施清理

摘 要：對(duì)食品中微生物的檢測(cè)可以檢測(cè)微生物的數(shù)量和種類(lèi)，并將其控制在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)，保證食品安全;傳統(tǒng)的食品微生物檢測(cè)方法有一定的局限性，不能滿足當(dāng)今食品檢測(cè)的具體要求。需要加強(qiáng)創(chuàng)新和改進(jìn)，以提高檢測(cè)效率和質(zhì)量，獲得更準(zhǔn)確有效的檢測(cè)結(jié)果。快速檢測(cè)器正是滿足了這些要求，可以提高檢測(cè)速度，獲得更準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)。

關(guān)鍵詞：食品微生物;檢測(cè);快速測(cè)試片

食品在生產(chǎn)、流通、加工、儲(chǔ)存、運(yùn)輸、銷(xiāo)售的各個(gè)環(huán)節(jié)都會(huì)受到微生物的感染。食物被感染后，微生物會(huì)大量繁殖，導(dǎo)致食物腐爛和斑點(diǎn)變長(zhǎng)，這將導(dǎo)致誤食變質(zhì)食物的人或動(dòng)物的食源性感染或食物中毒。特別是近年來(lái)，隨著環(huán)境污染的加劇，導(dǎo)致人類(lèi)感染的細(xì)菌數(shù)量不斷增加，對(duì)人類(lèi)的威脅也越來(lái)越大。傳統(tǒng)的檢測(cè)方法雖然準(zhǔn)確、靈敏，但實(shí)驗(yàn)多、操作復(fù)雜、時(shí)間長(zhǎng)、人員多。

食品安全受到全社會(huì)的高度重視，特別是在物質(zhì)生活條件逐步改善的趨勢(shì)下，人們對(duì)食品質(zhì)量和安全提出了更高的要求，防止微生物污染，切實(shí)保障人民群眾的生命、健康和安全。國(guó)家制定相應(yīng)的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，實(shí)現(xiàn)對(duì)食品安全問(wèn)題的有效控制，防止公共衛(wèi)生事件的發(fā)生。傳統(tǒng)的檢測(cè)方法不僅效率低下，而且需要投入更多的人力、物力和財(cái)力?？焖贆z測(cè)組件的應(yīng)用可以提高操作的便利性，滿足快速檢測(cè)的要求。

1快速檢測(cè)片的概念及特點(diǎn)

快速檢測(cè)是食品微生物檢測(cè)的一種新方法。它是由德國(guó)FJ.Forg科學(xué)家發(fā)明。該方法大大縮短了測(cè)試周期，降低了材料成本，簡(jiǎn)化了測(cè)試過(guò)程。膜的快速檢測(cè)將檢測(cè)周期縮短到原來(lái)的1/5，大大減少了實(shí)驗(yàn)時(shí)間和成本，為人們的生活提供了方便。近年來(lái)，快速檢測(cè)技術(shù)在食品微生物檢測(cè)中得到了廣泛的應(yīng)用。將快速檢測(cè)芯片應(yīng)用于樣品檢測(cè)，不僅可以提高檢測(cè)效率，還可以為人們的生活提供便利。此外，快速取樣有利于保護(hù)環(huán)境，不會(huì)產(chǎn)生大量殘?jiān)蛷U液。它經(jīng)常用于戶外測(cè)試。標(biāo)本可同時(shí)用于快速檢測(cè)、采樣和接種，以保證檢測(cè)結(jié)果的可靠性，避免重大差錯(cuò)。

1.快速試樣檢測(cè)食品微生物的優(yōu)勢(shì)

1.1快速檢測(cè)速度

該快速試件無(wú)需添加試劑即可檢測(cè)食品樣品，操作方便快捷，檢測(cè)儀器種類(lèi)和數(shù)量相對(duì)較少，機(jī)械設(shè)備消毒保存相對(duì)簡(jiǎn)單，運(yùn)輸非常方便，經(jīng)檢測(cè)無(wú)廢渣、廢液?jiǎn)栴}，有效控制了環(huán)境污染問(wèn)題;同時(shí)，使用快速檢測(cè)試件檢測(cè)食品微生物時(shí)，清洗工作量小，環(huán)境污染問(wèn)題總體得到較好控制，提高了食品微生物檢測(cè)的效率和效率。

