周明夏 錢(qián)捷 顧長(zhǎng)青

摘要：為開(kāi)展大腸桿菌分離株臨床常用藥物敏感性研究，對(duì)從江蘇省不同地區(qū)養(yǎng)雞場(chǎng)分離到的139株大腸桿菌進(jìn)行了藥物敏感性檢測(cè)。結(jié)果顯示，139株大腸桿菌分離株對(duì)氨芐青霉素、磺胺甲基異噁唑、慶大霉素、四環(huán)素、諾氟沙星、卡那霉素、鏈霉素、先鋒IV等13種抗生素的耐藥率超過(guò)了50%，尤其是對(duì)強(qiáng)力霉素、氨芐青霉素、四環(huán)素、鏈霉素、磺胺甲基異噁唑及先鋒IV的耐藥性都超過(guò)了90%。泰州地區(qū)黃羽肉雞大腸桿菌耐藥性性非常嚴(yán)重，只有阿奇霉素、諾氟沙星、左旋氧氟沙星中度敏感或敏感，臨床治療試驗(yàn)表明諾氟沙星對(duì)該地區(qū)的大腸桿菌病起到了很好的控制作用。該試驗(yàn)為江蘇省部分地區(qū)防治雞大腸桿菌病提供了一定的用藥參考。

關(guān)鍵詞：禽致病性大腸桿菌（APEC）;藥敏試驗(yàn);耐藥性

中圖分類號(hào)：S858.31? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A? ? ? ? 文章編號(hào)：1007-273X（2021）02-0005-02

在家禽飼養(yǎng)中，禽大腸桿菌病是一種比較常見(jiàn)的疾病，該病主要由禽致病性大腸桿菌（APEC）引起，臨診病型主要有肉芽腫、大腸桿菌性敗血癥、氣囊炎、腫頭綜合征、腹膜炎及輸卵管炎和黃囊感染等，不僅傳播速度快，而且傳播范圍非常廣，發(fā)病率一般高達(dá)11%～69%，死亡率一般在3.8%～20.0%[1]，對(duì)我國(guó)養(yǎng)禽業(yè)的發(fā)展造成了嚴(yán)重的影響。目前針對(duì)大腸桿菌一般采用藥物和疫苗進(jìn)行控制，臨床上雞大腸桿菌一般用藥物進(jìn)行預(yù)防和治療[2]，為更合理地防治該病，要進(jìn)行藥敏試驗(yàn)并注意交替輪換使用藥物，避免病原菌產(chǎn)生抗藥性[3]。本研究以在江蘇省不同地區(qū)分離到的黃羽肉雞139株大腸桿菌分離株為試驗(yàn)菌株，對(duì)菌株針對(duì)15種常用藥物敏感性進(jìn)行研究，同時(shí)對(duì)其發(fā)展趨勢(shì)進(jìn)行分析，從而為禽大腸桿菌病臨床用藥提供試驗(yàn)數(shù)據(jù)參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌株來(lái)源 試驗(yàn)菌株為從江蘇省不同地區(qū)（南通、泰州、常州）養(yǎng)雞場(chǎng)分離到的139株大腸桿菌菌株。

1.1.2 培養(yǎng)基 LB培養(yǎng)基，OXOID公司;瓊脂粉，中國(guó)國(guó)藥（集團(tuán)）上海化學(xué)試劑公司。

1.1.3 藥敏紙片 氯霉素（30? μg/片）、阿奇霉素（15 μg /片）、鏈霉素（10 μg /片）、四環(huán)素（30 μg/片）、諾氟沙星/氟哌酸（10 μg /片）、慶大霉素（10 μg /片）、卡那霉素（30 μg /片）、頭孢拉定/先鋒IV（30 μg /片）、左旋氧氟沙星（5 μg /片）、氟苯尼考（30 μg /片）、氨芐青霉素/氨芐西林（10 μg /片）、強(qiáng)力霉素/多西環(huán)素 （30 μg /片）、多粘菌素B（300 IU）、磺胺甲基異惡唑（300 μg /片）、新霉素（30 μg /片）均從杭州微生物試劑有限公司購(gòu)入。

1.1.4 試驗(yàn)黃羽肉雞場(chǎng)養(yǎng)殖和臨床發(fā)病情況 選取泰州市某正在發(fā)生大腸桿菌病的黃羽肉雞場(chǎng)2個(gè)，養(yǎng)殖場(chǎng)1的養(yǎng)殖情況：養(yǎng)殖量4 800羽，35日齡，用藥前病雞數(shù)量245羽，用藥前死亡57羽。養(yǎng)殖場(chǎng)2的養(yǎng)殖情況：養(yǎng)殖量4 500羽，32日齡，用藥前病雞數(shù)量156羽，用藥前死亡36羽。

1.2 方法

1.2.1 藥敏試驗(yàn) 根據(jù)美國(guó)國(guó)家臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)（National committee for clinical laboratory standards，NCCLS）2007年發(fā)布的標(biāo)準(zhǔn)選擇抗生素和進(jìn)行實(shí)驗(yàn)與判定。

1.2.2 治療給藥方法和療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 選取敏感藥物，集中給藥和飲水，全天藥物分別于上午、下午2次進(jìn)行集中投藥，按照1 g藥加 5 kg水的比例連續(xù)投藥3 d，期間如出現(xiàn)死亡，進(jìn)行大腸桿菌分離培養(yǎng)，陽(yáng)性則判斷為感染死亡;投藥后雞群不再死亡、食欲及精神恢復(fù)正常，大腸桿菌病臨床癥狀消失則視為治愈。根據(jù)死亡雞只數(shù)計(jì)算死亡率，結(jié)束后根據(jù)實(shí)際治愈數(shù)量計(jì)算治愈率[4]。

