張立國(guó),艾冰凌,李建政,班巧英*

氧化還原介體強(qiáng)化厭氧活性污泥發(fā)酵產(chǎn)氫特征

張立國(guó)1,2,艾冰凌3,李建政4,班巧英1,2*

(1.山西大學(xué)環(huán)境與資源學(xué)院,山西 太原 030006；2.山西省黃河實(shí)驗(yàn)室,山西 太原 030006；3.中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院?？趯?shí)驗(yàn)站,海南 海口 571101；4.哈爾濱工業(yè)大學(xué)環(huán)境學(xué)院,黑龍江 哈爾濱 150090)

為提高厭氧污泥的發(fā)酵產(chǎn)氫能力,采用間歇培養(yǎng)方式考察了氧化還原介體(ROMs)對(duì)厭氧污泥發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)氫效能的影響,并通過Illumina MiSeq測(cè)序揭示了ROMs對(duì)微生物群落的影響.結(jié)果表明,在發(fā)酵液體積為100mL及葡萄糖初始濃度500mg/L條件下,對(duì)照的累計(jì)產(chǎn)氫量和最大產(chǎn)氫速率(max)分別為11.0mL和0.28mL/h.當(dāng)腐殖酸和蒽醌-2-磺酸鈉(AQS)作為ROMs加入發(fā)酵體系后,厭氧污泥的產(chǎn)氫能力顯著提高,其累計(jì)產(chǎn)氫量和max分別比對(duì)照高出56.4%、13.6%和 53.6%、10.7%.相反,氧化石墨烯(GO)、指甲花醌和蒽醌-2,6-二磺酸鈉(AQDS)導(dǎo)致厭氧污泥的產(chǎn)氫能力受到不同程度的抑制.Illumina MiSeq測(cè)序揭示了發(fā)酵系統(tǒng)的優(yōu)勢(shì)菌群存在顯著差異.對(duì)照系統(tǒng)中的優(yōu)勢(shì)菌群主要來自5個(gè)屬(、、、、),腐殖酸、AQS和指甲花醌發(fā)酵系統(tǒng)的主要優(yōu)勢(shì)菌群為、、,而、、、為AQDS和GO發(fā)酵系統(tǒng)的主要菌群.冗余分析的結(jié)果表明,產(chǎn)氫量與和呈正相關(guān),而與和呈負(fù)相關(guān).

厭氧活性污泥；氧化還原介體；發(fā)酵產(chǎn)氫；微生物群落

隨著化石能源的日益減少,可再生能源的開發(fā)與應(yīng)用迫在眉睫.氫氣因其具有熱值高、無污染、可再生等優(yōu)點(diǎn)而成為一種理想的替代燃料.與物理、化學(xué)方法相比,生物制氫可以利用各種有機(jī)廢水、固體廢棄物為原料產(chǎn)氫,因此受到研究者的廣泛關(guān)注[1-2].目前,厭氧細(xì)菌暗發(fā)酵制氫是研究較多的生物制氫方法之一,該法能夠利用廉價(jià)的有機(jī)廢棄物為原料進(jìn)行低成本制氫,但產(chǎn)氫效率有待提高[3-4].因此,強(qiáng)化厭氧細(xì)菌暗發(fā)酵產(chǎn)氫效能對(duì)于提高有機(jī)廢棄物生物制氫效能具有重要意義.

