李士達，馮增斌，張彬，李方亮，王曉杰，董偉

（承德醫(yī)學院附屬醫(yī)院，河北 承德 067000）

0 引言

隨著社會的發(fā)展，人民飲食結(jié)構(gòu)發(fā)生了很大的變化，高脂、高糖食物在飲食結(jié)構(gòu)中占到了相當大比重，同時伴隨著生活壓力的連年上漲，成年國民的體質(zhì)鍛煉意識較發(fā)達國家依舊有很大差距，很多中年國民身體處于亞健康狀態(tài)。而冠心病早已成為中老年國民生命安全的嚴重威脅因素之一，其在我國的發(fā)病率和死亡率長期居高不下。在冠心病的發(fā)生和發(fā)展中，先天遺傳因素和飲食習慣在其中發(fā)揮的作用不可忽視,應(yīng)做好防治工作[1]。在過去的幾十年中，隨著急診PCI和冠狀動脈旁路移植術(shù)的廣泛開展，心血管疾病患者的壽命得到有效延長，且死亡率較前有所下降。但在臨床工作中，絕大部分冠心病患者發(fā)病入院時，其自身心血管情況已不容樂觀，需要介入或冠狀動脈旁路移植術(shù)治療，故在臨床工作中，冠心病的篩查及預(yù)防較治療相比同樣重要，而大量研究表明，血管炎癥因子參與了血管動脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展的方方面面。本文通過對不同臨床資料分組下的患者血清檢測，及血清中基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9）和細胞黏附因子-1（ICAM-1）含量，根據(jù)其是否具有統(tǒng)計學意義，進而探討其在冠心病患者血清中的診斷價值，及其在冠心病篩查工作中的指導(dǎo)作用。

1 資料和方法

1.1 一般資料

將2018年9月至2020年10月承德醫(yī)學院附屬醫(yī)院心臟外科23例冠心病患者及18例部分門診體檢患者作為研究對象，其中女性19例，男性22例，年齡50～76（60.4±7.6）歲。納入標準：①符合美國心臟病學會(American College of Cardiology, ACC)/美國心臟協(xié)會(American Heart Association,AHA)的冠心病診斷標準。②心臟冠脈造影提示為心血管缺血性病變患者。③所有患者均簽署知情同意書并自愿配合本次研究血清標本的采集工作，研究符合倫理學原則且通過醫(yī)院倫理委員會審批。排除標準：①合并周圍血管疾病、腦卒中、惡性腫瘤、哮喘、嚴重的肝腎功能不全以及合并感染性疾病的患者。②既往合并周圍血管病、免疫系統(tǒng)疾病的患者。③近6個月內(nèi)有創(chuàng)傷或手術(shù)史者。④合并凝血功能異常或應(yīng)用炎癥抑制藥物（如非甾體類消炎藥等）的患者均予以剔除。

1.2 方法與分組

1.2.1 臨床資料

臨床資料均通過查閱病人病歷資料獲得。記錄患者的性別、年齡、吸煙飲酒史、家族史、癥狀發(fā)作情況、出院服藥情況、及其他慢性疾病（高血壓、糖尿病、甲狀腺功能異常、腦卒中、外周血管動脈硬化）。

1.2.2 患者造影結(jié)果

所有患者入院均已做介入冠脈造影檢查，明確各支冠脈阻塞情況。冠狀動脈阻塞的嚴重程度分級采用Gensini評分（各支冠狀動脈狹窄評分乘以其對應(yīng)系數(shù)，分值總和即為Gensini總評分），具體為冠脈血管內(nèi)狹窄：0%～25%計1分；26%～50% 計 2分；51%～75% 計 4分；76%～90% 計 8分；91%～99%計16分；100%計32分。另外各支病變冠狀動脈分別對應(yīng)其相應(yīng)系數(shù)：左冠脈主干系數(shù)為5，左前降支近段為2.5、中段為1.5、遠段為1，依次降低；左回旋支近段為2.5，中、遠段為1，右冠脈為1，剩余小分支為0.5。見表1。

