吳 晗，王 坤，唐慧敏，徐成辰，楊淑嫻

(江蘇省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)測(cè)試中心，江蘇南京 210000)

環(huán)酯草醚(pyriftalid)是瑞士先正達(dá)作物保護(hù)有限公司研發(fā)的高效、低毒、環(huán)保型嘧啶類(lèi)氧(硫)苯甲酸酯類(lèi)除草劑[1,2]。我國(guó)海正化工南通股份有限公司于2016年獲批登記國(guó)內(nèi)首個(gè)環(huán)酯草醚原藥產(chǎn)品[3]，主要用于移栽及直播水稻田防除一年生禾本科、莎草科及部分闊葉雜草，對(duì)稗草和鱧腸有較好的防效[4]，具有高效、低毒，在土壤中存留時(shí)間短及對(duì)非靶標(biāo)生物和人類(lèi)安全等優(yōu)點(diǎn)[5,6]。

目前有關(guān)環(huán)酯草醚的分析方法標(biāo)準(zhǔn)研究相對(duì)較少，即使已報(bào)道的液相色譜分析方法還缺乏系統(tǒng)性研究[7]，不符合國(guó)家及行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)范要求，導(dǎo)致環(huán)酯草醚在農(nóng)藥監(jiān)督執(zhí)法中處于監(jiān)管盲區(qū)?；诖耍狙芯坎捎靡合嗌V技術(shù)開(kāi)展了環(huán)酯草醚原藥及24.3%懸浮劑的分析研究以期為該藥劑產(chǎn)品質(zhì)量控制及標(biāo)準(zhǔn)制定提供技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 樣品

98.5%環(huán)酯草醚原藥和24.3%環(huán)酯草醚懸浮劑，由順毅南通化工有限公司提供。

1.2 試劑和溶液

乙腈，色譜純；水，新蒸二次蒸餾水或超純水；磷酸，分析純；環(huán)酯草醚標(biāo)樣，已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥98.0%，沈陽(yáng)農(nóng)藥質(zhì)量檢驗(yàn)中心提供。

1.3 儀器設(shè)備

1290高效液相色譜儀配可變波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器、自動(dòng)進(jìn)樣裝置和色譜數(shù)據(jù)處理工作站(美國(guó)安捷倫公司)；過(guò)濾器：濾膜孔徑約0.45 μm。XP-205梅特勒十萬(wàn)分之一自動(dòng)分析天平[梅特勒－托利多儀器(上海)有限公司]。

1.4 高效液相色譜分析條件

ZORBAX SB-C18不銹鋼柱色譜柱[150 mm×4.6 mm (i.d)，5 μm]；流動(dòng)相：乙腈∶0.1%磷酸水溶液＝55∶45(體積比)；流速：1.0 mL/min；柱溫：室溫(溫度變化應(yīng)不大于2 ℃)；檢測(cè)波長(zhǎng)：240 nm；進(jìn)樣體積：2 μL。在此色譜條件下，環(huán)酯草醚的保留時(shí)間約5.8 min (圖1)。

圖1 環(huán)酯草醚(原藥和24.3%懸浮劑)的高效液相色譜圖

1.5 測(cè)定步驟

1.5.1 標(biāo)樣溶液的制備

稱取50.00 mg(精確至0.1 mg)環(huán)酯草醚標(biāo)樣于100 mL容量瓶中，加入20 mL流動(dòng)相，超聲波振蕩 5 min，冷卻至室溫，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，備用。

1.5.2 試樣溶液的制備

稱取含50.00 mg(精確至0.1 mg)環(huán)酯草醚的試樣于100 mL容量瓶中，加入20 mL流動(dòng)相，超聲波振蕩5 min，冷卻至室溫，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，過(guò)濾，備用。

1.5.3 測(cè)定

在上述操作條件下，待儀器穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直至相鄰2針環(huán)酯草醚峰面積相對(duì)變化小于1.2%后，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測(cè)定。

1.5.4 計(jì)算

將測(cè)得的2針試樣溶液以及試樣前后2針標(biāo)樣溶液中環(huán)酯草醚峰面積分別進(jìn)行平均。試樣中環(huán)酯草醚質(zhì)量分?jǐn)?shù)按公式(1)計(jì)算：

式中：ω1為試樣中環(huán)酯草醚質(zhì)量分?jǐn)?shù)，以%表示；A2為試樣溶液中環(huán)酯草醚峰面積的平均值；m1為環(huán)酯草醚標(biāo)樣的質(zhì)量，單位為克(g)；ω為標(biāo)樣中環(huán)酯草醚質(zhì)量分?jǐn)?shù)，以%表示；A1為標(biāo)樣溶液中環(huán)酯草醚峰面積的平均值；m2為試樣的質(zhì)量，單位為克(g)。