氧化還原介體(ROMs)可以加速氧化還原反應(yīng)過程中的電子傳遞速度,使反應(yīng)速率提高1個(gè)到幾個(gè)數(shù)量級(jí)[5].近年來,ROMs被廣泛用于強(qiáng)化污染物的去除[5-7].有機(jī)物厭氧發(fā)酵產(chǎn)氫是通過一系列氧化還原反應(yīng)實(shí)現(xiàn)的.可見,ROMs的生物催化功能有望提高厭氧污泥的產(chǎn)氫能力,進(jìn)而改善有機(jī)物暗發(fā)酵產(chǎn)氫效能.因此,本研究通過間歇試驗(yàn)考察了蒽醌-2,6-二磺酸鈉(AQDS)、蒽醌-2-磺酸鈉(AQS)、指甲花醌、氧化石墨烯(GO)、腐殖酸對(duì)厭氧污泥發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)氫的強(qiáng)化效果,并通過高通量測(cè)序揭示了ROMs對(duì)產(chǎn)酸發(fā)酵相關(guān)微生物菌群的影響,為ROMs強(qiáng)化有機(jī)物厭氧發(fā)酵制氫提供新的技術(shù)參考.

1 材料與方法

1.1 接種污泥和試驗(yàn)廢水

接種污泥取自太原市某城市污水處理廠的缺氧池,將污泥混合液置于燒杯中靜置6h,棄上清后用于試驗(yàn). 污泥濃度為2.4g MLVSS/L.本研究中所用有機(jī)廢水為人工合成廢水,以5000mg/L葡萄糖作為唯一碳源,并添加微生物生長(zhǎng)繁殖所需要的其他營(yíng)養(yǎng)元素[8].

1.2 ROMs固定化

選AQDS、AQS、指甲花醌、GO、腐殖酸,作為強(qiáng)化葡萄糖厭氧生物制氫的ROMs.其中,AQDS、AQS和指甲花醌采用海藻酸鈣包埋法進(jìn)行固定[8].

1.3 ROMs強(qiáng)化有機(jī)廢水厭氧發(fā)酵產(chǎn)氫試驗(yàn)

試驗(yàn)采用間歇培養(yǎng)方式進(jìn)行,實(shí)驗(yàn)容器為300mL厭氧瓶.每個(gè)厭氧瓶中加入10mL接種污泥和10mL試驗(yàn)廢水,然后向厭氧瓶中加入一定量空白海藻酸鈣珠子(對(duì)照),AQDS、AQS、指甲花醌海藻酸鈣珠子,GO和腐殖酸,使ROMs的終濃度均為80mg/L,加入適量蒸餾水使液相總體積達(dá)到100mL.用1mol/L HCl調(diào)培養(yǎng)液pH值至6.5.連續(xù)通入5min N2后立即密封.隨后用注射器向厭氧瓶中加入0.02%氯仿抑制產(chǎn)甲烷菌的活性. 將所有厭氧瓶置于35℃、120r/min條件下恒溫震蕩培養(yǎng).每組試驗(yàn)設(shè)置3個(gè)平行樣,數(shù)據(jù)分析取其平均值.每12h測(cè)定氣體組成,并于發(fā)酵結(jié)束時(shí)測(cè)定揮發(fā)酸(VFAs)濃度.

1.4 Illumina MiSeq測(cè)序

稱取0.15g污泥(濕重),采用DNA提取試劑盒(E.Z.N.ATMMag-BindSoilDNAKit,,Inc., USA)提取污泥總DNA.以樣品DNA為模板,用通用引物27F,5′-AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-3′, 515R,5′-CACGTATTACCGCGGCTGCTGGCAC- 3′對(duì)細(xì)菌的16S rRNA基因V1～V3區(qū)進(jìn)行PCR擴(kuò)增.構(gòu)建Illumina平臺(tái)文庫(kù)并測(cè)序. Illumina MiSeq測(cè)序原始序列提交NCBI,登錄號(hào)為PRJNA670924.使用Mothur軟件(version v.1.30.1)對(duì)測(cè)序獲得的原始序列進(jìn)行質(zhì)控篩選和過濾,按照97%相似性進(jìn)行操作分類單元(OTU)聚類分析,在聚類過程中去除嵌合體,得到各OTU的代表序列,在Silva數(shù)據(jù)庫(kù)(http://www.arb-silva.de)進(jìn)行比對(duì)、物種注釋,最后在門水平和屬水平進(jìn)行群落結(jié)構(gòu)分析.冗余分析采用軟件Canoco 5.0進(jìn)行.

