艾敏，高嵐

（1.河南省濮陽市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南 濮陽 457000； 2.河南省人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南 鄭州 450000）

腦血管性癡呆（Vascular dementia，VD）主要因腦血管因素致使腦組織損傷而引起，研究指出，在中國VD 的發(fā)病率為1.1%～3.0%，且呈現(xiàn)出逐漸升高趨勢[1]。早期明確該病發(fā)病機(jī)制并據(jù)此進(jìn)行針對(duì)性干預(yù)有利于延緩病程進(jìn)展，提升患者生活質(zhì)量。有關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，血管內(nèi)皮損傷、炎癥反應(yīng)于癡呆發(fā)生、發(fā)展中扮演著重要角色[2,3]。一氧化氮（NO）屬血管內(nèi)皮活性物質(zhì)，含量與血管內(nèi)皮功能狀況密切相關(guān)?？扇苄约?xì)胞間黏附分子-1（sICAM-1）為內(nèi)皮細(xì)胞遭受刺激時(shí)釋放的炎性因子，可反映炎癥反應(yīng)狀況，且與腦損傷密切相關(guān)[4]。核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體蛋白3（NLRP3）屬人體內(nèi)重要蛋白質(zhì)，含量與機(jī)體炎癥反應(yīng)有關(guān)[5]。但目前臨床關(guān)于 VD 患者血清 NO、sICAM-1、NLRP3 含量及其與患者病情、預(yù)后關(guān)系的研究報(bào)道尚較為鮮見，本研究對(duì)其進(jìn)行分析，報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取 2017 年 10 月-2019 年 10 月我院94 例VD 患者為病例組，同期94 例健康體檢者為對(duì)照組。納入標(biāo)準(zhǔn):⑴病例組符合《神經(jīng)病學(xué)》[6]中VD 有關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)，存在腦血管病變證據(jù)，病情穩(wěn)定，MMSE 評(píng)分≤24 分； ⑵對(duì)照組為健康體檢者；⑶2 組文化程度均在中學(xué)及以上，知曉本研究，簽訂知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：⑴合并嚴(yán)重抑郁癥；⑵存在明顯自殘或自殺傾向；⑶合并肝、肺、腎等臟器功能嚴(yán)重障礙； ⑷合并惡性腫瘤、 急慢性感染；⑸合并其他影響血管內(nèi)皮功能、炎癥因子指標(biāo)表達(dá)疾病； ⑹因其他非腦血管原因?qū)е抡J(rèn)知功能障礙。其中病例組男 51 例，女 43 例；年齡 47～84歲，平均 62.90±7.06 歲；病程 3～12 年，平均 6.19±1.25 年；吸煙 25 例，飲酒 22 例，肥胖 13 例；合并高脂血癥32 例，糖尿病20 例，冠心病21 例，高血壓 44 例； 簡易精神狀態(tài)量表 （MMSE） 評(píng)分 6～24分，平均 13.28±4.19 分。對(duì)照組男 49 例，女 45 例；年齡 47～83 歲，平均 63.47±6.82 歲；吸煙 22 例，飲酒 20 例，肥胖 12 例。2 組一般資料（性別、年齡與吸煙、飲酒、肥胖人數(shù)比例等）均衡可比（P＞0.05）。本研究經(jīng)我院倫理委員會(huì)同意。

1.2 方法 采集所有受試者5ml 清晨空腹（禁食12 h）靜脈血樣，3000r/min 離心 10 min 取血清，以酶聯(lián)免疫吸附法測定血清NO、sICAM-1、NLRP3 含量，檢測試劑盒均購于南京建成生物工程研究所，有關(guān)操作嚴(yán)格按試劑盒說明書進(jìn)行。

