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        黔產(chǎn)迎春花質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

        2021-05-23 12:20:27姜蓮程韜王影超舒柯
        關(guān)鍵詞:總黃酮含量測定迎春花

        姜蓮 程韜 王影超 舒柯

        【摘 要】 目的:為提升黔產(chǎn)迎春花藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供參考。方法:本研究采用顯微鑒別及薄層色譜鑒別法對迎春花進(jìn)行定性鑒別,同時根據(jù)《中國藥典》2015年版規(guī)定的方法對其水分、總灰分、酸不溶性灰分及浸出物進(jìn)行定量測定,以總黃酮為指標(biāo),通過系統(tǒng)的方法學(xué)考察,建立迎春花藥材的UV含量測定方法。結(jié)果:迎春花藥材顯微特征、薄層色譜斑點均清晰明顯。3批迎春花藥材樣品的水分測定結(jié)果為12.1%~13.5%,總灰分測定結(jié)果為5.0%~5.8%,酸不溶性灰分測定結(jié)果為0.7%~1.2%,浸出物測定結(jié)果為26.1%~30.2%,3批迎春花藥材中總黃酮的含量為2.50%~3.56%。結(jié)論:本研究為提高迎春花藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供參考。

        【關(guān)鍵詞】 迎春花;定性鑒別;總黃酮;含量測定

        【中圖分類號】R282?? 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A??? 【文章編號】1007-8517(2021)05-0026-04

        Quality Standard for Jasminum Nudiflorum from Guizhou Province

        JIANG Lian CHENG Tao WANG Yingchao* SHU Ke

        Guizhou Institute for Food and Drug Control,Guiyang 550004,China

        Abstract:Objective To provide reference for improving the quality standard of Jasminum nudiflorum from Guizhou.Methods Jasminum nudiflorum was qualitatively identified by microscopic characteristics and TLC methods,and referring to Chinese Pharmacopoeia of 2015 edition,water content,total ash,acid-insoluble ash and extract were also determined.Using Total flavonoids as indicators,the content determination with UV in Total flavonoids was established through systematic methodological investigations respectively.Results The microscopic characteristics and the spots of TLC were clear and evident.The moisture,total ash,acid-insoluble ash and extract of 3 Jasminum nudiflorum samples varied in the ranges of 12.1%~13.5%,5.0%~5.8%,0.7%~1.2%,and 26.1%~30.2%,the contents of Total flavonoids in 3 batches of Jasminum nudiflorum were 2.50%~3.56%.Conclusion This study provides a reference for improving the quality standard of Jasminum nudiflorum.

        Keywords:Jasminum Nudiflorum;Qualitative Identification;Total Flavonoids;Content Determination

        迎春花,又稱金腰帶、黃素馨,為木犀科植物迎春花Jasminum nudiflorum Lindl.的干燥葉和花。春、夏、秋三季均可采摘,晾干或曬干。藥用價值在我國歷史悠久,主要功效為解毒消腫、清熱利尿、止血止痛,用于發(fā)熱頭痛、小便熱痛、跌撲損傷、外傷出血、口瘡、癰癤腫痛、下肢潰瘍[1]。產(chǎn)于貴州思南、貴陽、安順等地。我國山西、陜西、甘肅、山東、河南、江蘇、四川、云南也有分布[2]。王佩珩等[3-4]對迎春花的化合物進(jìn)行分析,得到裂環(huán)烯醚萜類化合物、黃酮類化合物、迎春花黃色素、多糖類化合物、揮發(fā)油類和脂肪酸類等。為提高迎春花的質(zhì)量控制水平,本實驗建立顯微鑒別、薄層鑒別、水分、總灰分、酸不溶性灰分、浸出物及總黃酮的含量測定,為迎春花的研究及質(zhì)量控制提供依據(jù)。

        1 儀器與材料

        1.1 儀器 奧林巴斯BX51型顯微鏡(OLYMPUS),雙光束紫外可見分光光度計TU-1901(北京普析通用儀器有限責(zé)任公司),電子調(diào)溫電熱套98-I-C(天津泰斯特儀器有限公司),四用式暗箱紫外分析儀ZF-8(驥輝分析儀器(上海)有限公司)。