1.5 分析項(xiàng)目及方法

生物量(揮發(fā)性懸浮固體總量MLVSS)采用標(biāo)準(zhǔn)方法測(cè)定[9],產(chǎn)氣量通過10～50mL的玻璃注射器排氣計(jì)量.發(fā)酵氣體的組分和揮發(fā)酸濃度分別采用山東滕州瑞普分析儀器有限公司的RP-6800A型(TCD檢測(cè)器)和RP-6890型(FID檢測(cè)器)氣相色譜測(cè)定.累計(jì)氫氣產(chǎn)量參照Owen法進(jìn)行計(jì)算[10].

1.6 動(dòng)力學(xué)分析

不同ROMs作用下的產(chǎn)氫動(dòng)力學(xué)分析參照Gompertz模型(式1).

式中:為反應(yīng)(h)累計(jì)氫氣產(chǎn)量,mL;max為最大產(chǎn)氫量,mL;max為最大產(chǎn)氫速率,mL/h;為延遲時(shí)間,h; e為常數(shù).

將累計(jì)甲烷產(chǎn)量和相應(yīng)反應(yīng)時(shí)間代入式(1),用統(tǒng)計(jì)軟件Origin 9.0計(jì)算出max、max、λ[10].

2 結(jié)果與討論

2.1 累計(jì)氫氣產(chǎn)量

ROMs可以提高電子從初級(jí)電子供體傳遞到最終電子受體的速度,從而提高氧化還原反應(yīng)速率[5].在已有文獻(xiàn)中,醌類物質(zhì)和腐殖質(zhì)是研究較多的ROMs[5].因此,本研究考察了AQDS、AQS、指甲花醌、GO和腐殖酸對(duì)厭氧活性污泥發(fā)酵產(chǎn)氫的影響.如圖1所示,在培養(yǎng)12h后,對(duì)照的累計(jì)產(chǎn)氫量為2.7mL,隨著培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng),累計(jì)產(chǎn)氫量逐漸提高,經(jīng)過84h連續(xù)培養(yǎng)后,達(dá)到平臺(tái)期,累計(jì)產(chǎn)氫量為11.0mL.當(dāng)加入ROMs后,厭氧污泥發(fā)酵產(chǎn)氫能力受到不同程度的影響.其中,腐殖酸和AQS可提高厭氧污泥發(fā)酵產(chǎn)氫的效能.腐殖酸試驗(yàn)組在培養(yǎng)初期就表現(xiàn)出較高的活性,培養(yǎng)12h后的累計(jì)氫氣產(chǎn)量達(dá)到了4.0mL,比同期對(duì)照組高出48.1%,隨著培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng),累積氫氣產(chǎn)量逐漸增加,最終在72h達(dá)到穩(wěn)定,為17.2mL,比對(duì)照高出56.4%.研究表明,腐殖酸的電子傳遞能力主要依賴醌、酚等官能團(tuán)的存在[11].盡管AQS也能提高厭氧活性污泥的產(chǎn)氫能力,但其強(qiáng)化效果低于腐殖酸.當(dāng)AQS作為ROMs時(shí),培養(yǎng)前期表現(xiàn)出與對(duì)照相似的產(chǎn)氫活性,但在培養(yǎng)24h后,AQS試驗(yàn)組的產(chǎn)氫能力高于對(duì)照,并在84h達(dá)到最大值,比對(duì)照高出13.6%.腐殖酸和AQS能強(qiáng)化厭氧污泥發(fā)酵產(chǎn)氫效能主要是由于它們能夠降低葡萄糖氧化還原反應(yīng)的活化能、提高產(chǎn)氫微生物的能量利用效率[5].然而,當(dāng)GO、指甲花醌和AQDS作為ROMs時(shí),厭氧活性污泥的產(chǎn)氫能力卻受到不同程度的抑制.在接種初期,它們的發(fā)酵產(chǎn)氫速率就低于對(duì)照,隨著培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng),累積產(chǎn)氫量逐漸增加并最終分別穩(wěn)定在5.6,2.1和10.1mL.除此之外,從圖1可知,指甲花醌試驗(yàn)組存在明顯的耗氫現(xiàn)象,可能是由于指甲花醌的加入促進(jìn)了一些耗氫菌的生長(zhǎng).