1.2準(zhǔn)確的測(cè)試結(jié)果

應(yīng)用快速試件檢測(cè)食品微生物，可以同時(shí)完成接種和采樣。它不僅可以解決接種時(shí)間短的問(wèn)題，防止因接種時(shí)間長(zhǎng)而引起的細(xì)菌繁殖，而且可以減少檢測(cè)數(shù)據(jù)的誤差，提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

1.3檢測(cè)時(shí)間短

其他類(lèi)型的檢測(cè)方法耗時(shí)較長(zhǎng)，對(duì)檢測(cè)溫度要求較高。一些基層食品檢測(cè)機(jī)構(gòu)無(wú)法保證檢測(cè)條件和檢測(cè)效果。例如，在食品微生物檢測(cè)中應(yīng)用常規(guī)方法，檢測(cè)出的細(xì)菌總數(shù)約為48株，快速檢測(cè)片中的細(xì)菌總數(shù)可達(dá)到16～18株;在檢測(cè)食品中大腸菌群時(shí)，常規(guī)方法檢測(cè)結(jié)果在72-96之間，快速試樣檢測(cè)結(jié)果可達(dá)16-18，充分說(shuō)明快速試樣檢測(cè)時(shí)間短，可有效避免長(zhǎng)期檢測(cè)造成的細(xì)菌繁殖問(wèn)題。

2快速測(cè)試片在食品微生物檢測(cè)中的應(yīng)用措施

2.1以濾紙為載體的測(cè)試片

2.1.1菌落總數(shù)測(cè)試片

選用濾紙時(shí)，應(yīng)嚴(yán)格把關(guān)質(zhì)量，保證其無(wú)毒、良好的吸附能力和密度。濾紙的合理尺寸為4.0 cm×5.0 cm，干燥后將TTC無(wú)菌介質(zhì)、吸附、無(wú)菌過(guò)濾器加入聚丙烯袋封口。紅色是TTC的基本屬性。它能與氫氣反應(yīng)生成紅色三苯酯。細(xì)菌的數(shù)量可以通過(guò)計(jì)算紅點(diǎn)的數(shù)量來(lái)得到。應(yīng)嚴(yán)格控制TTC的用量，以防止細(xì)菌的抑制形成，提高檢測(cè)靈敏度。培養(yǎng)箱溫度控制在37℃，培養(yǎng)時(shí)間為17h左右。

2.1.2基于染色法的大腸菌群測(cè)

在乳化劑、乳糖、瓊脂、蛋白胨、三氯甲烷、溴甲酚紫的制備過(guò)程中控制原料的用量和濃度，如殺菌溫度、浸泡溫度和干燥溫度分別控制在115℃、60℃和55℃左右。PH 6.8～7.0為合理范圍，訓(xùn)練時(shí)間也應(yīng)控制在17h左右，紅斑周?chē)悬S色暈圈，底部有黃色紅斑，其選擇性較好。在檢測(cè)工作中應(yīng)嚴(yán)格控制TTC和瓊脂粉的用量。

2.1.3基于熒光法的大腸桿菌

紙質(zhì)細(xì)菌的代謝物和代謝酶。大腸桿菌試紙熒光法檢測(cè)食品微生物。酶底物反應(yīng)法主要用于檢測(cè)大腸桿菌菌落相關(guān)酶活性，可有效進(jìn)行微生物計(jì)數(shù)。溫度37℃，熒光波長(zhǎng)365 nm。檢測(cè)濃度為0～4cfu/ml的微生物，具有良好的定性和定量分析效果。

2.2以Petrifilm為載體的測(cè)試片

2.2.1菌落總數(shù)測(cè)試片

從紙的中心和蓋子上滴下1mL樣品，以保持樣品的均勻性。為了保證凝膠具有良好的固化效果，培養(yǎng)1min。培養(yǎng)箱的溫度控制在37℃，培養(yǎng)時(shí)間約為48小時(shí)。

2.2.2霉菌、酵母菌測(cè)試片

在樣品中霉菌和酵母菌的營(yíng)養(yǎng)成分和菌落生長(zhǎng)指數(shù)中，通常需要抗生素來(lái)抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)。培養(yǎng)溫度控制在21～25℃，培養(yǎng)時(shí)間一般在3～5℃左右，菌落一般較小，外部清晰，顏色均勻，菌落通常向上隆起，霉菌菌落較大，通常邊緣不清，顏色呈一定程度的混雜和無(wú)序平坦。