1.3 觀察指標(biāo) ⑴病例組、 對(duì)照組血清 NO、sICAM-1、NLRP3 含量。⑵病例組不同病情評(píng)分（MMSE）患者血清各指標(biāo)含量，病情程度應(yīng)用簡易精神狀態(tài)量表（MMSE）評(píng)價(jià)，分值范圍 0～30 分，分值越高認(rèn)知功能越好。⑶血清各指標(biāo)與VD 患者M(jìn)MSE 評(píng)分關(guān)聯(lián)性。⑷出院后對(duì)病例組患者采取6個(gè)月隨訪，參考日常生活活動(dòng)能力量表（ADL）標(biāo)準(zhǔn)評(píng)估患者預(yù)后狀況，總分100 分，分值越高預(yù)后狀況越好，ADL 評(píng)分 61～99 為Ⅰ級(jí)（輕度）預(yù)后功能障礙，41～60 分為Ⅱ級(jí)（中度）預(yù)后功能障礙，≤40為Ⅲ級(jí)（重度）預(yù)后功能障礙[7]；對(duì)比病例組不同預(yù)后患者一般資料與血清各指標(biāo)含量。⑸觀察VD 患者預(yù)后功能障礙分級(jí)Ⅲ級(jí)的有關(guān)影響因素。⑹分析血清各指標(biāo)對(duì)VD 患者預(yù)后功能障礙分級(jí)Ⅲ級(jí)預(yù)測意義。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 研究數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS22.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，多組間比較應(yīng)用單因素方差分析，兩兩比較采用SNK-q 檢驗(yàn)，兩組間比較應(yīng)用獨(dú)立樣本t 檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以例（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)；相關(guān)性應(yīng)用Pearson 相關(guān)分析； 影響因素應(yīng)用Logistic 回歸分析；預(yù)測價(jià)值應(yīng)用ROC 曲線分析，獲得曲線下面積（AUC）、置信區(qū)間、特異度、敏感度與截?cái)嘀?，不同預(yù)測方案間AUC 比較應(yīng)用DeLong 檢驗(yàn)，聯(lián)合診斷采取Logistic 二元回歸擬合，返回預(yù)測概率logit(p)，將其作為獨(dú)立檢驗(yàn)變量；P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2 組血清 NO、sICAM-1、NLRP3 含量 病例組血清 NO 含量低于對(duì)照組，sICAM-1、NLRP3 含量高于對(duì)照組（P＜0.05）。見表1。

表1 2 組血清 NO、sICAM-1、NLRP3 含量對(duì)比(±s)

表1 2 組血清 NO、sICAM-1、NLRP3 含量對(duì)比(±s)

組別 例數(shù)病例組對(duì)照組94 94 t P NO（μmol/L） sICAM-1（ng/L）49.58±7.26 94.23±13.48 28.274＜0.001 432.37±108.69 319.56±93.74 7.620＜0.001 NLRP3 相對(duì)表達(dá)量8.13±1.04 1.07±0.21 64.515＜0.001

2.2 病例組不同病情評(píng)分患者血清各指標(biāo)水平依據(jù)病例組MMSE 評(píng)分情況，將患者分為MMSE評(píng)分＜10 分、處于 10～19 分、處于 20～24 分 3 類患者。經(jīng)檢驗(yàn)顯示，隨患者M(jìn)MSE 評(píng)分降低其血清NO 含量逐漸降低，sICAM-1、NLRP3 含量逐漸增高（P＜0.05）。見表2。

表2 病例組不同病情評(píng)分患者血清各指標(biāo)水平對(duì)比(±s)

表2 病例組不同病情評(píng)分患者血清各指標(biāo)水平對(duì)比(±s)

組別 例數(shù)20～24 分10～19 分＜10 分24 41 29 F P NO（μmol/L） sICAM-1（ng/L）64.95±8.02 47.53±7.19 39.76±6.30 84.373＜0.001 350.52±102.94 428.03±106.12 506.24±114.76 13.690＜0.001 NLRP3 相對(duì)表達(dá)量5.63±0.96 8.07±1.04 10.28±1.35 11.967＜0.001

2.3 血清各指標(biāo)與 VD 患者 MMSE 評(píng)分關(guān)系Pearson 相關(guān)性分析可知，VD 患者血清 NO （r=0.607、P＜0.001）含量與 MMSE 評(píng)分呈顯著正相關(guān)，sICAM-1（r=-0.763、P＜0.001）、NLRP3(r=-0.611、P＜0.001)含量與MMSE 評(píng)分呈顯著負(fù)相關(guān)。見圖1。

圖1 血清各指標(biāo)與VD患者M(jìn)MSE評(píng)分關(guān)系

2.4 病例組不同預(yù)后患者一般資料與血清各指標(biāo)水平 經(jīng)隨訪，無脫落病例。病例組不同預(yù)后患者年齡、性別、吸煙、飲酒、肥胖人數(shù)比例、合并癥等一般資料相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），預(yù)后功能障礙分級(jí)Ⅲ級(jí)患者M(jìn)MSE 評(píng)分與血清NO 含量低于預(yù)后功能障礙分級(jí)Ⅰ～Ⅱ級(jí)，sICAM-1、NLRP3 含量高于預(yù)后功能障礙分級(jí)Ⅰ～Ⅱ級(jí) （P＜0.05）。見表3。

2.5 VD 患者預(yù)后功能障礙分級(jí)Ⅲ級(jí)的有關(guān)影響因素分析 以VD 患者預(yù)后功能障礙分級(jí)是否為Ⅲ級(jí)作為因變量，患者一般資料、血清NO、sICAM-1、NLRP3 為自變量，采取 Logistic 回歸分析顯示MMSE 評(píng)分、血清NO 為VD 患者預(yù)后功能障礙分級(jí)Ⅲ級(jí)重要保護(hù)因素，血清sICAM-1、NLRP3 為VD 患者預(yù)后功能障礙分級(jí)Ⅲ級(jí)重要危險(xiǎn)因素（P＜0.05）。見表4。

