū)蟲效果。結(jié)果顯示應(yīng)用吡喹酮片劑5mg/kg、澆潑劑10mg/kg劑量驅(qū)除藏犬棘球絳蟲高效安全。

3.2安全性觀察結(jié)果表明，吡喹酮片劑、澆潑劑試驗(yàn)劑量組藏犬給藥后未發(fā)現(xiàn)異常反應(yīng)，安全性好。

3.3國內(nèi)外發(fā)達(dá)國家十分重視對(duì)寵物疾病的檢查和防治。在驅(qū)絳蟲藥物應(yīng)用上也有豐富的實(shí)驗(yàn)資料和臨床經(jīng)驗(yàn)[8-10]。犬、貓均為個(gè)體投藥，且藥物品種全面，美國、加拿大等國家約有30余種抗寄生蟲藥物用于犬、貓，代表了發(fā)達(dá)國家的防治現(xiàn)狀。國內(nèi)近幾年對(duì)寵物犬、貓寄生蟲病研究較多，對(duì)牧區(qū)犬細(xì)粒棘球絳蟲的調(diào)查及防治工作日趨重視。防治技術(shù)措施也較完善，關(guān)鍵是如何貫徹執(zhí)行，取得實(shí)效。

3.4在青藏高原地區(qū)，家養(yǎng)的和野生的棘球絳蟲終宿主和中間宿主動(dòng)物資源十分豐富，且相互之間存在捕食和被捕食的關(guān)系，使兩種棘球絳蟲生活史循環(huán)鏈的形成和延續(xù)具備了客觀條件，并且呈惡性循環(huán)狀態(tài)。加之廣大牧民及城鎮(zhèn)居民有養(yǎng)犬的習(xí)俗，從而造成人畜間棘球蚴病流行趨勢(shì)呈波動(dòng)狀。根據(jù)青海省的實(shí)際情況，依據(jù)流行因素及傳播的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，采取加強(qiáng)人的衛(wèi)生安全教育和犬只管理，應(yīng)用吡喹酮定期驅(qū)蟲，加強(qiáng)動(dòng)物檢疫，患病臟器無害化處理，對(duì)放牧家畜的免疫注射等綜合防控措施是必要的。