廖學峰

（湘潭市中心醫(yī)院，湖南 湘潭411413）

涂片檢查是臨床微生物檢驗中常用的方法，首先對標本實施細菌培養(yǎng)，然后進行涂片檢查，并指導臨床用藥。但細菌培養(yǎng)對時間有一定要求，培養(yǎng)后實施涂片檢查，通常會影響疾病的治療，進而加重病情[1]。近年來，有研究顯示，原始標本涂片檢查在細菌培養(yǎng)及臨床微生物檢驗中應用效果明顯，同時，也可引導細菌培養(yǎng)涂片檢查[2]。本研究探究臨床微生物檢驗中涂片檢查的應用效果，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料隨機抽取本院2018年5月至2019年5月收集的120例標本，其中檢出微生物116例，包括痰液標本37例，膿液標本24例，尿液標本44例，胸腹水標本11例。

1.2 方法通過壓片法制取標本，同時，做好涂片處理工作，采用無菌消毒棉簽篩選原始標本，并將其放置于0.9%氯化鈉溶液中，通過無菌針均勻混合標本與0.9%氯化鈉溶液，酒精燈輔助加熱稀釋，涂片放置后自然風干，然后進行革蘭染色與抗菌染色，同時，進行鏡檢，每張涂片能觀察視野10個，準確記錄相關結(jié)果[3]。然后于沙氏平板或者血平板中畫線接種，培養(yǎng)溫度調(diào)整為35℃，二氧化碳濃度調(diào)整為5%～10%，進行18～72 h溫育，培養(yǎng)液包括GN增菌液、蛋白膠水、SC增菌液、復蘇凍干菌種及肉湯溶解，培養(yǎng)環(huán)境溫度調(diào)整為37℃，進行24～120 h共培養(yǎng)，直至菌種渾濁生長，出現(xiàn)菌膜[4]。通過Siemens MicroScan WalkAway系統(tǒng)分析儀鑒別標本中的致病菌、微生物和優(yōu)勢菌落等，微生物鑒別過程中，重點篩查涂片鏡檢中可觀察到的病原菌。采用由珠海貝索生物技術有限公司提供的儀器和相應試劑；采用德國西門子公司生產(chǎn)的微生物鑒定儀及配套的鑒定板條[5]。

1.3 觀察指標分析微生物檢出狀況及不同類型合格標本涂片與培養(yǎng)陽性符合率。

1.4 統(tǒng)計學方法采用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料用百分率（%）表示。

2 結(jié)果

2.1 微生物檢出狀況分析120例標本中，檢出微生物116例，其中占比最高的是革蘭陰性菌，占比為68.10%；其次為革蘭陽性菌，占比18.97%，最后是真菌，占比為12.93%，見表1。

表1 微生物檢出狀況分析

2.2 不同類型合格標本涂片與培養(yǎng)陽性符合率經(jīng)涂片檢查、細菌培養(yǎng)后發(fā)現(xiàn)，腹水、膿液、尿液及痰液陽性符合率分別為75.00%、90.91%、70.00%和76.92%，見表2。

表2 不同類型合格標本圖片與培養(yǎng)陽性符合率分析

3 討論

目前，臨床上實施的涂片鏡檢是指將每種標本涂成薄片后實施革蘭氏染色，聯(lián)合顯微鏡對微生物形態(tài)直接觀察，涂片鏡檢功能：鑒別診斷細菌；被視為選擇的藥物敏感性制片；標本合格判定；臨床早期診斷；病原菌鑒別；細菌鑒定質(zhì)量；對腹瀉菌群是否失調(diào)進行檢查等，具體分析如下：①鑒別細菌：通過該方法實施涂片檢查，可準確鑒別細菌類型，然后以細菌類型為依據(jù)，判斷疾病類型。如痰液標本，如果檢出葡萄球菌，大部分是肺結(jié)核。膿腫、胸膜炎、泌尿系統(tǒng)感染等是因特殊形態(tài)細菌向機體入侵導致的感染。原始涂片檢查在疾病診斷中應用價值較高，可及早診斷。②標本合格判定：如果標本不合格，易造成微生物檢查結(jié)果誤差，對疾病的早期診斷及治療造成影響。原始標本涂片檢查期間，有革蘭染色步驟。該方法實施期間，相關人員能對鱗狀上皮細胞數(shù)量進行觀察。如果該細胞數(shù)量較多，且存在部分膿細胞，說明標本不合格，需重新提取材料。③細菌鑒別。通過原始標本涂片檢查方法，進一步提高細菌鑒別準確性[6]。

