駱小年,段友健,郭童,嚴(yán)子微,李文康,吳晨
(大連海洋大學(xué) 水產(chǎn)與生命學(xué)院,遼寧 大連 116023)
北方須鰍Barbatulabarbatulanuda,俗稱花泥鰍、北方條鰍等,隸屬于鯉形目Cypriniformes鰍科Cobitidae條鰍亞科Nemachilinae須鰍屬Barbatula,在中國(guó)東北主要分布于鴨綠江、遼河、黑龍江上中游、烏蘇里江、松花江、嫩江、牡丹江、綏芬河、圖們江等水系。北方須鰍為山區(qū)溪流性小型魚類,雜食性,適應(yīng)性強(qiáng),因其肉質(zhì)細(xì)嫩鮮美,深受消費(fèi)者喜愛[1]。在遼寧東部山區(qū),商品魚可達(dá)60~120元/kg,經(jīng)濟(jì)價(jià)值較高,市場(chǎng)供不應(yīng)求。然而,近年來,北方須鰍因過度捕撈導(dǎo)致其自然資源量急劇下降,為保護(hù)其物種資源和發(fā)展山區(qū)特色經(jīng)濟(jì),開展北方須鰍的規(guī)?;斯し敝澈驮鲋撤帕鞴ぷ髌仍诿冀?。
目前,北方須鰍生物學(xué)特性已有研究[2-7],其苗種生長(zhǎng)最適蛋白質(zhì)需求為40.72%[8],且室內(nèi)小水體養(yǎng)殖試驗(yàn)獲得初步成功[9],然而人工繁殖技術(shù)尚未見報(bào)道。經(jīng)作者不斷探索,2015年北方須鰍繁殖初試獲得成功,2019年其規(guī)模化人工繁殖獲得成功,這為北方須鰍產(chǎn)業(yè)化發(fā)展奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。本研究中,報(bào)道了北方須鰍人工繁殖與胚胎發(fā)育研究成果,旨在為其規(guī)?;斯ぴ鲳B(yǎng)殖技術(shù)提供指導(dǎo)。
試驗(yàn)用北方須鰍親魚,一部分購(gòu)自本溪縣小市鎮(zhèn)野生魚交易市場(chǎng),另一部分于太子河捕撈獲得,雌魚體質(zhì)量為8.0~25.0 g,雄魚體質(zhì)量為4.0~20.0 g。親魚運(yùn)回后于養(yǎng)殖場(chǎng)車間室內(nèi)暫養(yǎng)池暫養(yǎng),暫養(yǎng)池規(guī)格為4.0 m×4.0 m×1.5 m,水深保持在0.8 m左右,用10 mg/L高錳酸鉀藥浴約15 min。
于2015年3—4月在遼寧省新賓滿族自治縣平頂山鎮(zhèn)漁場(chǎng)進(jìn)行人工繁殖初試;于2016年3月—2019年4月在遼寧省桓仁滿族自治縣木盂子鎮(zhèn)漁場(chǎng)進(jìn)行北方須鰍人工繁殖中試。
1.2.1 雌雄鑒定及性成熟度鑒別 非生殖季節(jié)北方須鰍雌雄魚不易鑒別。生殖季節(jié),雌魚個(gè)體明顯大于雄魚,腹部膨大柔軟,花紋不明顯,且生殖孔為水滴狀,紅腫外凸。卵巢發(fā)育成熟時(shí),腹部膨大、飽滿,腹部形態(tài)類似泥鰍[10-11],部分魚腹部透明,似有“透明窗”,能清晰觀察到卵巢內(nèi)卵粒,輕微擠壓即有卵粒淌出;而雄魚腹部細(xì)長(zhǎng),有條紋狀紋路,生殖季節(jié)觸摸皮膚有粗糙感,生殖孔向內(nèi)凹陷,呈箭頭狀,性成熟個(gè)體擠壓腹部有少量白色精液流出(圖1)。
