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        Hns對牡蠣機體超顯微結(jié)構(gòu)的影響研究

        2021-06-07 02:56:18邵躍
        水產(chǎn)養(yǎng)殖 2021年6期
        關(guān)鍵詞:生物

        邵躍

        (錦州市科學(xué)技術(shù)研究院,遼寧 錦州 121000)

        海洋污損生物主要類群包括藻類、水螅、龍介蟲、藤壺和海鞘等,具有代表意義的有牡蠣、紫貽貝等,它們會吸附在船舶、網(wǎng)箱、海底各種管道上,給生產(chǎn)和生活帶來一定的經(jīng)濟損失[1]。

        Hns(一種從植物中提取的毒性物質(zhì),其毒性和機理暫不清楚,暫稱Hns)對生物的不同組織細(xì)胞都有一定的毒害作用。一定濃度的Hns對生物脅迫一定時間后,會造成細(xì)胞核腫脹、核膜消失或脫落、線粒體腫脹、線粒體含量增多等亞顯微結(jié)構(gòu)的病理變化[2],嚴(yán)重時核膜消失,核降解,線粒體內(nèi)脊崩解,細(xì)胞膜系統(tǒng)空泡化,溶酶體增多,而后減少。這樣的變化會隨著試驗時間的延長而加劇,直到細(xì)胞枯萎死亡,說明Hns對牡蠣等海洋污損生物具有一定的防污作用。現(xiàn)通過研究Hns對牡蠣機體的超顯微結(jié)構(gòu)的影響,以了解Hns的毒性,進而確定Hns是否可成為新型低毒高效的防污試劑。

        1 研究方法

        1.1 試驗材料

        (1)生物。牡蠣,購自大連黃海海區(qū)黑石礁水產(chǎn)養(yǎng)殖場,殼長(8.0±0.5)cm,殼寬(6.0±0.5)cm,殼高(3.0±0.5)cm,洗去殼外污物。選取10枚大小均等的牡蠣在10 L水缸中馴化72 h,曝氣,每天更換1/2新鮮海水。

        (2)儀器。電子顯微鏡。

        (3)藥品。Hns(粗提物,由大連大學(xué)生物工程學(xué)院提供,母液10.000 g/L)。

        1.2 試驗方法

        將牡蠣在ρ(Hns)為32 mg/L的海水中暫養(yǎng)7 d,以備實驗用。取材時將貝殼打開,取外列鰓的中段,用生理鹽水反復(fù)清洗后,放入2.5%的戊二醛(0.1 mol/L的磷酸緩沖液配制,pH值7.2)中,4℃冰箱固定12 h;后于0.1 mol/L磷酸緩沖液(pH值7.2)中用超聲波清洗器震蕩0.5 min,用0.1 mol/L磷酸緩沖液(pH值7.2)反復(fù)沖洗3次,每次15 min;再放入1%鋨酸中固定12 h,而后用0.1 mol/L磷酸緩沖液(pH值7.2)反復(fù)沖洗3次,每次15 min。乙醇脫水,醋酸異戊酯置換,DX-1臨界點干燥器干燥,IB-3離子濺射儀噴鉑,掃描電鏡觀察并拍照。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 生物表面超顯微結(jié)構(gòu)對比分析

        在ρ(Hns)32 mg/L脅迫一周后,牡蠣的鰓絲發(fā)生脫落,牡蠣鰓表面的變化見圖1(a)(b)(c)(d)(e)(f)。由圖1可見,鰓絲脫落最終導(dǎo)致牡蠣的鰓微結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,使呼吸功能大大降低,進而說明Hns對牡蠣等海洋污損生物具有一定的防治作用。

        圖1 Hns對鰓的影響

        2.2 生物內(nèi)部超顯微結(jié)構(gòu)對比分析

        在 ρ(Hns)32 mg/L脅迫一周后,牡蠣鰓組織細(xì)胞的亞顯微結(jié)構(gòu)發(fā)生了病理變化,如核膜腫脹、線粒體腫脹、內(nèi)脊消失、溶酶體含量增多,細(xì)胞器邊緣模糊變化,牡蠣鰓內(nèi)部的變化見圖2(a)(b)。

        圖2 Hns對鰓內(nèi)部的影響

        由圖2可見,細(xì)胞核核膜出現(xiàn)了消失趨勢,細(xì)胞核開始崩解,這樣的病理變化會導(dǎo)致機體趨于死亡,手動刺激牡蠣的外殼,如發(fā)現(xiàn)外殼無閉殼現(xiàn)象,可判斷為死亡。在 ρ(Hns)32 mg/L脅迫一周后,牡蠣肝胰腺內(nèi)部的變化如圖3(a)(b)。

        圖3 Hns對肝胰腺內(nèi)部的影響

        肝胰腺是貝類消化、代謝、解毒的主要組織器官。由圖3可見,在一定的ρ(Hns)、一定時間的脅迫下,牡蠣肝胰腺組織結(jié)構(gòu)發(fā)生了一定的病理變化。細(xì)胞核邊際模糊,核膜破碎,細(xì)胞核開始分解,染色質(zhì)顏色加深且分布不均勻,核降解,線粒體腫脹破碎。由此可知,Hns對牡蠣肝胰腺內(nèi)部具有一定的影響。

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