圖1 不同ROMs條件下累積產(chǎn)氫量

2.2 動(dòng)力學(xué)分析

為了解各發(fā)酵系統(tǒng)的動(dòng)力學(xué)特征,采用改進(jìn)的Gompertz模型(式(1))對(duì)累計(jì)氫氣產(chǎn)量曲線進(jìn)行了非線性擬合(表1).如表1所示,除指甲花醌發(fā)酵系統(tǒng)外,其余發(fā)酵系統(tǒng)的擬合系數(shù)(2)均大于0.99,表明該模型用來描述累計(jì)產(chǎn)氫量的進(jìn)程是合理的.在對(duì)照組中,λ為3.19h,當(dāng)系統(tǒng)中加入AQS和腐殖酸后,λ分別比對(duì)照縮短了11.3%和31.3%.與之相反,加入AQDS和GO之后,明顯延長(zhǎng),分別為3.65 和3.75h.由表1的擬合結(jié)果可以發(fā)現(xiàn),腐殖酸發(fā)酵系統(tǒng)中的最大產(chǎn)氫速率(max)和最大氫氣產(chǎn)量(max)分別為0.43mL/h和17.1mL,顯著高于對(duì)照組,分別比對(duì)照提高了53.6%和58.3%.其次,AQS發(fā)酵系統(tǒng)的max和max也高于對(duì)照組,分別比對(duì)照高出10.7%和14.8%.然而,GO發(fā)酵系統(tǒng)的max和max卻顯著低于對(duì)照組.盡管AQDS發(fā)酵系統(tǒng)的max與對(duì)照相似,但max卻比對(duì)照減少了42.9%.產(chǎn)氫動(dòng)力學(xué)的結(jié)果表明,腐殖酸可以顯著強(qiáng)化厭氧活性污泥的產(chǎn)氫能力,而AQDS和GO卻抑制了產(chǎn)氫菌的活性.

表1 不同ROMs條件下產(chǎn)氫動(dòng)力學(xué)分析

注:“-”表示該系統(tǒng)不符合Gompertz模型.

2.3 液相末端產(chǎn)物

有機(jī)物厭氧發(fā)酵產(chǎn)氫過程通常伴隨著揮發(fā)酸的產(chǎn)生[12].如圖2所示,對(duì)照組中的液相末端產(chǎn)物以乙醇、乙酸和丙酸為主,含量分別為71.2,174.4和92.6mg/L.而丁酸含量顯著低于其他揮發(fā)酸,僅占揮發(fā)酸總量的6.1%.類似地,當(dāng)AQDS、GO和指甲花醌作為ROMs時(shí),乙醇、乙酸和丙酸仍然為主要液相末端產(chǎn)物,濃度分別為33.7～67.3,89.8～184.4和82.7～ 134.3mg/L.然而,當(dāng)AQS和腐殖酸作為ROMs時(shí),丁酸濃度顯著高于其他發(fā)酵系統(tǒng),分別為129.5和83.6mg/L,成為主要液相末端產(chǎn)物之一.此外,AQS和腐殖酸發(fā)酵系統(tǒng)的揮發(fā)酸總量也高于其他發(fā)酵系統(tǒng),表明AQS和腐殖酸能夠提高產(chǎn)酸發(fā)酵菌群的活性.相反,GO和指甲花醌發(fā)酵系統(tǒng)的揮發(fā)酸總量比分別對(duì)照低10.0%和24.9%,表明GO和指甲花醌不僅抑制了產(chǎn)氫菌的活性(圖1),同時(shí)對(duì)其他發(fā)酵菌也有一定的抑制作用.