本研究結(jié)果顯示，120例標本中，總計檢出116例微生物，微生物檢出率為96.67%，其中，革蘭陰性菌、革蘭陽性菌、真菌檢出率分別為68.10%、18.97%和12.93%，不同類型的合格標本涂片與培養(yǎng)陽性符合率較高。表明，標本培養(yǎng)前涂片檢查與培養(yǎng)結(jié)果密切相關，以上述結(jié)果為依據(jù)及早為臨床提供報告，明確患者感染信息，以便及早治療疾病，避免病情治療被延誤，在臨床用藥指導中具有重要作用。此外，因臨床微生物檢驗中存在一定特殊性，從采集標本至檢驗結(jié)果獲取需2～3 d，且操作繁瑣、復雜，具體包括抗菌藥物敏感性試驗、病原學診斷等。在此過程中，隨著疾病的發(fā)展，很可能導致細微改變，因此，在標本送至實驗室后，首先需實施染色鏡檢，以便在短時間內(nèi)匯報鏡檢結(jié)果，為臨床醫(yī)生用藥指導提供參考[7]。同時，將不合格標本排除，從不同方面促進致病菌檢出率的提高，以便檢驗結(jié)果準確，盡可能的促進治療效果的提高，減少住院時間和治療經(jīng)費。本研究結(jié)果顯示，經(jīng)涂片檢查、細菌培養(yǎng)后發(fā)現(xiàn)，腹水、膿液、尿液及痰液陽性符合率分別為75.00%、90.91%、70.00%和76.92%。由此分析，涂片檢查及細菌培養(yǎng)檢查準確性較高，對于病情顯著者，可利用該方法更好的判斷疾病，并予以相應的治療方法，以促進患者及早恢復健康。

細菌培養(yǎng)后進行涂片檢查可對培養(yǎng)結(jié)果進行解釋，細菌培養(yǎng)期間，通常伴有微生物不生長現(xiàn)象。以上問題的發(fā)生可能是因患者服用抗生素。此外，培養(yǎng)條件不理想也會導致以上問題的發(fā)生。通過細菌培養(yǎng)后涂片檢查方法實施微生物檢驗，同時，在病原菌類型鑒別診斷中具有重要作用[8]。

但檢查期間仍需加強對有關問題的關注。為提升涂片檢查結(jié)果準確性，需加強對標本質(zhì)量控制的重視。如血液標本采集穿刺點、采集時間、采集期間患者狀態(tài)等，均會對標本質(zhì)量造成影響。為保證良好的標本質(zhì)量，一般情況下，在清晨空腹狀態(tài)下采集標本。此外，穿刺點選擇，盡量選擇健康的上肢[9]。再如結(jié)合纖維支氣管鏡采集痰液標本，有助于標本合格率提高。但因有些醫(yī)院未采用該器械，因此，需對口腔進行全面清潔，并對患者進行有效指導，從而促進標本質(zhì)量的提高。尿液標本采集期間，盡量提取尿液中端。標本獲取時，會陰、尿道口和肛門等位置，需保證各個部位干凈，防止外部微生物浸入標本中，影響涂片檢查結(jié)果[10]。

綜上所述，細菌培養(yǎng)前，實施微生物標本涂片鏡檢，有助于送檢標本質(zhì)量提高，盡可能避免培養(yǎng)結(jié)果誤差，從整體上促進標本培養(yǎng)陽性檢出率提高，值得臨床推廣運用。