2 結(jié)果與分析

本次試驗(yàn)使用15種抗生素檢測(cè)139株APEC分離株藥物敏感性，具體結(jié)果見(jiàn)表1。15種供試抗生素中，APEC分離株對(duì)其中13種（四環(huán)素、磺胺甲基異噁唑、慶大霉素、氯霉素、諾氟沙星、卡那霉素、新霉素、氨芐青霉素、先鋒IV、左旋氧氟沙星、氟苯尼考、強(qiáng)力霉素、鏈霉素）耐藥性高于50%，特別是對(duì)氨芐青霉素、四環(huán)素、先鋒IV、磺胺甲基異噁唑、強(qiáng)力霉素、鏈霉素的耐藥率均已超過(guò)90%。

根據(jù)本次藥敏試驗(yàn)結(jié)果判斷，30株南通地區(qū)分離出來(lái)的大腸桿菌中，大部分對(duì)強(qiáng)力霉素、氨芐青霉素、氯霉素、四環(huán)素、鏈霉素、先鋒IV、磺胺甲基異噁唑等耐藥，對(duì)多粘菌素等敏感度為中等，對(duì)慶大霉素敏感度較高。66株常州地區(qū)分離的大腸桿菌對(duì)多粘菌素敏感度較高，對(duì)其他藥物的敏感性較低或耐藥，尤其是氨芐青霉素、四環(huán)素、先鋒IV、強(qiáng)力霉素、磺胺甲基異噁唑等均為100%耐藥性。43株泰州地區(qū)分離的大腸桿菌對(duì)四環(huán)素、強(qiáng)力霉素、先鋒IV、磺胺甲基異噁唑、鏈霉素、氯霉素、氨芐青霉素、新霉素、慶大霉素、卡那霉素、氟苯尼考、多粘菌素等表現(xiàn)出耐藥性;其中多數(shù)菌株對(duì)諾氟沙星、左旋氧氟沙星及阿奇霉素為中度敏感或敏感，根據(jù)此結(jié)果，泰州地區(qū)雞場(chǎng)臨床用藥可選擇諾氟沙星，其治療結(jié)果見(jiàn)表2。結(jié)果顯示，泰州市2個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)用藥后死亡率分別為 0.65%、0.44%，死亡率明顯降低，說(shuō)明諾氟沙星對(duì)大腸桿菌病發(fā)揮了理想的治療效果。

3 分析與討論

本次藥敏試驗(yàn)的 139 株大腸桿菌菌株分別從南通、常州和泰州感染大腸桿菌病的病例中分離而來(lái)，結(jié)果顯示，目前該地區(qū)禽致病性大腸桿菌已經(jīng)表現(xiàn)出相當(dāng)突出的耐藥性，在選擇藥物預(yù)防和治療禽大腸桿菌病的范圍越來(lái)越窄，以前治療表現(xiàn)較好的藥物目前已很難保證療效能夠繼續(xù)保持，通過(guò)研究某一地區(qū)雞源性大腸桿菌耐藥性，能夠進(jìn)一步明確該地區(qū)細(xì)菌耐藥性現(xiàn)狀，有利于更好地對(duì)雞大腸桿菌病防治藥物進(jìn)行篩選，從而指導(dǎo)實(shí)際生產(chǎn)[5]。因此本試驗(yàn)結(jié)果具有一定臨床參考價(jià)值。

本次試驗(yàn)根據(jù)抗菌藥所屬類別、針對(duì)的細(xì)菌類型和臨床使用情況，選定了15 種抗生素，這些抗生素在針對(duì)革蘭氏陰性菌感染方面都具有一定的代表性。試驗(yàn)結(jié)果顯示，大腸桿菌在臨床上耐藥現(xiàn)象已十分嚴(yán)重，這將會(huì)嚴(yán)重影響到家禽養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。因此有必要大規(guī)模普查臨床大腸桿菌耐藥情況，從而對(duì)臨床用藥進(jìn)行相應(yīng)的指導(dǎo)。如果在臨床實(shí)際用藥中能夠進(jìn)行交叉、聯(lián)合、輪替用藥，提高治療療程的合理性，就能夠有效降低大腸桿菌出現(xiàn)耐藥性的機(jī)率，從而使防治效果得到提升。

本次臨床治療試驗(yàn)證明，諾氟沙星對(duì)該場(chǎng)大腸桿菌病起到較好的控制效果，證明藥敏試驗(yàn)結(jié)果與臨床治療效果符合，但臨床方面仍要注意診斷結(jié)果的準(zhǔn)確性及藥品用法、用量和療程的正確性等，避免出現(xiàn)耐藥性。

參考文獻(xiàn)：

[1] 陳 祥，高 崧，焦新安，等. 禽病原性大腸桿菌的致病機(jī)理[J].中國(guó)家禽，2007， 29（18）：54-57.

[2] BOGAARD A . Colibacillosis in poultry[J]. Tijdschr diergeneeskd，1992， 117（4）：124-125.

[3] 郝智慧，肖希龍，邱 梅，等.不同區(qū)域雞大腸桿菌對(duì)抗菌藥的耐藥性比較[J].中國(guó)獸醫(yī)科學(xué)，2009，39（1）：84-88.

[4] 王寶杰.濰坊市肉雞大腸桿菌病的流行病學(xué)調(diào)查及藥物防治研究[D].山東泰安：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)，2008.

[5] 周廷宣，冉茂菊.雞致病性大腸桿菌藥敏實(shí)驗(yàn)[J].中國(guó)畜禽傳染病，1995 （2）：57-58.