圖2 ROMs對(duì)發(fā)酵液相末端產(chǎn)物的影響

結(jié)合圖1和圖2可以發(fā)現(xiàn),AQS和腐殖酸的加入能夠在一定程度上提高產(chǎn)丁酸菌的活性,從而提高氫氣產(chǎn)量.另外,腐殖酸發(fā)酵系統(tǒng)中丙酸含量?jī)H為49.6mg/L,有利于后續(xù)降解的進(jìn)行.

2.4 微生物群落結(jié)構(gòu)

2.4.1 多樣性和豐富度 厭氧活性污泥的產(chǎn)氫效能與其群落結(jié)構(gòu)密切相關(guān)[13].本研究采用Illumina MiSeq測(cè)序技術(shù)對(duì)不同發(fā)酵系統(tǒng)中厭氧污泥進(jìn)行了群落結(jié)構(gòu)解析.如表2所示,6個(gè)樣品包含的有效序列數(shù)目為30599～31860.基于97%相似性對(duì)序列進(jìn)行OTUs聚類分析,在對(duì)照、AQS、腐殖酸、AQDS、GO和指甲花醌污泥樣品中分別獲得3423,3574, 3766,3644,3638和3099個(gè)OTUs.多樣性指數(shù)(Shannon和Simpson)表明,6個(gè)污泥樣品中微生物具有相似的多樣性,而對(duì)照和AQS組的豐富度指數(shù)(Chao1和Ace)低于其他發(fā)酵系統(tǒng). 盡管Chao1和Ace估計(jì)的OTUs數(shù)目高于實(shí)際檢測(cè)值,然而文庫(kù)覆蓋率(Coverage)達(dá)到了93%以上,表明樣品中主要微生物已被檢測(cè)到.

表2 不同ROMs條件下微生物群落多樣性和豐富度分析

2.4.2 微生物群落結(jié)構(gòu)相似性 為揭示不同ROMs發(fā)酵系統(tǒng)中微生物群落結(jié)構(gòu)的差異性,對(duì)所有樣品進(jìn)行主坐標(biāo)分析(PCoA),并通過Venn圖揭示了OTUs分布特征.如圖3(a)所示,PCoA1和PCoA2的貢獻(xiàn)率分別為54.0%和24.0%. PCoA分析結(jié)果表明,對(duì)照和GO及AQDS和AQS發(fā)酵系統(tǒng)中主要微生物相似性較高,而指甲花醌和腐殖酸發(fā)酵系統(tǒng)中的主要微生物與其他樣品差異較大. Venn圖進(jìn)一步揭示了6個(gè)樣品中共有和獨(dú)有的OTUs數(shù)目.由圖3(b)可知,790個(gè)OTUs存在于所有樣品中.而對(duì)照、AQS、腐殖酸、AQDS、GO和指甲花醌樣品中獨(dú)有的OTUs數(shù)目分別為819,938, 1042,1023,980和1017.