        1.2 材料 3批迎春花藥材均自貴州,分別產(chǎn)至貴州安順(批號:180801)、貴州貴陽(批號:180802)、貴州貴陽(批號:180803),樣品及對照藥材經(jīng)貴州省食品藥品檢驗所標(biāo)本館熊慧林老師檢定,均為迎春花,并存于貴州省食品藥品檢驗所;蘆?。?10752-201514)來源于中國食品藥品檢定研究院;硅膠G薄層板:青島海洋化工廠分廠生產(chǎn)的硅膠G薄層板(批號:20170408)及自制硅膠G薄層板;試劑:稀甘油、水合氯醛試液、三氯甲烷、甲醇、硫酸、乙醇均為分析純。

        2 方法與結(jié)果

        2.1 顯微鑒別 取本品內(nèi)容物置顯微鏡下觀察:本品粉末淡棕色。葉表皮細(xì)胞含砂晶,有氣孔;木纖維常見,直徑5~30 μm,花粉粒圓形、類圓形、橢圓形,直徑20~45 μm,外壁薄,壁上偶見壁溝,花粉粒表面具網(wǎng)格狀紋理。

        2.2 薄層鑒別 取本品粉末2 g,加70%乙醇30 mL,加熱回流1 h,放冷,濾過,濾液蒸干,殘渣加甲醇1 mL使溶解,作為供試品溶液。另取迎春花對照藥材2 g,同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(通則0502)試驗,吸取上述兩種溶液各5 μL,分別點于同一硅膠G薄層板上,以三氯甲烷-甲醇-水(75∶35∶4)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%硫酸乙醇溶液,在105 ℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中,在與對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點。如圖2所示。

        2.3 檢查

        2.3.1 水分 按《中國藥典》2015年版四部通則0832第二法,測定并計算3批迎春花的水分含量(%),平行操作2次,取平均值作為結(jié)果,結(jié)果:3批迎春花的水分為12.1%~13.5%。樣品測定結(jié)果為見表1。

        2.3.2 總灰分 按《中國藥典》2015年版四部通則2302總灰分測定法,測定并計算3批迎春花的總灰分含量(%),平行操作2次,取平均值作為結(jié)果,結(jié)果:3批迎春花的總灰分為5.0%~5.8%。樣品測定結(jié)果為見表1。

        2.3.3 酸不溶性灰分 按《中國藥典》2015年版四部通則2302總灰分測定法,測定并計算3批迎春花的酸不溶性灰分含量(%),平行操作2次,取平均值作為結(jié)果,結(jié)果:3批迎春花的酸不溶性灰分為0.7%~1.2%。樣品測定結(jié)果為見表1。

        2.4 浸出物 按《中國藥典》2015年版四部通則2201浸出物測定法進(jìn)行測定,分別用乙醇、50%乙醇、水作為溶劑,熱浸法和冷浸法分別測定浸出物,平行操作兩次,取平均值作為結(jié)果。根據(jù)測定結(jié)果,選擇浸出物含量最高的方法作為浸出物方法,故浸出物測定法為以稀乙醇為溶劑的冷浸法,其測定結(jié)果見表2。

        2.5 總黃酮的含量測定[5]

        2.5.1 供試品溶液的制備 取迎春花粗粉約1.2 g,精密稱定,精密加入50 mL 70%乙醇,置具塞錐形瓶中,密塞,稱定重量,加熱回流40 min,放冷,再次稱定重量,用70%乙醇不租減失的重量,搖勻,濾過,取續(xù)濾液即得。

        2.5.2 對照品溶液的制備 取蘆丁對照品20 mg,精密稱定,置50 mL量瓶中,加70%乙醇適量,置水浴上微熱使溶解,放冷,加70%乙醇至刻度,搖勻。精密量取25 mL,置50 mL量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻,即得(每1 mL含蘆丁0.2 mg)。

        2.5.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備及線性關(guān)系考察 精密量取對照品溶液1 mL、2 mL、3 mL、4 mL、5 mL、6 mL,分別置25 mL量瓶中,各加水至6 mL,加5%亞硝酸鈉溶液1 mL,混勻,放置6 min,再加10%硝酸鋁溶液1 mL,搖勻,放置6 min。加氫氧化鈉試液10 mL,再加水稀釋至刻度,搖勻,放置15 min,以相應(yīng)試劑為空白,照紫外-可見分光光度法(通則0401),在500 nm的波長處測定吸光度,以吸光度為縱坐標(biāo),濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(如圖3所示),得回歸方程:Y=0.0133X-0.0047(r=0.9999),在7.909~47.454 μg蘆丁與吸光度之間線性關(guān)系良好。