表3 病例組不同預(yù)后患者一般資料與血清各指標(biāo)水平對(duì)比

表4 VD患者預(yù)后功能障礙分級(jí)Ⅲ級(jí)的有關(guān)影響因素分析

2.6 血清各指標(biāo)對(duì)VD 患者預(yù)后功能障礙分級(jí)Ⅲ級(jí)預(yù)測意義 血清NO、sICAM-1、NLRP3 聯(lián)合預(yù)測VD 患者預(yù)后功能障礙分級(jí)Ⅲ級(jí)AUC 高于單一指標(biāo)預(yù)測，聯(lián)合預(yù)測時(shí)特異度為90.67%、 敏感度為73.68%。見表5、圖2。

圖2 血清各指標(biāo)對(duì)VD患者預(yù)后功能障礙分級(jí)Ⅲ級(jí)預(yù)測ROC

3 討論

VD 發(fā)病機(jī)制較復(fù)雜，但近期研究認(rèn)為可能與機(jī)體炎癥反應(yīng)、 血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷等相互作用具有密切關(guān)系[8,9]。NO 為可調(diào)節(jié)血管源性舒張因子，能起到促進(jìn)血管舒張、抑制炎癥產(chǎn)生等作用[10]。本研究發(fā)現(xiàn)，VD 患者血清NO 水平偏低，且與患者M(jìn)MSE 評(píng)分呈正相關(guān)。提示血清NO 在VD 發(fā)病及病情進(jìn)展中具有重要作用。VD 患者常會(huì)出現(xiàn)腦白質(zhì)病變，致使血液循環(huán)內(nèi)非對(duì)稱二甲基精氨酸水平增高，降低腦動(dòng)脈NO 依賴性血管舒張功能，造成血管僵硬度提高，NO 水平降低。有關(guān)研究也報(bào)道，VD 患者NO 出現(xiàn)生成與釋放障礙或者活性降低時(shí)，會(huì)造成血管收縮與血壓增高[11]。而研究證實(shí)，高血壓為腦血管疾病產(chǎn)生認(rèn)知功能障礙的重要危險(xiǎn)因素[12]。本研究發(fā)現(xiàn)，預(yù)后功能障礙分級(jí)Ⅲ級(jí)VD患者血清NO 含量偏低，且回歸分析仍顯示，血清NO 為VD 患者預(yù)后功能障礙分級(jí)Ⅲ級(jí)重要保護(hù)因素。表明血清NO 含量與VD 患者預(yù)后有關(guān)，通過測定其含量可能為患者預(yù)后預(yù)測提供一定參考。

表5 血清各指標(biāo)對(duì)VD患者預(yù)后功能障礙分級(jí)Ⅲ級(jí)預(yù)測意義

sICAM-1 含量高低可反映內(nèi)皮細(xì)胞活化與損傷狀況，張琳等[13]研究報(bào)道，sICAM-1 可介導(dǎo)氧化應(yīng)激反應(yīng)，降低活性氮利用度，致使血管內(nèi)皮細(xì)胞再生能力受損，從而造成腦內(nèi)循環(huán)障礙與腦灌注損傷。本研究發(fā)現(xiàn)，VD 患者血清sICAM-1 含量增高，且增高程度與患者認(rèn)知功能受損程度、預(yù)后有關(guān)。分析機(jī)制可能為ICAM-1 為免疫球蛋白超家族中一員，在正常生理狀態(tài)下，處于低表達(dá)狀態(tài)，當(dāng)機(jī)體出現(xiàn)炎癥反應(yīng)或內(nèi)皮細(xì)胞受損時(shí),其可由內(nèi)皮細(xì)胞釋放并侵入血液循環(huán)，致使組織ICAM-1 與血清 sICAM-1 含量增高。同時(shí)，血清 sICAM-1 含量越高，機(jī)體炎癥因子水平越高，斑塊穩(wěn)定性越差，可能會(huì)加劇腦血管病病情與發(fā)作頻率,加重認(rèn)知功能損傷，影響患者預(yù)后[14]。

