宋德武 王貴升 李玉杰 陳靜 馬慧玲 邢琳琳 徐聰

摘要：為了解山東省春季主要動物疫病免疫效果，采集16市2，939份血清樣品，針對禽流感、口蹄疫、小反芻獸疫等主要動物疫病免疫抗體進行檢測分析。結果表明，三種動物疫病免疫抗體合格率高于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定標準，口蹄疫免疫效果不同畜種、不同亞型間有差異，羊場O型口蹄疫免疫效果與小反芻獸疫免疫效果類似，禽屠宰場禽流感免疫抗體水平低。

關鍵詞：山東；動物疫??；抗體監(jiān)測

動物疫病免疫工作是目前控制疫病發(fā)生最科學、最有效的措施，開展免疫抗體監(jiān)測、及時了解動物免疫效果對科學評估動物疫病防控效果，并為政府科學制定動物疫病預防控制規(guī)劃和預警提供依據(jù)具有十分重要的意義[1，2]。為掌握山東省禽流感、口蹄疫、小反芻獸疫等重大動物疫病臨床免疫效果，為下一步做好重大動物疫病科學防控工作提供參考，針對2020年春季山東省重大動物疫病血清學抗體進行監(jiān)測分析如下。

1材料與方法

1.1樣品采集

2020年上半年，從每個市抽取1個農(nóng)業(yè)縣，每個農(nóng)業(yè)縣選擇牛、羊、豬、禽、水禽、家禽屠宰場進行血清采樣，共采集了16個市98個場（戶）的血清樣品2，939份。

1.2檢測方法

按照《口蹄疫診斷技術》（GB/T 18935—2003）采用液相阻斷ELISA檢測O型和A型口蹄疫抗體；按照《小反芻獸疫診斷技術》（GB/T 27982—2011）采用ELSIA檢測小反芻獸疫抗體；按照《高致病性禽流感診斷技術》（GB/T 18936—2003）采用HI檢測高致病性禽流感抗體。

1.3檢測試劑

O型口蹄疫抗體檢測試劑盒由中國農(nóng)科院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)（批號：20191128133）；A型口蹄疫抗體檢測試劑盒由中國農(nóng)科院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)（批號：20190701134）；羊小反芻獸疫抗體檢測試劑盒由北京明日達科技發(fā)展有限責任公司生產(chǎn)（批號：20191011）；H5亞型禽流感（Re-11）、H5亞型禽流感（Re-12）、H7N9亞型禽流感抗原均由哈爾濱國生生物科技股份有限公司生產(chǎn)（批號分別為：20191012、20191014、20190415）。

2結果與分析

2.1抗體水平檢測整體結果

檢測51個養(yǎng)殖場O型口蹄疫抗體樣品1，530份，合格樣品1，256份，43家場合格，抗體合格率為82.09%，場間免疫合格率為84.31%；檢測16個牛養(yǎng)殖場A型口蹄疫抗體樣品480份，合格樣品372份，合格場11家，抗體合格率為77.5%，場間免疫合格率為68.75%；檢測17個羊養(yǎng)殖場羊小反芻獸疫抗體樣品480份，合格樣品378份，合格場14家，抗體合格率為78.75%，場間免疫合格率為82.35%；檢測47家禽養(yǎng)殖場（屠宰場）血清樣品1，409份，H5亞型禽流感（Re-11）抗體合格率為77.33%（1，088/1，407），場間免疫合格率為76.59%（36/47），H5亞型禽流感（Re-12）抗體合格率為77.70%（1，094/1，408），場間免疫合格率為78.72%（37/47），H7N9亞型禽流感抗體合格率為77.77%（1，095/1，408），場間免疫合格率為76.59%（36/47）。

2.2不同畜種間O型口蹄疫抗體比較分析

檢測16家牛場480份牛血清，合格血清446份，合格場14家；檢測17家羊場480份羊血清，合格血清374份，合格場14家，2家羊場免疫抗體合格率為0；檢測18家豬場540份豬血清，合格血清446份，合格場15家，其中1家豬場免疫抗體合格率為0。O型口蹄疫免疫抗體樣品合格率：牛90.83%>豬82.59%>羊77.92%（374/480）；O型口蹄疫免疫抗體場間合格率：牛90.83%>豬82.59%>羊77.92%。

2.3相同牛場O型口蹄疫和A型口蹄疫抗體比較分析

檢測16家牛場480份牛血清，其中，O型口蹄疫抗體，樣品合格436份，場合格14家；A型口蹄疫抗體，樣品合格372份，場合格11家。不同亞型口蹄疫免疫抗體樣品合格率：O型口蹄疫90.83%>A型口蹄疫77.69%；不同亞型口蹄疫免疫抗體場間合格率：O型口蹄疫87.5%>A型口蹄疫68.75%。

2.4相同羊場O型口蹄疫和小反芻獸疫抗體比較分析

17家羊場O型口蹄疫和小反芻獸疫抗體樣品合格率：O型口蹄疫77.92%（374/480），小反芻獸疫78.75%（378/480），兩者相近；17家羊場O型口蹄疫和小反芻獸疫抗體場間合格率：O型口蹄疫82.35%（14/17），小反芻獸疫82.35%（14/17），兩者相同，其中兩家羊場O型口蹄疫和小反芻獸疫樣品抗體合格率均為0。利用Excel中CORREL函數(shù)計算17家羊場小反芻獸疫與O型口蹄疫抗體合格率相關性，結果為0.696。