        2.5.4 測定法 精密量取供試品溶液1 mL,置25 mL量瓶中,加70%乙醇至6 mL,照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項下的方法,自“加亞硝酸鈉溶液1 mL”起,依法測定吸光度,同時取供試品溶液1 mL,除不加氫氧化鈉試液外,其余同上操作,作為空白,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中含蘆丁的重量(mg),計算,即得。

        2.5.5 精密度、穩(wěn)定性與重復(fù)性試驗 取對照品溶液在500 nm的波長處測定吸光度,重復(fù)測定6次,RSD=0.2%,表明精密度良好。取供試品溶液,按“2.5.4”項方法測定吸光度,連續(xù)測定120 min,計算得含量的RSD=0.2%,表明穩(wěn)定性良好。取同一批迎春花藥材共6份,每份1.2 g,精密稱定,按“2.5.1”項方法制備供試品并測定含量,計算得平均含量為2.50%,RSD=0.1%,表明重復(fù)性良好。見表3。

        2.5.6 準(zhǔn)確度試驗 精密稱取已知含量迎春花粉末0.6 g,平行操作6份,分別精密加入含蘆丁對照品(0.2967 mg/mL)50 mL,按“2.5.1”項制備供試品溶液,并按“2.5.4”方法測定吸收光,計算回收率。結(jié)果回收率為101.5%,RSD=0.3%,表明方法的準(zhǔn)確度良好。見表4。

        2.5.7 樣品測定 取3批迎春花樣品,按“2.5.1”“2.5.4”項下方法制備供試品溶液并測定吸光度,測定總黃酮的含量,結(jié)果見表5。

        3 結(jié)果與討論

        迎春花為貴州習(xí)用藥材,其現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量控制項目較少,文獻(xiàn)關(guān)于迎春花質(zhì)量研究也較少,本研究從定性、定量對迎春花藥材進(jìn)行研究,定性研究中顯微特征明顯,薄層色譜分離效果較好,重現(xiàn)性佳, 水分、灰分、浸出物測定方法可行。

        迎春花的花、葉中含有較為豐富的黃酮類,已有研究證實迎春花提取液具有很好的抗心律失常、鎮(zhèn)痛鎮(zhèn)靜、耐缺氧等作用,故含量以總黃酮為指標(biāo),分別考察了不同的提取方式(超聲、回流),不同的提取溶劑(乙醇、70%乙醇、稀乙醇、25%乙醇),不同的提取時間(回流30 min、40 min、50 min),結(jié)果文中方法提取完全,重現(xiàn)性好,準(zhǔn)確度高,方法可行。

        隨著中藥現(xiàn)代化和國際化,民族藥資源的開發(fā)利用、保護(hù)極其重要,應(yīng)更好地保證該品種的合理開發(fā)利用,藥材安全有效,質(zhì)量可控穩(wěn)定。本研究可為迎春花的質(zhì)量控制提供參考依據(jù)。

        參考文獻(xiàn)

        [1]楊偉波,盧成瑛,陳功錫,等.迎春花研究進(jìn)展[J]. 食品科學(xué), 2008(4):474-477.

        [2]《貴州省植物志》編輯委員會.貴州植物志(第四卷)[M].貴陽:貴州人民出版社,1982:480.

        [3]王佩珩,周宜君,張洪志,等.迎春花的有效化學(xué)成分及其生物學(xué)活性研究概況[J]. 黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué),2015(6):152-155.

        [4]盧成瑛,楊偉波,黃早成,等.迎春花葉抑菌活性物研究[J].食品科學(xué),2007 (12):43-46.

        [5]任雪峰,吳冬青,王永生,等.超聲波法提取迎春花總黃酮含量的[J]. 光譜實驗室,2010(1):250-253.

        (收稿日期:2020-09-05 編輯:劉斌)

        基金項目:貴州省中藥材、民族藥飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提高項目(No.DBYC52268)。

        作者簡介:姜蓮(1984-),女,漢族,本科,主管藥師,研究方向為中藥檢驗及質(zhì)量控制。E-mail:149853532@qq.com

        通信作者:王影超(1987-),女,漢族,本科,主管藥師,研究方向為中藥檢驗及質(zhì)量控制。E-mail:447406621@qq.com

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