表1 冠脈Gensini評分

1.2.3 隨訪觀察

對所有患者進行6個月隨訪，包括復(fù)發(fā)心絞痛、急性心肌梗死、心力衰竭及死亡等不良心血管事件的發(fā)生情況。

1.2.4 MMP-9、ICAM-1血清因子水平檢測

患者于治療前分別采5m1空腹橈動脈血，置于未加抗凝劑的試管中，室溫靜置1h，隨后于離心機上3000 r/min離心10min，將分離出的血清置于-80℃環(huán)境冷藏保存。采用雙抗體酶聯(lián)免疫法(ELISA)對血清中MMPs、ICAM-1等炎癥因子含量進行檢測（實驗儀器為美國貝爾公司所產(chǎn)型號BIO-Rod450全自動酶標儀），試劑盒嚴格按照操作說明進行。

1.3 統(tǒng)計學處理

數(shù)據(jù)統(tǒng)計學分析采用SPSS 23軟件，各分組統(tǒng)計資料用均數(shù)標準差±標準誤（±s）表示，比較采用t檢驗或單因素方差分析。采用Pearson相關(guān)分析，評估患者血漿MMPs、ICAM-1表達水平與冠脈Gensini評分間的相關(guān)性，P＜0.05提示具有顯著相關(guān)性，P＜0.01提示具有極顯著相關(guān)性，具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 不同臨床病例資料MMP-9、ICAM-1的血清含量比較

患者根據(jù)年齡、性別、吸煙史、高血壓病史分組，血清樣本MMP-9、ICAM-1含量差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），而既往有糖尿病、冠心病病史病例的血清樣本MMP-9、ICAM-1含量普遍高于無糖尿病、冠心病病史的病例，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表2。

表2 不同臨床病例資料MMP-9、ICAM-1的血清含量比較（±s）

表2 不同臨床病例資料MMP-9、ICAM-1的血清含量比較（±s）

臨床資料 例 MMP-9(ug/L) t P ICAM-1(ng/L) t P性別 男 22 301.24±71.34 1.729 ＞0.05 430.20±60.75 0.751 ＞0.05女 19 181.48±17.87 378.45±23.30年齡 ≤65歲 11 267.87±30.23 0.465 ＞0.05 390.75±24.35 0.27 ＞0.05＞65歲 30 228.08±45.84 411.90±46.10吸煙史 是 16 235.24±29.89 0.045 ＞0.05 381.85±24.50 0.565 ＞0.05否 25 238.60±54.39 421.80±54.15高血壓 是 19 273.52±72.10 0.945 ＞0.05 462.80±69.55 1.565 ＞0.05否 22 205.74±23.23 357.35±18.15糖尿病 是 13 393.24±159.61 2.345 ＜0.05 533.45±94.55 2.731 ＜0.05否28 106.69±18.91 347.15±16.90冠心病 是 23 308.25±64.41 2.098 ＜0.05 468.65±56.95 2.155 ＜0.05否18 116.48±20.46 326.45±66.40

2.2 冠心病患者MMP-9、ICAM-1的血清含量與Gensini評分比較

通過Pearson相關(guān)分析，可得出在冠心病患者血清中MMP-9（r=0.64）水平與 Gensini評分相關(guān)性顯著（P＜0.05），ICAM-1（r=0.71） 水 平 與 Gensini評 分 相 關(guān) 性 極 顯著（P＜0.01）。