2.2.3大腸菌檢測(cè)紙片

腸道大腸桿菌試紙中有葡萄糖醛酸酶指示劑和改良VRB培養(yǎng)基，β-葡萄糖醛酸酶主要由大腸桿菌產(chǎn)生，在指示劑作用下可產(chǎn)生藍(lán)色沉淀，氣體由發(fā)酵乳糖產(chǎn)生。每個(gè)氣泡在膠膜的作用下連接。菌落通常為深藍(lán)色或藍(lán)色。由于大腸桿菌菌落的存在，培養(yǎng)基呈深紅色。在檢測(cè)大腸桿菌群時(shí)，有必要對(duì)氣泡進(jìn)行計(jì)數(shù)。根據(jù)菌落的顏色和數(shù)量。

3結(jié)語(yǔ)

快速樣品可以測(cè)定少量樣品，整個(gè)操作過(guò)程相對(duì)簡(jiǎn)單，便于消毒、儲(chǔ)存、運(yùn)輸和攜帶;成本低，對(duì)環(huán)境沒(méi)有污染，減少了工作量，降低了成本，適合我國(guó)食品實(shí)驗(yàn)室微生物檢測(cè);另外，快速取樣法和抽樣接種同時(shí)進(jìn)行，在一定程度上避免了細(xì)菌繁殖造成的細(xì)菌數(shù)量增加，可以反映實(shí)驗(yàn)室食品微生物的數(shù)量。而且，檢測(cè)前不需要做大量的準(zhǔn)備工作，縮短了檢測(cè)過(guò)程，提高了檢測(cè)效率，檢測(cè)結(jié)果可以及時(shí)反饋給食品企業(yè)。

目前，快速測(cè)膜方法的研究已經(jīng)取得了一定的成果，但快速測(cè)膜方法還存在許多問(wèn)題，如濾孔過(guò)大，兩側(cè)菌落生長(zhǎng)不能計(jì)數(shù)，濾水保持性差，無(wú)法保持合適的濕度檢測(cè)流程，導(dǎo)致細(xì)菌生長(zhǎng)不良;另外，濾紙測(cè)試卡營(yíng)養(yǎng)成分分布不均勻，導(dǎo)致細(xì)菌在樣品中不能擴(kuò)散，導(dǎo)致細(xì)菌生長(zhǎng)分布;快速檢測(cè)顯色系統(tǒng)相對(duì)單一，無(wú)法區(qū)分和計(jì)數(shù)細(xì)菌和真菌，不能全面推廣。如果細(xì)菌產(chǎn)生更多的氣體和粘液，會(huì)出現(xiàn)菌落的擴(kuò)散和融合，最終的結(jié)果會(huì)有一定的誤差。

雖然我國(guó)一直在發(fā)展對(duì)食品微生物樣品的檢測(cè)，但僅限于單項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)。因此，有必要開(kāi)發(fā)更優(yōu)質(zhì)、更高效的顯色劑載體進(jìn)行進(jìn)一步研究，提供不同類(lèi)型的食品微生物檢測(cè)樣品。相關(guān)人員應(yīng)重視速度檢測(cè)在食品微生物檢測(cè)中的應(yīng)用，研究更多新型聚合物，彌補(bǔ)現(xiàn)有方法的不足，引進(jìn)更有效、更準(zhǔn)確的高質(zhì)量速度試片。提高食品微生物檢測(cè)質(zhì)量，確保食品衛(wèi)生安全。

參考文獻(xiàn)：

[1]生物檢測(cè)中的應(yīng)用[J].檢驗(yàn)檢疫學(xué)刊，2020，30（3）：140-141.

[2]肖莉，孫端芳，劉庭菊，等.食品微生物檢測(cè)中快速測(cè)試片的應(yīng)用[J].大科技，2020（3）：280-281.

[3]孫霞，陳娟麗.用測(cè)試片法快速檢測(cè)金黃色葡萄球菌[J].食品安全導(dǎo)刊，2012（Z1）：28-29.