周 青 劉帥妹 張瑞金 石 慧 林 寧 吳玉璘

江蘇省衛(wèi)生健康發(fā)展研究中心(南京，210036)

研究發(fā)現(xiàn)亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)基因多態(tài)性與中國婦女先兆流產(chǎn)存在一定的聯(lián)系，然而由于研究人群生活方式、樣本量大小以及基因分型方法等不同，研究結(jié)果存在爭議。為進(jìn)一步評估兩者關(guān)系，筆者基于先前研究進(jìn)行meta分析。

1 資料與方法

1.1 文獻(xiàn)檢索

檢索中英文數(shù)據(jù)庫Pubmed、萬方、中國知網(wǎng)和維普等搜索亞甲基四氫葉酸還原酶(C677T和A1298C)基因多態(tài)性和先兆流產(chǎn)相關(guān)研究的文獻(xiàn)。中文搜索關(guān)鍵詞： MTHFR、MTHFR(A1298C)、MTHFR(C677T)、基因多態(tài)性、先兆流產(chǎn)；英文搜索關(guān)鍵詞：MTHFR(A1298C)、MTHFR(C677T)、polymorphisms、threatened abortion。檢索時間截止至2020年8月10日，同時通過閱讀參考文獻(xiàn)的方法進(jìn)行追溯，使文獻(xiàn)盡可能查全，限定語種為英文和中文。閱讀文獻(xiàn)的題目和摘要進(jìn)行初步篩選，然后通讀整篇文章，最終納入分析的文獻(xiàn)共7篇。

1.2 納入和排除標(biāo)準(zhǔn)

文獻(xiàn)納入標(biāo)準(zhǔn)：關(guān)于MTHFR(A1298C)和MTHFR(C677T)基因多態(tài)性與中國婦女先兆流產(chǎn)的關(guān)系研究；研究對象為中國育齡婦女；實驗設(shè)計包含對照組和實驗組；數(shù)據(jù)齊全，包含各基因型在對照組和實驗組分布頻數(shù)；對照組基因型分布須符合哈迪—溫伯格(H-W)平衡定律，且P>0.05。排除標(biāo)準(zhǔn)：Meta分析和綜述類文章；數(shù)據(jù)重復(fù)和質(zhì)量不可靠；未提供具體基因型頻數(shù)；病例研究和報道。

1.3 資料提取

2位研究人員分別篩選文獻(xiàn)和資料的提取，意見不統(tǒng)一時進(jìn)行討論或由第3位研究者確認(rèn)。提取數(shù)據(jù)包括時間、第一作者、地區(qū)、基因分型方法和實驗組和對照組基因型分布頻數(shù)。

1.4 文獻(xiàn)質(zhì)量評價

納入文獻(xiàn)，根據(jù)文獻(xiàn)質(zhì)量評價表(NOS)進(jìn)行質(zhì)量評價。從病例和對照的可比性、暴露和病例的選擇進(jìn)行評估，總分為9分，≥4分文獻(xiàn)質(zhì)量較差，5～6分文獻(xiàn)質(zhì)量良好，7～9分文獻(xiàn)質(zhì)量優(yōu)[1]。

1.5 統(tǒng)計學(xué)分析

采用State11軟件計算比值比(OR)和95%可信度區(qū)間(CI)分析MTHFR基因多態(tài)性與先兆流產(chǎn)之間的關(guān)系。3種基因型包括野生純合基因型(RR)，雜合突變型(RW)和純合突變型(WW)，分別計算5種模型合并效應(yīng)量包含等位基因模型W與R、雜合比較模型WR與RR、純合比較模型WW與RR、顯性比較模型(WR+WW)與RR和隱性比較模型WW 與(RR+WR)，并采用I2和Q檢驗進(jìn)行異質(zhì)性檢測，若Ph值>0.05則采用固定效應(yīng)模型Mantel-Haenszel， 反之采用隨機效應(yīng)模型DerSimonian和Laird合并OR值，I2≥50%表示存在明顯異質(zhì)性，進(jìn)行亞組分析和敏感性分析[2-3]。最后通過Begg秩相關(guān)法和Egger線性回歸法計算發(fā)表偏倚，P>0.05提示不存在發(fā)表偏倚[4]。

2 結(jié)果

2.1 文獻(xiàn)檢索

檢索到相關(guān)文獻(xiàn)21篇，排除數(shù)據(jù)重復(fù)的文獻(xiàn)9篇，數(shù)據(jù)不完整1篇，根據(jù)納入和排除標(biāo)準(zhǔn)剔除4篇研究對象非先兆流產(chǎn)，最終納入7篇文獻(xiàn)均為中文。見表1。除文獻(xiàn)[5]，其余對照組基因型分布均符合H-W平衡。除文獻(xiàn)[7]和[9]基因分型方法采用Taqman-MGB，其余均采用熒光定量PCR。

2.2 文獻(xiàn)的質(zhì)量情況

文獻(xiàn)評分均在5分以上，納入文獻(xiàn)的基本情況見表1。

表1 納入文獻(xiàn)的基本情況

2.3 分析結(jié)果

對于MTHFR(C677T)5種模型分析結(jié)果 和根據(jù)基因分型方法進(jìn)行的亞組分析結(jié)果見表2。對于MTHFR(A1298C)5種遺傳模型分析結(jié)果和根據(jù)不同基因分型方法進(jìn)行的亞組分析結(jié)果見表3。

