錢紅，朱美芹，陳衛(wèi)偉，劉東聲

（1.南京鼓樓醫(yī)院集團(tuán)宿遷市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇 宿遷223800；2.徐州市兒童醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇 徐州221000）

乙型病毒性肝炎是我國(guó)常見的傳染病之一，約有9 000多萬乙肝攜帶者，約3 000萬為慢性乙型肝炎患者[1]。目前，乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）感染引起的慢性乙型肝炎仍是我國(guó)肝細(xì)胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）的主要原因，HCC占我國(guó)肝癌總數(shù)高達(dá)80%以上[2-3]。臨床上判斷是否感染乙型肝炎病毒最簡(jiǎn)單有效的方式是進(jìn)行乙肝血清標(biāo)志物的檢查，因此，準(zhǔn)確檢測(cè)乙肝血清標(biāo)志物對(duì)診斷乙型肝炎尤為重要。近年來，化學(xué)發(fā)光法在臨床應(yīng)用廣泛，其較膠體金法、酶聯(lián)免疫分析法（ELISA）具有簡(jiǎn)便、高效、靈敏、準(zhǔn)確等優(yōu)勢(shì)[4-5]?，F(xiàn)選用雅培Architect i2000與羅氏Cobas e602兩臺(tái)儀器對(duì)105例臨床樣本進(jìn)行乙肝血清標(biāo)志物檢測(cè)，分析檢測(cè)結(jié)果，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料選取2019年2月至2020年1月在本院就診的患者中用雅培Architect i2000檢測(cè)乙肝血清標(biāo)志物，篩選HBsAg≥0.05 IU/mL的樣本105例。其中，男69例，女36例；年齡20～80歲，平均年齡39歲。

1.2 方法抽取患者靜脈血液5 mL送至檢驗(yàn)科，當(dāng)天分離血，清后用雅培Architect i2000檢測(cè)乙肝血清標(biāo)志物。同時(shí)收集該類患者血清樣本，置于-80℃冰箱保存，再用羅氏Cobas e602進(jìn)行檢測(cè)。整個(gè)操作過程嚴(yán)格按照SOP進(jìn)行，由免疫室專業(yè)人員操作，在兩臺(tái)儀器正常運(yùn)行的情況下，采用相應(yīng)儀器配套質(zhì)控及北京康徹斯坦公司生產(chǎn)的第三方質(zhì)控品進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控，且當(dāng)天室內(nèi)質(zhì)控在控，檢測(cè)完成后記錄結(jié)果。

1.3 觀察指標(biāo)比較兩種不同方法檢測(cè)乙肝血清標(biāo)志物（HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb）的陰陽性符合率。生物參考區(qū)間：①雅培Architect i2000，HBsAg＜0.05 IU/mL、HBsAb＜10 IU/L、HBeAg＜1 S/CO、HBeAb＞1 S/CO、HBcAb＜1 S/CO；②羅氏Cobas e602，HBsAg＜0.05 IU/mL、HBsAb＜10 IU/L、HBeAg＜1 COI、HBeAb＞1 COI、HBcAb＞1 COI。該生物參考區(qū)間均來自各廠家配套試劑的原版說明書，檢測(cè)結(jié)果用陰性和陽性表示，在參考區(qū)間內(nèi)判定為陰性，超出參考區(qū)間則判定為陽性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 22統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，將雅培Architect i2000檢測(cè)的HBsAg定量結(jié)果記為Xn，羅氏Cobas e602檢測(cè)的相應(yīng)結(jié)果記為Yn，進(jìn)行線性方程、相關(guān)性分析及圖表制作。

2 結(jié)果

2.1 兩種方法檢測(cè)結(jié)果模式分析雅培Architect i2000與羅氏Cobas e602檢測(cè)檢測(cè)結(jié)果的模式分析詳見表1。

表1 兩種方法檢測(cè)結(jié)果模式分析

2.2 兩臺(tái)儀器檢測(cè)各標(biāo)志物的陰陽性符合率比較兩臺(tái)儀器檢測(cè)HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb的陰陽性符合率分別為100.0%、88.6%、94.3%、96.2%、100.0%，見表2。