2.5禽流感抗體分析

對32家禽養(yǎng)殖場進行分析，H5亞型禽流感（re-11）抗體樣品合格率為93.73%（897/957），場間合格率為93.75%（30/32）；H5亞型禽流感（re-12）抗體樣品合格率為92.48%（886/958），場間合格率為93.75%（30/32）；H7N9亞型禽流感抗體樣品合格率為93.63%（897/958），場間合格率為93.75%（30/32）。對15家禽屠宰場進行分析，H5亞型禽流感（re-11）抗體樣品合格率為42.44%（191/450），場間合格率為40%（6/15）；H5亞型禽流感（re-12）抗體樣品合格率為46.22%（208/450），場間合格率為46.67%（7/15）；H7N9亞型禽流感抗體樣品合格率為44%（198/450），場間合格率為40%（6/16）。利用Excel中CORREL函數(shù)計算32家禽養(yǎng)殖場H5亞型禽流感兩種毒株免疫抗體合格率相關性，結果為0.997。

3討論

3.1主要動物疫病免疫抗體水平整體合格

根據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部2020年監(jiān)測計劃，口蹄疫、小反芻獸疫、禽流感免疫抗體合格率≥70%為免疫合格要求。春季對全省98家養(yǎng)殖場（屠宰場）監(jiān)測結果顯示，O型口蹄疫、A型口蹄疫、羊小反芻獸疫、H5亞型禽流感（Re-11）、H5亞型禽流感（Re-12）、H7N9亞型禽流感平均抗體合格率分別為82.09%、78.75%、78.75%、77.33%、77.70%、77.77%，均符合農(nóng)業(yè)農(nóng)村部監(jiān)測計劃規(guī)定要求，表明全省春季集中免疫工作達到預期目標。

3.2不同畜種、不同亞型口蹄疫免疫效果有差異

牛、羊、豬O型口蹄疫免疫抗體合格率均符合國家規(guī)定要求，其中牛O型口蹄疫免疫效果最好，羊O型口蹄疫免疫效果最差，可能因免疫疫苗及免疫程序不同造成免疫效果差異，同時場間免疫合格率與抗體平均合格率成正相關，且有兩個羊場抗體合格率為0，不排除因個別場免疫失敗影響平均抗體合格率。16家牛場O型口蹄疫免疫效果明顯優(yōu)于A型口蹄疫，都采用口蹄疫O型、A型二價滅活疫苗免疫，免疫程序一致，可能是牛對二價疫苗中O型免疫應答要優(yōu)于A型，應進一步優(yōu)化二價滅活苗免疫效果[3]。

3.3免疫是否規(guī)范顯著影響羊場免疫效果

17家羊場小反芻獸疫與O型口蹄疫抗體合格率相近，場間合格率一致，17家羊場小反芻獸疫與O型口蹄疫抗體合格率相關系數(shù)為0.696，中度相關，且2家羊場小反芻獸疫與O型口蹄疫抗體合格率均為零，說明羊場各種疫苗的整體免疫效果依賴于羊場免疫是否規(guī)范，應進一步提高免疫密度和質(zhì)量。

3.4禽養(yǎng)殖場不同亞型、不同毒株禽流感免疫效果基本一致

32家禽養(yǎng)殖場H5亞型禽流感（Re-11）、H5亞型禽流感（Re-12）、H7N9亞型禽流感平均抗體合格率分別為93.73%、92.48%、93.63%，十分相近，且32家禽養(yǎng)殖場H5亞型禽流感（Re-11）與H7N9亞型禽流感抗體不合格場完全一致，H5亞型禽流感兩種毒株免疫抗體合格率相關系數(shù)為0.997，說明雞和鴨對不同亞型、不同毒株禽流感免疫應答差異很小，由于數(shù)據(jù)有限，可能結果存在片面性，需進一步論證。

3.5肉雞養(yǎng)殖場禽流感免疫效果不理想

禽屠宰場禽流感免疫抗體合格率和場間合格率都不足50%，通過采樣單調(diào)查，雞養(yǎng)殖場均為蛋雞場，鴨養(yǎng)殖場為肉鴨場，15家禽屠宰場有12家為雞屠宰場。蛋雞場飼養(yǎng)周期長、免疫次數(shù)多，免疫保護水平一直維持較高水平[4]；肉鴨養(yǎng)殖場一般免疫一次，存在免疫不合格場，但整體免疫合格率在70%以上，與鴨屠宰場抗體免疫合格率相吻合，表明鴨養(yǎng)殖場整體免疫合格，可以提供整體免疫保護；12家肉雞屠宰場中有8家免疫抗體不合格，且抗體合格率為零，表明肉雞養(yǎng)殖場的免疫密度和質(zhì)量十分不好，需引起重視，進一步關注疫情暴發(fā)風險。█

參考文獻：

[1]王佐強，楊麗，趙寶龍.動物疫病免疫抗體監(jiān)測的意義[J].畜牧獸醫(yī)科技信息，2014（7）：41.

[2]張文慧.山西省陽泉市幾種主要動物疫病免疫抗體監(jiān)測與分析[D].西北農(nóng)林科技大學，2016.

[3]羅嘉軒，陸巧芬，曹建偉，等.江門市規(guī)模化奶牛場2018-2019年O型、A型和亞洲I型口蹄疫免疫抗體監(jiān)測結果分析[J].中國牛業(yè)科學，2020（2）： 45-46+85.

[4]季晶晶，許青華，孔凡高，等.滁州市2018年春季禽流感免疫抗體監(jiān)測分析[J].養(yǎng)禽與禽病防治，2019（3）：17-19.