劉超，張紅，邱正，張瑞軍

（1.山東省淡水漁業(yè)研究院，山東 濟(jì)南 250013；2.山東省淡水水產(chǎn)遺傳育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山東 濟(jì)南 250117；3.濟(jì)南市蔬菜技術(shù)推廣服務(wù)中心，山東 濟(jì)南 250100）

自2020年起，水產(chǎn)養(yǎng)殖飼料端進(jìn)入“禁抗”時(shí)代，科技人員在積極尋找替代抗生素的有效產(chǎn)品，其中植物提取物被廣泛關(guān)注和開發(fā)應(yīng)用。?？浦参锷?，又名家桑、荊桑、桑葚樹、黃桑等，桑葉是桑的干燥葉，是家蠶的主要食物，我國(guó)各地廣泛種植桑樹，桑葉產(chǎn)量較高。桑葉具有疏散風(fēng)熱、清肺潤(rùn)燥、清肝明目等功效，并具有抗凝血、降血壓、降血糖血脂、降膽固醇、抑菌、抗炎、抗病毒、抗腫瘤、抗衰老等作用。目前，桑葉提取物因含有大量的多糖、生物堿、甾醇類等生物活性物質(zhì)而被應(yīng)用到畜牧養(yǎng)殖，但其很少作為水產(chǎn)養(yǎng)殖飼料添加劑[1]。

目前，大鯢人工養(yǎng)殖已初具規(guī)模，原生態(tài)、仿生態(tài)和工廠化等3種養(yǎng)殖模式日趨成熟，但有關(guān)大鯢人工配合飼料的研究較少[2-4]。Li等[5]研究表明，在大鯢日糧中添加桑葉提取物可以顯著提高大鯢的采食量和胃腸道消化功能，改善肝臟抗氧化功能，增強(qiáng)機(jī)體的免疫力?，F(xiàn)以大鯢為研究對(duì)象，分析桑葉提取物對(duì)其免疫力的影響，探討最適添加劑量，為在大鯢養(yǎng)殖生產(chǎn)中科學(xué)、合理地利用桑葉提取物提供理論數(shù)據(jù)參考。

1 研究方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)用桑葉提取物購(gòu)于南京景竹生物科技有限公司，有效含量>60%；試驗(yàn)用魚由陜西省漢中市南鄭縣南鄭區(qū)黃官鎮(zhèn)博瑞大鯢養(yǎng)殖家庭農(nóng)場(chǎng)提供，其生長(zhǎng)良好、無(wú)病和無(wú)傷。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及日糧

選取100尾健康狀態(tài)良好，體質(zhì)量為（45.20±0.25）g的大鯢，設(shè)置飼料中桑葉提取物質(zhì)量分別為0、4、8和12 g/kg 4個(gè)試驗(yàn)處理組，其中未添加桑葉提取物組為對(duì)照組，每組5個(gè)重復(fù)，并按照單因素隨機(jī)分組原則于每重復(fù)放養(yǎng)大鯢5尾，試驗(yàn)周期10周。對(duì)照組基礎(chǔ)日糧原料組成和營(yíng)養(yǎng)成分含量見表1。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)用大鯢先停食靜養(yǎng)2 d，后用基礎(chǔ)日糧飼養(yǎng)7 d，再進(jìn)行投喂試驗(yàn)。試驗(yàn)期間，大鯢飼養(yǎng)在75 cm×55 cm×20 cm的養(yǎng)殖箱中，注意避光。每日早晨定時(shí)清除箱內(nèi)糞便，每日換水量為總水量的1/3。每日09：00投喂1次。飼養(yǎng)期間水溫20~23℃，pH值為6.5~7.5，水中 ρ（溶解氧）>6.2 mg/L。

表1 基礎(chǔ)日糧原料組成和營(yíng)養(yǎng)成分

1.4 指標(biāo)測(cè)定

檢測(cè)的大鯢免疫指標(biāo)主要包括：血清溶菌酶、補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4、免疫球蛋白M、免疫球蛋白A和免疫球蛋白G。測(cè)定用試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所，并嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行測(cè)定。

