王愛(ài)霞，張志芳，王春平

（1.安陽(yáng)市人民醫(yī)院內(nèi)分泌科，河南 安陽(yáng) 455000；2.北京火箭軍總醫(yī)院內(nèi)分泌科，中國(guó) 北京 100088）

糖尿病腎病（DN）是糖尿病患者微血管并發(fā)癥之一,在長(zhǎng)期空腹血糖控制不佳的人群中，DN 的發(fā)病率可顯著上升[1，2]。分子標(biāo)志物能夠在DN 的診療過(guò)程中發(fā)揮作用,其能夠?yàn)榇x系統(tǒng)疾病或者微血管并發(fā)癥的病情評(píng)估提供參考。白介素-18 （IL-18）是白細(xì)胞介素家族成員，其能夠通過(guò)影響到炎癥反應(yīng)的激活，提高機(jī)體免疫性因子的紊亂程度，最終促進(jìn)腎臟基底膜組織的損傷[3]；單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）是趨化相關(guān)因子，其對(duì)于下游趨化因子的富集作用，能夠顯著加劇腎臟濾過(guò)膜的損害[4]。為了揭示 IL-18 和 MCP-1 的表達(dá)與 DN 患者的病情關(guān)系，從而為臨床上DN 的診療提供參考，本次研究選擇了2017 年9 月-2018 年12 月在我院治療的2 型糖尿病患者180 例，探討了IL-18和MCP-1 的表達(dá)與DN 的病情關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2017 年 9 月-2018 年 12 月在我院治療的2 型糖尿病患者180 例,根據(jù)尿微量白蛋白排泄率（UARE）分為 3 組,正常蛋白尿組（UARE ＜30mg/24h）共 60 例，其中男 30 例，女 30 例，年齡41～73 歲,平均 52.13±4.79 歲;微量蛋白尿組(UARE在 30～300mg/24h)共 60 例，男 33 例、女 27 例，年齡 41～73 歲，平均 52.06±4.82 歲。大量蛋白尿組（UARE＞300 mg/24h）共 60 例，男 31 例、女 29 例，年齡 41～73 歲，平均 51.96±4.80 歲。病 2 型糖尿病患者納入標(biāo)準(zhǔn)：⑴2 型糖尿病診斷符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)內(nèi)分泌學(xué)分會(huì)制定的標(biāo)準(zhǔn)[5]；⑵檢測(cè)前未使用胰島素、胰島素類(lèi)似物等；⑶受試者知情同意。2 型糖尿病腎病患者納入標(biāo)準(zhǔn)：⑴尿蛋白排 泄率＞30 mg/24 h，其他同上。兩組患者的排除標(biāo)準(zhǔn)：⑴合并有惡性腫瘤、自身免疫性疾病、甲狀腺疾病等其他疾病;⑵患有糖尿病酮癥、糖尿病酸中毒等并發(fā)癥患者；⑶高血壓腎病,腎結(jié)石。同時(shí)選取健康志愿者60 例作為對(duì)照組，其中男性32 例，女性28 例，年齡41～73歲，平均年齡51.79±4.79 歲。各組受試者一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法 采用外周靜脈血 3～5ml，4500r/min，6cm 半徑，離心10min 后，取上清采用邁瑞醫(yī)療生產(chǎn)的邁瑞 BS-600 分析儀進(jìn)行 Scr、BUN 及 HbA1c水平檢測(cè)，全自動(dòng)生化檢測(cè)試劑盒Biotic 購(gòu)自華美生物公司；采用 ELISA 法進(jìn)行 IL-18、MCP-1 的檢測(cè)，BioTek 酶標(biāo)儀購(gòu)自美國(guó)伯騰儀器有限公司，試劑盒由美國(guó)R&D 公司生產(chǎn)，操作參照相應(yīng)說(shuō)明書(shū)。同時(shí)收集患者晨尿 5ml 進(jìn)行 IL-18、MCP-1 的檢測(cè)，操作同上。所有檢測(cè)均進(jìn)行3 次，并取均值作為最終結(jié)果。選用高效液相色譜法檢測(cè)患者HbA1c 水平。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS19.0 軟件，計(jì)量資料采用（±s)表示，多組間比較使用方差分析，兩兩比較采用LSD-t 檢驗(yàn)； 計(jì)數(shù)資料比較使用χ2檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn) α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 各組患者血清內(nèi)IL-18、MCP-1 水平檢測(cè) 對(duì)各組患者血清中的IL-18、MCP-1 水平檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)糖尿病患者的IL-18、MCP-1 水平表達(dá)明顯高于對(duì)照組患者，同時(shí)糖尿病腎病越嚴(yán)重,其血清中的IL-18、MCP-1 水平越高（P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 各組患者血清IL-18、MCP-1 水平比較