表2 兩臺(tái)儀器檢測(cè)各標(biāo)志物的陰陽性符合率比較

2.3 兩臺(tái)儀器檢測(cè)HBsAg定量結(jié)果直線相關(guān)和回歸分析雅培Architect i2000與羅氏Cobas e602檢測(cè)HBsAg的定量結(jié)果進(jìn)行回歸分析，發(fā)現(xiàn)其具有較好的相關(guān)性，HBsAg的直線回歸方程為Y=1.1163X-29.181，決定系數(shù)r2=0.9137。

3 討論

乙型病毒性肝炎是由乙型肝炎病毒引起的以肝臟病變?yōu)橹饕憩F(xiàn)的一種傳染病，起病慢，傳播途徑廣泛，包括母嬰傳播、性傳播、密切接觸傳播、輸血傳播等，廣泛流行于世界各國(guó)，已成為全球性共同面臨的傳染性疾病之一。乙型肝炎病毒屬于嗜肝DNA病毒科，耐熱、耐低溫、耐紫外線，該病毒侵入機(jī)體后，通過相關(guān)受體粘附于肝細(xì)胞表面，而后通過內(nèi)吞作用進(jìn)入肝細(xì)胞進(jìn)行復(fù)制繁殖，這一過程導(dǎo)致機(jī)體產(chǎn)生的免疫應(yīng)答，會(huì)引發(fā)大面積肝細(xì)胞的損傷或壞死，導(dǎo)致重癥肝炎；而免疫力低下者則無法有效清除病毒，使感染遷延不愈而慢性化，若治療不及時(shí)甚至?xí)夯癁楦伟２《净蚪M（rcDNA）在細(xì)胞核內(nèi)可能通過細(xì)胞的DNA復(fù)制機(jī)制轉(zhuǎn)化成共價(jià)閉合環(huán)狀DNA（cccDNA），cccDNA有高度的穩(wěn)定性，在細(xì)胞核內(nèi)可維持?jǐn)?shù)月至數(shù)年，提高了治療難度，甚至導(dǎo)致治療后的反彈。我國(guó)盡管實(shí)施了以預(yù)防為主的綜合性防控策略并取得了顯著成效，但仍是世界上乙型病毒性肝炎最嚴(yán)重的國(guó)家[6]。因此，定量監(jiān)測(cè)患者乙肝血清標(biāo)志物，可為臨床制定治療方案提供有效依據(jù)，同時(shí)，對(duì)乙肝患者的療效監(jiān)測(cè)及預(yù)后判斷等方面也有重要的意義。

雅培和羅氏兩家公司生產(chǎn)的化學(xué)發(fā)光分析儀，均可用于檢測(cè)乙肝病毒血清標(biāo)志物，同時(shí)，對(duì)HBsAg和HBsAb均可達(dá)到定量檢測(cè)的目的，但在其檢測(cè)原理和試劑等方面存在一定的差異。雅培Architect i2000采用的是建立在微粒子捕捉免疫發(fā)光技術(shù)上的微粒子酶免疫分析法，主要用于檢測(cè)大分子物質(zhì)，如病毒抗原、蛋白質(zhì)等。由于檢測(cè)過程中所使用的微粒子直徑?。?.5μm），從而增大了接觸面積，提高了檢測(cè)的靈敏度。此外，微粒子的比重與水相仿，親水性較好，且其與玻璃纖維間的結(jié)合不可逆，這極大提高了檢測(cè)的特異性。

羅氏Cobas e602是采用生物素-鏈霉親和素放大技術(shù)、電化學(xué)發(fā)光技術(shù)，以磁性微粒為固相載體，用三聯(lián)吡啶釕標(biāo)記抗原或抗體，三丙胺為電子供體，而設(shè)計(jì)的一種自動(dòng)分析儀。三聯(lián)吡啶釕可產(chǎn)生穩(wěn)定、高效的連續(xù)發(fā)光，且在反應(yīng)過程中可循環(huán)利用，使發(fā)光得以增強(qiáng)和穩(wěn)定。生物素-鏈霉親和素多級(jí)放大技術(shù)及發(fā)光信號(hào)檢測(cè)的寬線性，在待測(cè)抗原（抗體）極微量或達(dá)到病理期極限時(shí)，均能準(zhǔn)確測(cè)定。