1.5 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2010進(jìn)行初步整理后，采用SPSS 24.0進(jìn)行單因素方差分析，并用Duncan’s法對(duì)組間數(shù)據(jù)進(jìn)行多重比較，以P<0.05作為顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以平均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)誤表示。

2 結(jié)果與分析

飼喂不同劑量桑葉提取物后大鯢的免疫性能指標(biāo)情況見表2。由表2可知，不同劑量的桑葉提取物顯著提高了大鯢的免疫性能。其中8 g/kg桑葉提取物處理組大鯢的補(bǔ)體C4含量較對(duì)照組顯著提高28.32%（P<0.05），其余處理組C4含量亦有所提高，但與對(duì)照組無(wú)顯著差異（P>0.05）；8 g/kg桑葉提取物處理組大鯢的免疫球蛋白M含量比對(duì)照組顯著提高53.50%（P<0.05），其余處理組免疫球蛋白M含量也有所提高，但與對(duì)照組和8 g/kg處理組均無(wú)顯著差異（P>0.05）；8 g/kg桑葉提取物處理組大鯢的免疫球蛋白G含量比對(duì)照組、4 g/kg桑葉提取物組、12 g/kg桑葉提取物組分別提高26.55%、19.79%和17.97%，差異均顯著（P<0.05），而后三者間無(wú)顯著差異（P>0.05）。添加不同劑量桑葉提取物對(duì)大鯢補(bǔ)體C3、免疫球蛋白A含量及溶菌酶活性均無(wú)顯著影響（P>0.05）。以上結(jié)果表明，在日糧中添加一定劑量的桑葉提取物可提高大鯢的免疫力，且最適添加量為8 g/kg。

表2 不同劑量桑葉提取物對(duì)大鯢免疫性能的影響①

3 討論

動(dòng)物的免疫球蛋白含量直接反映機(jī)體免疫功能的強(qiáng)弱，而補(bǔ)體和溶菌酶則是機(jī)體內(nèi)非特異性免疫蛋白。免疫球蛋白、補(bǔ)體、溶菌酶對(duì)于魚類抵御外源微生物的入侵具有重要作用，其含量和活性越高代表機(jī)體的免疫功能越強(qiáng)[6]。該研究表明，8 g/kg桑葉提取物處理組大鯢的補(bǔ)體C4含量較對(duì)照組顯著提高28.32%（P<0.05）；8 g/kg桑葉提取物處理組大鯢的免疫球蛋白M含量比對(duì)照組顯著提高53.50%（P<0.05）；8 g/kg桑葉提取物組的免疫球蛋白G含量比對(duì)照組、4 g/kg桑葉提取物組、12 g/kg桑葉提取物組分別顯著提高26.55%、19.79%和17.97%（P<0.05）。由此可見，在大鯢日糧中添加一定劑量的桑葉提取物具有提高免疫力的功能，且最適添加量為8 g/kg。盧樺等[7]就桑葉提取物和1-脫氧野尻霉素對(duì)大鯢生長(zhǎng)性能、肝臟功能及免疫能力的影響研究發(fā)現(xiàn)，桑葉提取物顯著提高了大鯢的免疫球蛋白M含量，與該研究結(jié)果基本一致。桑葉提取物對(duì)大鯢免疫力的提升功能，可能是由于其含有豐富的糖類、生物堿、植物甾醇類等生物活性物質(zhì)，而其中的活性物質(zhì)具有抗菌、抗炎的功能，進(jìn)而提高了大鯢的免疫能力。

4 結(jié)論

在該試驗(yàn)條件下，日糧中添加桑葉提取物可以顯著提高大鯢的補(bǔ)體C4、免疫球蛋白M和免疫球蛋白G含量，且最適添加量為8 g/kg。