2.2 各組患者尿液內(nèi)IL-18、MCP-1 水平檢測(cè) 對(duì)各組患者尿液中的IL-18、MCP-1 水平檢測(cè), 發(fā)現(xiàn)與血清內(nèi)表達(dá)有相同的結(jié)論。糖尿病患者的IL-18、MCP-1 水平表達(dá)明顯高于對(duì)照組患者，同時(shí)糖尿病腎病越嚴(yán)重, 其尿液中的IL-18、MCP-1 水平越高（P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 各組患者血清IL-18、MCP-1 水平比較

2.3 各組患者的腎功能相關(guān)指標(biāo)比較 對(duì)各組患者腎功能指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè),發(fā)現(xiàn)糖尿病患者的血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）及糖化血紅蛋白（HbA1c）水平表達(dá)明顯高于對(duì)照組患者，同時(shí)糖尿病腎病越嚴(yán)重, 其血清中的 Scr、BUN 及 HbA1c水平越高 （P＜0.05），見(jiàn)表3。

2.3 糖尿病腎病與IL-18、MCP-1 回歸分析 以有無(wú)糖尿病腎病為應(yīng)變量,有糖尿病腎病值為1,無(wú)糖尿病腎病賦值為0, 以IL-18 和MCP-1 為自變量,進(jìn)行 Logistic 回歸分析,結(jié)果顯示，IL-18 和MCP-1與糖尿病腎病的發(fā)生有關(guān)。見(jiàn)表4。

表3 各組患者腎功能相關(guān)水平比較

表4 糖尿病腎病影響因素的Logistic回歸分析

3 討論

DN 導(dǎo)致的糖尿病患者腎功能衰竭的比例正逐年上升,并且其導(dǎo)致的終末期腎衰竭的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)也隨著年齡的增加而上升[6]。而DN 病情評(píng)估則可為臨床上DN 的免疫治療、 激素治療提供有效參考，這將提高早期臨床干預(yù)介入的可能性，從而為DN 患者遠(yuǎn)期腎功能的改善提供契機(jī)[7,8]。尿蛋白或者24 小時(shí)尿蛋白定量是DN 病情評(píng)估傳統(tǒng)指標(biāo)，可有效提示患者腎功能損傷程度及腎小球?yàn)V過(guò)膜的損傷情況，但尿蛋白定量受患者飲食攝入習(xí)慣、機(jī)體代謝消耗的影響,其并不具有早期的預(yù)測(cè)價(jià)值[9,10]。IL-18 和MCP-1 等血清標(biāo)志物能夠在腎臟損傷的早期即可發(fā)生顯著的改變，通過(guò)檢測(cè)外周血中相關(guān)分子標(biāo)志物，能夠?yàn)榕R床上DN 的診療提供新型的輔助參考指標(biāo)。