2.4.3 主要微生物種群的相對(duì)豐度 如圖4(a)所示,6個(gè)樣品中OTUs所代表的序列在系統(tǒng)發(fā)育上涉及8個(gè)門,即:變形菌門(Proteobacteria)、綠彎菌門(Chloroflexi)、浮霉菌門(Planctomycetes)、擬桿菌門(Bacteroidetes)、厚壁菌門(Firmicutes)、放線菌門(Actinobacteria)、酸桿菌門(Acidobacteria)和綠菌門(Ignavibacteriae).其中,變形菌門、綠彎菌門、擬桿菌門、厚壁菌門和放線菌門為中溫厭氧反應(yīng)器中常見的水解發(fā)酵菌群[14].與已有研究結(jié)果相似,本研究發(fā)現(xiàn)變形菌門和綠彎菌門為所有樣品的優(yōu)勢(shì)細(xì)菌門.在對(duì)照和AQDS中,變形菌門的相對(duì)豐度分別為33.3%和33.5%,而AQS、腐殖酸、GO和指甲花醌的加入刺激了變形菌門微生物的生長(zhǎng),使其相對(duì)豐度比對(duì)照高出6.3%～19.2%.相反,綠彎菌門的相對(duì)豐度在對(duì)照、AQDS和GO中較高,而在AQS、腐殖酸和指甲花醌中的相對(duì)豐度較低.另外,在對(duì)照中浮霉菌門的相對(duì)豐度為11.5%,ROMs的加入抑制了它們的生長(zhǎng),而ROMs(GO除外)使厚壁菌門的相對(duì)豐度比對(duì)照顯著提高了0.3～2.2倍.其余細(xì)菌門的相對(duì)豐度在各樣品之間沒有顯著差異.從圖4b可以看出,在屬水平上未分類和其他序列的相對(duì)豐度高達(dá)45.5%～52.4%和20.4%～30.4%.由此可見,這些未知功能的微生物種屬在葡萄糖發(fā)酵產(chǎn)氫過程中起著重要作用.此外,高通量測(cè)序共檢測(cè)到11個(gè)主要菌屬.在對(duì)照組中,(10.9%)、長(zhǎng)繩菌屬(2.8%)、(2.2%)、(2.6%)、動(dòng)性桿菌屬(2.2%)為主要菌群,它們能夠利用一些碳水化合物、酵母粉、蛋白胨等進(jìn)行生長(zhǎng)繁殖[15-18].當(dāng)加入ROMs后,、和的生長(zhǎng)受到不同程度的抑制,其相對(duì)豐度較對(duì)照降低了15.9%～56.0%.相反,ROMs促進(jìn)了的生長(zhǎng)繁殖,腐殖酸使得的相對(duì)豐度比對(duì)照高出1.7倍.除了以上主要菌群外,在對(duì)照組中還存在少量其他菌群.可以小分子有機(jī)酸(如延胡索酸、乳酸)為碳源,其相對(duì)豐度為1.7%,加入ROMs后,其數(shù)量顯著增加[19].(產(chǎn)酸發(fā)酵菌)、磂黃果菌屬(紫色硫細(xì)菌)和小梨形菌屬(專性好氧菌)在6個(gè)樣品中的相對(duì)豐度相似,為0～1.4%之間[20-21].另外,由圖4b可知,產(chǎn)酸發(fā)酵菌屠場(chǎng)桿狀菌屬和束毛球菌屬只存在于部分樣品中.在AQS、腐殖酸和AQDS樣品中的相對(duì)分度分別為0.7%、1.0%和0.7%,而(1.1%)僅存在于腐殖酸樣品中.

圖4 不同ROMs條件下細(xì)菌群落的相對(duì)豐度

2.5 優(yōu)勢(shì)功能菌群與產(chǎn)氫效能的關(guān)系

為了解發(fā)酵系統(tǒng)中優(yōu)勢(shì)微生物種群與厭氧污泥產(chǎn)氫效能之間的關(guān)系,對(duì)優(yōu)勢(shì)微生物和產(chǎn)量、VFAs進(jìn)行冗余分析(RDA)(圖5).結(jié)果表明,產(chǎn)氫量與、、、和呈正相關(guān),且這些菌群在腐殖酸發(fā)酵系統(tǒng)中的相對(duì)含量較高,使得腐殖酸系統(tǒng)的累計(jì)氫氣產(chǎn)量最大(圖1).從圖5還可以看出,產(chǎn)氣量與、、和呈負(fù)相關(guān),它們主要分布在指甲花醌系統(tǒng)中,導(dǎo)致指甲花醌系統(tǒng)的累計(jì)產(chǎn)氫量?jī)H為2.1mL,且存在明顯的耗氫現(xiàn)象.另外,RDA結(jié)果顯示,氫氣產(chǎn)量與丁酸、乙醇含量正相關(guān),而與丙酸呈負(fù)相關(guān),表明丁酸型、乙醇型發(fā)酵有利于氫氣產(chǎn)生,而丙酸型發(fā)酵不利于氫氣產(chǎn)生,這與以前研究結(jié)果一致[22].