NLRP3 為NLRP3 基因所編碼蛋白質(zhì)，本研究發(fā)現(xiàn)，VD 患者血清NLRP3 水平明顯增高，且與患者認(rèn)知功能損傷程度、 預(yù)后有關(guān)。推測原因在于NLRP3 可和半胱天冬酶及凋亡相關(guān)微粒蛋白一同組成NLRP3 炎癥小體，促進(jìn)促炎蛋白酶活化，提高C 反應(yīng)蛋白、白細(xì)胞介素-6、腫瘤壞死因子-α 等多種炎性因子水平,經(jīng)由相關(guān)信號(hào)通路介導(dǎo)炎癥瀑布反應(yīng),進(jìn)而加重局部炎癥反應(yīng)，引起神經(jīng)細(xì)胞凋亡，致使VD 發(fā)病及病情進(jìn)展，影響預(yù)后狀況[15]。本研究繪制ROC 曲線發(fā)現(xiàn)，采用血清NO、sICAM-1、NLRP3 聯(lián)合預(yù)測VD 患者預(yù)后功能障礙分級(jí)Ⅲ級(jí)的AUC 高于單一指標(biāo)。提示應(yīng)用血清各指標(biāo)聯(lián)合預(yù)測可為VD 患者預(yù)后預(yù)測提供更多參考信息，提高預(yù)測效能。

綜上所述，VD 患者血清 NO、sICAM-1、NLRP3表達(dá)與患者病情、預(yù)后有關(guān)，可為臨床診治提供一定參考。參考文獻(xiàn)

目前，國內(nèi)外對(duì)湖泊沉積物污染狀況的評(píng)價(jià)尚缺乏統(tǒng)一的評(píng)價(jià)方法和標(biāo)準(zhǔn)，本研究采用綜合污染指數(shù)法和有機(jī)污染指數(shù)法評(píng)價(jià)洞庭湖表層沉積物的污染狀況，這兩種方法常被用于湖泊沉積物污染評(píng)價(jià)研究。

[1]張洪柱,陳寧,舒松,等.血管性癡呆患者血清中同型半胱氨酸、超敏C-反應(yīng)蛋白、D-二聚體水平與病情程度的相關(guān)性研究[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2019,29(13):1570-1572.

[2]Stephan B C M,Harrison S L,Keage H A D,et al.Cardiovascular Disease,the Nitric Oxide Pathway and Risk of Cognitive Impairment and Dementia[J].Curr Cardiol Rep,2017,19(9):87.

[3]Liu QQ,Zhong D,Zhang X,et al.IL-10 targets Th1/Th2 balance in vascular dementia [J].Eur Rev Med Pharmacol Sci,2018,22(17):5614-5619.

[4]于海娜,劉永丹,李艷華.腦梗死患者血清可溶性細(xì)胞間粘附分子-1、 信號(hào)傳導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活子-4 和腫瘤壞死因子-α 水平及臨床意義[J].中國臨床保健雜志,2019,22(2):196-199.

[5]劉國榮,潘曉華,劉秀珍,等.炎癥小體NLRP3 相關(guān)炎癥因子IL-1β、IL-18 與腦小血管病相關(guān)性研究[J].腦與神經(jīng)疾病雜志,2019,27(3):153-157.

[6]賈建平,陳生弟.神經(jīng)病學(xué)[M].第 7 版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2013:217-222.

[8]汪東良,王錦華,韓威威,等.血清學(xué)標(biāo)志物 Aβ1-42、sICAM-1、VILIP-1 對(duì)腦梗死后血管性癡呆的預(yù)測價(jià)值[J].中華全科醫(yī)學(xué),2019,17(2):225-229.

[9]AlajbegovicS,Lepara O,Hadzovic-Dzuvo A,et al.Serum homocysteine levels in patients with probable vascular dementia[J].Med Glas,20 17,14(2):257-261.

[10]馬巧亞,王輝,陳松盛,等.老年血管性癡呆病人內(nèi)皮功能、抗氧化指標(biāo)、Hcy、HIF-1α、VitB12 及葉酸水平分析[J].實(shí)用老年醫(yī)學(xué),20 19,33(8):761-763.

[11]張孟,隋曉琳,張春燕.地黃導(dǎo)痰湯制劑對(duì)血管性癡呆患者血清NO、ET-1、SOD 及 MDA 的影響[J].中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2017,23(20):87-89.

[12]楊翠,樊凡,王慶松.缺血性腦卒中患者急性高血壓反應(yīng)與腦卒中后認(rèn)知功能障礙的相關(guān)性研究[J].中華老年心腦血管病雜志,2018,20(10):1023-1026.

[13]張琳,王超,王紅,等.皮質(zhì)下缺血性血管病患者血清炎性因子水平及其與認(rèn)知功能損害的關(guān)系[J].廣西醫(yī)學(xué),2019,41(16):2013-2016,2021.

[14]周興盛,高山,王京娥,等.伴認(rèn)知功能障礙腦梗死患者血清可溶性細(xì)胞間黏附分子1 水平與認(rèn)知功能損害的關(guān)系[J].廣西醫(yī)學(xué),2019,41(17):2171-2173,2190.

[15]馬娜,劉遠(yuǎn)洪,梁金花,等.血管性癡呆患者血清 IGF-1、Lp-PLA2、NLRP3 的變化及與細(xì)胞因子的相關(guān)性研究[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2018,36(4):585-587.