IL-18 是白細(xì)胞介素相關(guān)家族成員，其能夠干預(yù)到中性粒細(xì)胞的富集過(guò)程,同時(shí)還能夠影響到中性粒細(xì)胞酶的激活,加劇其對(duì)于濾過(guò)膜電荷屏障的破壞。IL-18 對(duì)于抗原提呈細(xì)胞或者樹(shù)突狀T 淋巴細(xì)胞的調(diào)控作用,能夠加劇自然殺傷性T 淋巴細(xì)胞的激活，促進(jìn)其對(duì)于自身組織的吞噬[11]；MCP-1 是趨化調(diào)控因子，其對(duì)于單核細(xì)胞的趨化調(diào)控作用，能夠誘導(dǎo)單核細(xì)胞的浸潤(rùn)，加劇其對(duì)于腎小球基底膜組織的損傷[12,13]。迄今為止有部分研究者探討了MCP-1 在DN 患者中的表達(dá)情況，認(rèn)為MCP-1能夠影響到DN 患者晚期腎功能水平[14]，但對(duì)于不同蛋白尿水平DN 患者中IL-18 和MCP-1 的具體探討不足。

在糖尿病腎病患者中,其血清中IL-18 和MCP-1 的表達(dá)濃度明顯高于對(duì)照組，統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著，表明IL-18 和MCP-1 在DN 的病情進(jìn)展中具有一定的影響。IL-18 和MCP-1 對(duì)于DN 的病情影響，主要在于IL-18 和MCP-1 能夠影響到炎癥信號(hào)通路的激活,促進(jìn)了腎臟濾過(guò)膜電荷屏障和生理屏障的破壞,從而導(dǎo)致尿蛋白的漏出。特別是MCP-1 的上升對(duì)于單核細(xì)胞或者巨噬細(xì)胞的誘導(dǎo)激活,能夠加劇氧化還原酶的釋放,從而導(dǎo)致濾過(guò)膜足細(xì)胞的凋亡，導(dǎo)致濾過(guò)膜孔隙的增大。在其他的相關(guān)研究中，也可以發(fā)現(xiàn)IL-18 的表達(dá)上升，如趙延香等[15]研究者認(rèn)為，在DN 患者中，血清IL-18 的表達(dá)濃度可隨著糖尿病并發(fā)癥的增加而上升,特別是在下肢微血管病變或者腎臟微血管病變的患者中，IL-18 表達(dá)濃度的上升更為顯著。在DN 患者的尿液中, 同樣可以發(fā)現(xiàn)IL-18 和MCP-1 的表達(dá)上升趨勢(shì)，特別是在尿蛋白較為嚴(yán)重、 整體病情加重的DN 患者中,尿液中IL-18 和MCP-1 的表達(dá)上升更為顯著。尿蛋白或者病情的加重對(duì)于IL-18 和MCP-1 的影響, 主要由于尿蛋白的滲出能夠加劇機(jī)體營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)的惡化,誘導(dǎo)腎小管或者集合管的損傷，從而導(dǎo)致IL-18 和MCP-1 的滲出增加。糖尿病患者的血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）及糖化血紅蛋白（HbA1c）水平明顯上升，高于對(duì)照組，并且糖尿病腎病越嚴(yán)重，其血清中的Scr、BUN 及HbA1c 水平越高,這主要由于長(zhǎng)期血糖紊亂導(dǎo)致的腎功能的損害有關(guān)。危險(xiǎn)因素分析可見(jiàn)，IL-18 和 MCP-1 與糖尿病腎病的發(fā)生有關(guān), 進(jìn)一步提示了IL-18 和MCP-1 的表達(dá)與DN 患者的病情危險(xiǎn)關(guān)系。臨床上對(duì)于IL-18 和MCP-1 表達(dá)濃度較高的患者，應(yīng)警惕其發(fā)生DN 的可能。

綜上所述，糖尿病腎病患者存在明顯的IL-18和 MCP-1 異常表達(dá)情況，IL-18 和 MCP-1 或可成為糖尿病腎病早期篩查新指標(biāo)。