HBsAg是乙肝血清標(biāo)志物中最重要的指標(biāo)之一，提示有完整的病毒顆粒存在，能直接反映患者是否存在乙肝病毒感染。在乙肝的血清標(biāo)志物中，HBsAg定量檢測(cè)一直受到臨床的重視。HBsAg水平與病毒復(fù)制和疾病的進(jìn)展有較高的相關(guān)性，在一定程度上能反映疾病的自然進(jìn)程。HBsAg水平的高低在抗病毒治療應(yīng)答方面有重要的指導(dǎo)意義，在臨床診療中已達(dá)成共識(shí)[7-9]。本研究中兩臺(tái)儀器檢測(cè)HBsAg均采用雙抗原夾心法，均為定量結(jié)果，報(bào)告單位為IU/mL，但線性范圍存在差異。105例用雅培Architect i2000檢測(cè)HBsAg為陽性的樣本，用羅氏Cobas e602檢測(cè)也同樣為陽性。定量分析決定系數(shù)r2=0.9137,相關(guān)性分析顯示兩臺(tái)儀器檢測(cè)HBsAg的符合程度較好。提示，在臨床治療中，兩種儀器對(duì)于HBsAg定量的檢測(cè)有相同的參考價(jià)值。

HBsAb是體內(nèi)對(duì)乙肝病毒的免疫和保護(hù)性抗體，提示人體對(duì)乙肝已有抵抗力。乙型肝炎經(jīng)過治療如能完全消除病毒，則HBsAg會(huì)逐漸降低直至消失，血清中逐漸產(chǎn)生HBsAb。本研究中，兩臺(tái)儀器檢測(cè)HBsAg均為陽性，若HBsAb同時(shí)陽性，則為HBsAg、HBsAb雙陽性的樣本，可能由于HBV發(fā)生基因突變導(dǎo)致，發(fā)生率為2.30%～4.18%[10-13]。本研究中，雅培Architect i2000檢出HBsAg、HBsAb雙陽性的樣本2例，占1.90%；而羅氏Cobas e602檢出12例，占11.4%，相對(duì)較高，與楊平等[13]報(bào)道不一致符。原因可能為由于抗體的多樣性，導(dǎo)致HBsAb的測(cè)定值可根據(jù)檢測(cè)方法的不同而改變，可相差4～10倍。

HBeAg是急性感染的早期標(biāo)志，代表體內(nèi)病毒復(fù)制活躍。HBeAb為機(jī)體受HBeAg刺激而產(chǎn)生的抗體，陽性說明病毒復(fù)制減少，傳染性減弱。HBeAg/HBeAb的血清學(xué)轉(zhuǎn)換對(duì)病情轉(zhuǎn)歸和療效判斷有參考作用。而HBcAb則是乙肝病毒急性感染早期或既往感染指標(biāo)。本研究結(jié)果顯示，2臺(tái)儀器檢測(cè)HBeAg、HBeAb和HBcAb符合率分別為94.3%，96.2%，100%，均較高。

綜上所述，不同發(fā)光儀器檢測(cè)乙肝血清標(biāo)志物時(shí)，結(jié)果可能存在差異，雅培Architect i2000與羅氏Cobas e602定量檢測(cè)HBsAg的符合度較高，在臨床診療中可有相同的參考價(jià)值。此外，乙肝患者在就診過程中，臨床醫(yī)生如發(fā)現(xiàn)不同檢測(cè)機(jī)構(gòu)報(bào)告乙肝模式不相符，應(yīng)考慮是否是由于不同儀器和方法檢測(cè)造成，患者也應(yīng)盡量在同一機(jī)構(gòu)用相同方法檢測(cè)乙肝血清標(biāo)志物，更有利于療效觀察。