圖5 優(yōu)勢(shì)菌群、產(chǎn)氫量和VFAs之間的冗余分析

3 結(jié)論

3.1 腐殖酸能夠顯著提高厭氧污泥的產(chǎn)氫能力,其累計(jì)氫氣產(chǎn)量達(dá)到了17.2mL,比對(duì)照高出56.4%,且max比對(duì)照提高了53.6%;然而,AQDS、GO和指甲花醌對(duì)厭氧污泥發(fā)酵產(chǎn)氫有一定的抑制性.

3.2 對(duì)照、AQDS、GO和指甲花醌發(fā)酵系統(tǒng)的液相末端產(chǎn)物以乙醇、乙酸和丙酸為主,而在AQS和腐殖酸系統(tǒng)中,丁酸也成為主要液相末端產(chǎn)物之一,且揮發(fā)酸總量顯著高于其他組.

3.3 腐殖酸使優(yōu)勢(shì)菌群從、、、和演替為、和,冗余分析表明產(chǎn)氫量與、、、和呈正相關(guān).

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Improving fermentative hydrogen production of anaerobic sludge by redox mediators.

ZHANG Li-guo1,2, AI Bing-ling3, LI Jian-zheng4, BAN Qiao-ying1,2*

(1.College of Environment and Resource Sciences, Shanxi University, Taiyuan 030006, China；2.Shanxi Laboratory for Yellow River, Taiyuan 030006, China；3.Haikou Experimental Station, Chinese Academy Tropical Agricultural Sciences, Haikou 571101, China；4.School of Environment, Harbin Institute of Technology, Harbin 150090, China)., 2021,41(5)：2196～2202

To improve the hydrogen production activity of anaerobic sludge, the effects of redox mediators (ROMs) on the hydrogen production efficiency of anaerobic sludge using glucose as substratewere investigated by batch culture. The microbial community structure was revealed by Illumina MiSeq sequencing. The results showed that the cumulative hydrogen production and maximum hydrogen production rate (max) of the control were respectively 11.0mL and 0.28mL/h under conditions of the fermentative volume of100mL and the initial glucose concentration of 500mg/L. When humic acid and anthraquinone-2-sulfonic acid (AQS) as ROMs were added to the system, the hydrogen production capacity of anaerobic sludge was significantly improved. The cumulative hydrogen production was higher than the control by 56.4% and 13.6%, respectively. Whilemaxwas increased by 53.6% and 10.7%, respectively. On the contrary, the hydrogen production capacity of anaerobic sludge was inhibited when graphene oxide (GO), hennaquinone and anthraquinone-2,6-disulfonic acid (AQDS) were used as ROMs. Illumina MiSeq sequencing revealed that the dominant microbial groups from each sample were different.,,,andwere the dominant genera in control. The major genera were shifted to,andin humic acid, AQS and hennaquinone fermentation systems. While,,andbecame the predominant genera in AQDS and GO fermentation systems. Redundancy analysis indicated that hydrogen production was positively correlated with,,,and, whereas negatively correlated with,,and.

anaerobic sludge；redox mediators；hydrogen production by fermentation；microbial community

X703.5

A

1000-6923(2021)05-2196-07

張立國(guó)(1980-),男,河南安陽人,副教授,博士,主要從事廢水厭氧生物處理.發(fā)表論文30余篇.

2020-09-15

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(51708341,51708548);哈爾濱工業(yè)大學(xué)城市水資源與水環(huán)境國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開放基金項(xiàng)目(QA202137)

* 責(zé)任作者, 副教授, banqiaoying@163.com