2 結(jié)果與分析

2.1 色譜條件的選擇

環(huán)酯草醚的紫外掃描光譜圖如圖2所示，從圖2可以看到環(huán)酯草醚的最大吸收波長(zhǎng)約240 nm，在該波長(zhǎng)處?kù)`敏度較高，干擾較少，能夠滿足分析的要求，故將檢測(cè)波長(zhǎng)確定為240 nm。

色譜柱選擇常用的ZORBAX SB-C18反相柱。根據(jù)環(huán)酯草醚物化性質(zhì)和溶劑的紫外吸收波長(zhǎng)，選擇0.1%磷酸水溶液作為溶劑溶解樣品，并以乙腈和水作為流動(dòng)相，為了達(dá)到更好的分離效果和峰形，在1 000 mL水里加入1 mL磷酸。將流動(dòng)相按不同比例在色譜柱上進(jìn)行試驗(yàn)，當(dāng)乙腈與磷酸水溶液比例達(dá)到55∶45時(shí)，雜質(zhì)峰與環(huán)酯草醚完全分離，且峰純度完全達(dá)到試驗(yàn)要求，因此最終選擇乙腈+磷酸(55∶45)作為流動(dòng)相，流速1.0 mL/min。該條件下，環(huán)酯草醚色譜峰峰形較好，具有良好的精密度和準(zhǔn)確度。

圖2 環(huán)酯草醚的紫外光譜圖

2.2 特異性試驗(yàn)

本試驗(yàn)采用HPLC-DAD峰純度分析法來(lái)鑒別環(huán)酯草醚。環(huán)酯草醚標(biāo)樣、環(huán)酯草醚原藥、24.3%環(huán)酯草醚懸浮劑中的環(huán)酯草醚HPLC-DAD峰純度均大于990，有效成分處無(wú)其他物質(zhì)干擾，符合定量分析要求。峰純度色譜圖見(jiàn)圖3~圖5。

圖3 環(huán)酯草醚標(biāo)樣HPLC-DAD峰純度色譜圖

圖4 環(huán)酯草醚原藥HPLC-DAD峰純度色譜圖

圖5 24.3%環(huán)酯草醚懸浮劑HPLC-DAD峰純度色譜圖

2.3 線性關(guān)系試驗(yàn)

按1.5.1分別配置5個(gè)不同質(zhì)量濃度的環(huán)酯草醚標(biāo)樣溶液，在相應(yīng)色譜操作條件下進(jìn)行分析，以環(huán)酯草醚質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。當(dāng)環(huán)酯草醚質(zhì)量濃度在229.83~839.48 mg/L，得到線性方程為y=5.31x-3.44，線性相關(guān)系數(shù)R=1.00。

2.4 方法精密度試驗(yàn)

按1.5.2試樣溶液的制備方法分別配制5個(gè)環(huán)酯草醚原藥和5個(gè)24.3%環(huán)酯草醚懸浮劑溶液。以線性關(guān)系試驗(yàn)中520.20 mg/L環(huán)酯草醚溶液為標(biāo)樣溶液，在上述操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表1、2?？梢钥闯霏h(huán)酯草醚原藥和24.3%環(huán)酯草醚懸浮劑中環(huán)酯草醚質(zhì)量分?jǐn)?shù)測(cè)定結(jié)果的RSD分別為0.19%和0.42%，分別小于修改的Horwitz公式2(1-0.51ogC)×0.67=1.34和1.65，說(shuō)明有效成分分析方法精密度的結(jié)果符合質(zhì)量控制的基本要求。

圖6 環(huán)酯草醚峰面積與質(zhì)量濃度之間的線性關(guān)系圖

表1 環(huán)酯草醚原藥中環(huán)酯草醚精密度試驗(yàn)結(jié)果

2.5 方法準(zhǔn)確度試驗(yàn)

稱取5份含25.00 mg (精確至0.1 mg)環(huán)酯草醚的24.3%環(huán)酯草醚懸浮劑于100 mL容量瓶中，分別加入環(huán)酯草醚標(biāo)樣25.00 mg，按1.5.2的方法配制5個(gè)有效成分準(zhǔn)確度溶液。以線性關(guān)系試驗(yàn)中520.20 mg/L環(huán)酯草醚溶液為標(biāo)樣溶液，計(jì)算環(huán)酯草醚的回收率，結(jié)果見(jiàn)表3。24.3%環(huán)酯草醚懸浮劑中環(huán)酯草醚平均回收率為100.76%，此方法具有良好的準(zhǔn)確度。

表2 24.3%環(huán)酯草醚懸浮劑中環(huán)酯草醚精密度試驗(yàn)結(jié)果

表3 24.3%環(huán)酯草醚懸浮劑回收率試驗(yàn)結(jié)果

3 結(jié) 論

通過(guò)試驗(yàn)表明，采用本方法測(cè)定環(huán)酯草醚原藥、24.3%環(huán)酯草醚懸浮劑的有效成分，線性關(guān)系良好，精密度、準(zhǔn)確度高，分離效果好，并且操作簡(jiǎn)便、快速，是產(chǎn)品日常檢驗(yàn)較為理想的分析方法。