董 娜，萬 啟，李亞波，張愛菊，張小林

(甘肅醫(yī)學(xué)院藥學(xué)系，甘肅平?jīng)?744000)

藥品中有機溶劑殘留是指藥物制劑在生產(chǎn)過程中所使用過的，但又未能完全除去的揮發(fā)性有機化合物，行業(yè)協(xié)會將他們分為四類，丙酮歸為第3 類屬低毒溶劑，在2015年版《中國藥典》中規(guī)定丙酮殘留不得超過0.5%[1]。目前，丙酮測定多采用頂空氣相色譜法[2 - 6]?？鄥⑺鼐哂协h(huán)酮結(jié)構(gòu)(圖1)，性質(zhì)相對穩(wěn)定，苦參素膠囊在生產(chǎn)過程中涉及到包括丙酮、乙醇在內(nèi)的多種有機溶劑，為了有效控制產(chǎn)品質(zhì)量和保證用藥安全,鄒義栩[7]等采用頂空氣相色譜法同時對該藥物中丙酮、乙醇2種殘留溶劑進行檢測，丙酮的最低檢測濃度達到6.38×10-7mol/L，可用于實際樣品分析。但到目前為止，熒光法測定丙酮報道較少。

圖1 苦參素結(jié)構(gòu)式Fig.1 Structure formula of matrine

1 實驗部分

1.1 主要儀器與試劑

930N熒光分光光度計(上海精密科學(xué)儀器有限公司)。

苦參素膠囊(正大天晴藥業(yè)集團股份有限公司，批號：20010763，規(guī)格：0.1克/粒)。取苦參素膠囊10粒，準(zhǔn)確稱量，用水定容至10 mL，該溶液作為供試液。

1.2 實驗方法

取2.0 mL碘液于25 mL容量瓶中，加1.0 mL 1 mol/L NaOH溶液，1.50 mL供試液，輕微振蕩，靜置反應(yīng)3 min后，加入1.0 mL 1 mol/L HCl，2.0 mL 0.10 mmol/L RhB溶液，5.0 mL HAc-NaAc緩沖溶液，蒸餾水定容，靜置5 min后，以365 nm為激發(fā)波長，測定發(fā)射波長580 nm處1.0×10-3mmol/L RhB熒光強度(F)，同時測定丙酮空白熒光強度(F0)，計算ΔF(ΔF=F-F0)。

2 結(jié)果與討論

2.1 熒光光譜

圖2 不同體系的熒光光譜Fig.2 Fluorescence spectra in different system

2.2 羅丹明B用量優(yōu)化

在pH=4.5環(huán)境下考察不同體積0.10 mmol/L RhB溶液的熒光特性(圖3)。結(jié)果表明，在0～4.0 mL范圍內(nèi)RhB熒光強度與RhB加入體積有線性關(guān)系，當(dāng)RhB濃度大于等于8.0×10-6mol/L時(即體積大于等于2.0 mL)，自猝滅作用增強，線性關(guān)系變差。故0.10 mmol/L RhB取量為2.0 mL。

2.3 碘液用量

圖3 羅丹明B濃度對熒光強度的影響Fig 3 Effect of the concentration of Rhodamine B on fluorescence intensity

圖4 碘液濃度對熒光強度的影響Fig.4 Effect of the concentration of iodine on fluorescence intensity

2.4 NaOH用量

2.5 pH影響

2.6 反應(yīng)時間的優(yōu)化

圖5 溶液pH對熒光強度的影響Fig.5 Effect of solution pH on fluorescence intensity

圖6 動力學(xué)曲線(a.熒光恢復(fù)；b.熒光猝滅)Fig.6 Kinetic curve(a.fluorescence recovery；b.fluorescence quenching)

2.7 試劑加入順序的優(yōu)化

2.8 工作曲線

2.9 干擾試驗

苦參素膠囊中丙酮和乙醇殘留同時存在，二者均可發(fā)生碘仿反應(yīng)，因此實驗重點考察了丙酮和乙醇共存時乙醇的干擾情況。選擇丙酮濃度為8 μmol/L，乙醇濃度為80 μmol/L(濃度設(shè)定比為1∶10)，按照實驗方法測定兩種物質(zhì)與碘混合后不同反應(yīng)時間段熒光強度(圖8)。結(jié)果表明，丙酮碘仿反應(yīng)較快，3 min后熒光強度趨于恒定；乙醇在5 min后熒光強度開始增大，顯然在樣品加入3 min時加HCl終止碘仿反應(yīng)，10倍乙醇不干擾丙酮測定。乙醇反應(yīng)分兩步完成，先氧化生成乙醛，其后是乙醛碘仿反應(yīng)，反應(yīng)速率有差異。實驗同時考察了Al3+、Cl-、Na+、Mg2+、K+和Zn2+等離子干擾情況，測量誤差控制在±5%以內(nèi)，100倍的上述離子均不干擾測定。

圖7 丙酮工作曲線Fig.7 Working curve of acetone

圖8 乙醇干擾性考察Fig.8 Study on the interference of ethanol

2.10 樣品分析

取3批樣品適量，按“1.2”方法完成供試品溶液制備及丙酮殘留測定，并進行加標(biāo)回收實驗，結(jié)果見表1。結(jié)果顯示，藥樣中均有丙酮檢出，繼而求得原藥中的丙酮質(zhì)量分數(shù)為0.0019%、0.0021%和0.0018%，但測定值均未超過0.5%的最高限量規(guī)定；加標(biāo)回收率在96.5%～105.0%范圍內(nèi)，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)≤2.5%。說明方法準(zhǔn)確度和精密度良好。

表1 藥品中丙酮的測定結(jié)果

3 結(jié)論