表2 MTHFR(C677T)基因多態(tài)性與先兆流產(chǎn)之間相關(guān)性的結(jié)果

項目 (TT+TC) 與 CC OR(95% CI) Ph I2 TT與 (CC+CT) OR(95% CI) Ph I2 總和1.06(0.97～1.16)0.4600.001.19 (1.06～1.34)0.9550.00實驗方法 熒光定量PCR1.05(0.95～1.16)0.25325.201.20(1.06～1.36)0.8260.00 TaqmanMGB1.10(0.90～1.36)0.8200.001.18(0.88～1.58)0.8570.00

表3 MTHFR(A1298C)基因多態(tài)性與先兆流產(chǎn)的關(guān)系

項目 (CC+AC)與AA OR(95% CI) Ph I2 CC vs. (AC+AA) OR(95% CI) Ph I2 總和 1.02(0.90～1.15)0.5540.001.16 (0.55～2.41)0.23626.40實驗方法 熒光定量PCR0.99(0.85～1.14)0.34010.600.87(0.20～3.80)0.09353.30 TaqmanMGB1.09(0.89～1.35)0.9740.001.48(0.62～3.55)0.9620.00

2.4 異質(zhì)性分析

在MTHFR (C677T)和MTHFR (A1298C)兩個位點，Meta分析中總的合并統(tǒng)計量均未發(fā)現(xiàn)明顯的異質(zhì)性，I2<50%。

2.5 敏感性分析

對于MTHFR (A1298C)，剔除不符合哈迪—溫伯格平衡的文獻(xiàn)[5]，通過敏感性分析各模型合并效應(yīng)量無明顯改變。

2.6 發(fā)表偏倚

通過Begg秩相關(guān)法和Egger線性回歸法，兩個位點的5種模型漏斗圖均對稱，且Egger檢驗結(jié)果P>0.05，提示不存在發(fā)表偏倚，見表4。

表4 MTHFR基因多態(tài)位點Egger檢驗結(jié)果

3 討論

先兆流產(chǎn)在人群發(fā)病率10%～15%，發(fā)病原因涉及免疫學(xué)功能異常、胚胎異常、內(nèi)分泌異常和抗凝-凝血機制異常等，有50%～70%患者發(fā)病原因不明[12]。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，基因水平研究自然流產(chǎn)的病因已成為熱點。MTHFR是同型半胱氨酸代謝關(guān)鍵酶，基因突變或多態(tài)性發(fā)生引起MTHFR活性降低，導(dǎo)致血液中同型半胱氨酸(HCY)濃度升高，高濃度HCY引起血管內(nèi)皮細(xì)胞受損同時對胚胎產(chǎn)生毒作用，導(dǎo)致凝血-抗凝機制異常發(fā)生血栓，增加不良妊娠結(jié)局的風(fēng)險，是早期流產(chǎn)發(fā)生的一個危險因素[13-16]。近年來研究顯示，MTHFR基因多態(tài)性與中國婦女先兆流產(chǎn)的發(fā)生關(guān)系密切，然而由于不同的地區(qū)、生活環(huán)境和方式等，導(dǎo)致易感性存在差異。

本研究納入7篇文獻(xiàn)，總?cè)巳褐形窗l(fā)現(xiàn)異質(zhì)性，說明結(jié)果可靠。 MTHFR(C677T)實驗組和對照組人數(shù)分別為923例和951例，分析結(jié)果提示MTHFR(C677T)基因多態(tài)性可能增加中國婦女先兆流產(chǎn)的風(fēng)險，與以往研究相似[5-11]，而MTHFR (A1298C)實驗組和對照組人數(shù)分別為632例和856例，meta分析結(jié)果提示 MTHFR(A1298C)基因多態(tài)性可能與中國婦女先兆流產(chǎn)不存在相關(guān)性，與以往研究相似[5-10]。亞組分析發(fā)現(xiàn)熒光定量PCR組3種模型結(jié)果提示MTHFR(C677T)基因多態(tài)性可能增加中國婦女先兆流產(chǎn)風(fēng)險[5-6,8,10-11]，而Taqman-MGB組結(jié)果顯示不存在相關(guān)性[7,9]，可能是不同的實驗方法對基因分型有一定影響。H-W平衡是遺傳學(xué)的基本定律，對納入文獻(xiàn)進(jìn)行檢驗，結(jié)果發(fā)現(xiàn)有一篇不符合，剔除該文獻(xiàn)重新合并計算，各模型合并效應(yīng)量無明顯改變。最后采用漏斗圖和Egger線性回歸檢驗方法對文獻(xiàn)偏倚情況進(jìn)行評估，結(jié)果表明5個遺傳模型均無偏倚，說明該meta分析結(jié)論可靠。

本研究存在一定的不足：研究樣本量??；研究對象局限于中國漢族婦女。納入文獻(xiàn)人群不同地區(qū)生活環(huán)境、年齡分布、生活方式等均可能影響研究結(jié)果。

綜上，Meta分析結(jié)果表明MTHFR(C677T)基因多態(tài)性可能增加中國婦女先兆流產(chǎn)的風(fēng)險；MTHFR(A1298C)基因多態(tài)性可能與中國婦女先兆流產(chǎn)無關(guān)。在未來研究中，還需進(jìn)一步擴大樣本量，在不同民族、生活方式、環(huán)境等進(jìn)一步分層分析以便更好預(yù)防和治療先兆流產(chǎn)。