3 討論

臨床不良心血管事件的發(fā)生很大程度由于冠脈血管粥樣硬化斑塊的破裂所導(dǎo)致，而基質(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloproteinase, MMPs）在不穩(wěn)定斑塊中往往高表達，其活性較在穩(wěn)定斑塊中明顯升高。MMP-9是其中重要的代表性蛋白酶。既往研究發(fā)現(xiàn)，基質(zhì)金屬蛋白酶 9（MMP-9）可引起血管中粥樣硬化斑塊的纖維帽基質(zhì)分解，影響粥樣斑塊的穩(wěn)定性。而粥樣斑塊的不穩(wěn)定、脫落后可引起冠脈阻塞、血栓形成，進一步導(dǎo)致急性冠脈綜合征等不良后果[3]。既往研究表明，MMP9參與了心梗后心室重塑、心力衰竭、腹主動脈瘤的持續(xù)擴張及破裂等眾多心血管疾病的病理生理過程。PatrickCollier和Chris J.Watson等學者研究發(fā)現(xiàn)，在無癥狀高血壓人群中，MMP9水平升高的患者左房容積指數(shù)明顯異常(P=0.041,P=0.007)。對MMP9的觀察可能有助于確定進展性高血壓心臟病高風險的高血壓患者亞群，從而促進有針對性的預(yù)防策略[4]。有最新的動物模型和表達分析研究發(fā)現(xiàn)，病理條件下MMPs活性的改變會導(dǎo)致蛋白質(zhì)的水解，從而導(dǎo)致不良的心室重構(gòu)，導(dǎo)致左室擴張、收縮功能喪失和進行性臨床心力衰竭[5-6]。人們在人類動脈粥樣硬化斑塊中發(fā)現(xiàn)了MMP-9的過表達和血清含量水平的升高，并與過早發(fā)生冠狀動脈硬化、收縮期高血壓、主動脈硬化和冠心病有關(guān)。此外，相關(guān)研究也表明，MMP9的功能遺傳變異可能與心血管疾病的易感性和進展有關(guān)[7-9]，并且患者血漿MMP9水平的升高可以導(dǎo)致冠心病患者死亡風險相對升高[10]?；|(zhì)金屬蛋白酶-9由707個氨基酸組成的長鏈蛋白質(zhì)，血管內(nèi)皮細胞、平滑肌細胞和巨噬細胞等均可分泌，為MMPs中的明膠酶，其作用為降解細胞外基質(zhì)（主要成分彈力蛋白和膠原蛋白）的[11]，故MMP9水平升高增加了冠心病患者動脈粥樣硬化斑塊的不穩(wěn)定性，進而導(dǎo)致患者不良心血管事件的發(fā)生率明顯增加。

細胞黏附因子-1（ICAM-1）與細胞表面受體結(jié)合而發(fā)揮作用[12]，其本質(zhì)為免疫球蛋白，其經(jīng)蛋白酶分解后即形成可溶性細胞外成分s ICAM-1, 該成分作用為促進單核細胞對脂質(zhì)的吞噬作用, 加速泡沫細胞的形成[13]，即參與了單核細胞向巨噬細胞、泡沫細胞的轉(zhuǎn)變過程，同時其還參與白細胞和紅細胞的黏附，進而導(dǎo)致血管內(nèi)皮的損傷，其在動脈粥樣硬化斑塊形成和進展的各個環(huán)節(jié)中均有參與。另外亦可促進干擾素降解細胞外基質(zhì), 釋放基質(zhì)金屬蛋白酶, 提高平滑肌細胞增殖, 誘發(fā)血管痙攣, 使斑塊變得不穩(wěn)定, 易于破裂, 進而發(fā)生UAP、SAP及AMI[14]。有研究發(fā)現(xiàn)[15]，在冠心病患者的脂紋和斑塊中，存在著ICAM-1的大量表達，其表達水平越高，往往提示斑塊不穩(wěn)定，冠脈硬化狹窄越嚴重。同理，若抑制ICAM-1表達，即可降低眾多由黏附因子介導(dǎo)的炎癥免疫反應(yīng)，進而起到穩(wěn)定斑塊的作用，保護心血管組織。

綜上，MMP-9、ICAM-1可作為臨床冠心病發(fā)病篩查的生物指標，為冠心病患者用藥、PCI或冠狀動脈旁路移植術(shù)術(shù)后的病情發(fā)展、復(fù)發(fā)風險、治療療效和預(yù)后評估提供參考。