1.2.2 催產(chǎn)藥物和適宜雌雄比例 催產(chǎn)藥物使用促黃體素釋放激素類似物2號(hào)(LHRH-A2)等混合催產(chǎn)藥物,用1 mL醫(yī)用注射器于背鰭基部肌肉一次注射,雄魚劑量為雌魚的1/2,每尾魚注射藥量為0.1~0.2 mL。為確定其最佳雌雄配比,設(shè)置5組梯度試驗(yàn),每組雌魚100尾,雄魚以10尾為基準(zhǔn)遞增至50尾(即雌魚與雄魚的比例為100∶50、100∶40、100∶30、100∶20、100∶10),每組設(shè)3個(gè)重復(fù)。
1.2.3 人工催情自然產(chǎn)卵試驗(yàn) 在水族箱(1.0 m×0.5 m×0.4 m)中進(jìn)行人工催產(chǎn),產(chǎn)卵附著物設(shè)3類。其中,A組參照鯉Cyprinuscarpio催產(chǎn)方式[10],水族箱中懸掛棕櫚魚巢,B組水族箱底部放置小石頭,C組水族箱底部放置河道細(xì)沙粒。每個(gè)水族箱放置已注射催產(chǎn)藥物的親魚30組,每組兩個(gè)重復(fù)。保持水溫為14~18 ℃,氣泵充氣增氧,溶氧為6 mg/L以上。同時(shí)進(jìn)行繁殖適溫試驗(yàn),水溫9~21 ℃,設(shè)置7個(gè)梯度,每組間隔0.5 ℃,催產(chǎn)30組。出現(xiàn)交配現(xiàn)象時(shí),通過壓擠腹部產(chǎn)卵的方式,統(tǒng)計(jì)每組雌魚成熟的數(shù)量。
1.2.4 人工授精 采用干法受精,至效應(yīng)期,輕壓腹部檢查雌魚,如雌魚卵順利外流,即可進(jìn)行人工授精。 為了方便操作,使用麻醉藥物乙二醇苯醚進(jìn)行試驗(yàn)效果對(duì)比,體積分?jǐn)?shù)為0.1~0.2 mL/L。將雄魚解剖取出精巢,用0.75 mm的篩絹網(wǎng)布擠壓過濾,獲得精液,置于4 ℃冰壺內(nèi)備用。卵粒收集完后,加入精液和少許質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.7%的生理鹽水?dāng)嚢瑁咕殉浞只旌?。加入與孵化溫度相同的清水,繼續(xù)攪拌約5 min后,倒掉多余的體腔液和精液,再漂洗2~3次,完成授精,進(jìn)行脫黏或不脫黏孵化。
1.2.5 孵化
1)魚巢孵化。用棕櫚魚巢或0.83 mm的篩絹網(wǎng)布接卵,懸掛于室外水泥池中,靜水充氧,溶解氧始終保持在6 mg/L以上,每2 d換新水一次,每次換水1/3,直至破膜。
2)脫黏孵化。采用黃泥漿脫黏。受精卵置于錐形篩絹(0.245 mm)孵化簍內(nèi),孵化簍上端直徑為60 cm,高為20 cm,下部高為80 cm,最底部直徑為5 cm,底部包裹氣石,孵化過程中氣量大小以卵粒全部翻滾無死角為宜。每簍放卵25~30萬粒,在孵化過程中每隔0.5 h觀察一次箱體網(wǎng)眼通透情況,及時(shí)換箱或刷箱,保持水質(zhì)清潔。遇有箱內(nèi)魚卵水霉嚴(yán)重時(shí),將卵倒出重新漂洗,直至清理完畢,孵化期間水溫保持在8.5~25 ℃。
3)胚胎發(fā)育觀察。采用奧林巴斯CX21型號(hào)顯微鏡在 4×10倍鏡下觀察。
4)適時(shí)下池(塘)。仔魚孵出3 d后,部分魚苗依附在篩絹網(wǎng)上,魚苗體色由透明逐漸變成灰黑色,當(dāng)卵黃囊吸收一半以上,鰾充氣,消化道貫通,即可下池(塘)。
1.2.6 孵化效率評(píng)價(jià)
催產(chǎn)率:產(chǎn)卵魚數(shù)占催情魚總數(shù)的百分比。
受精率:原腸中期活卵數(shù)占產(chǎn)卵總數(shù)的百分比。
孵化率:魚苗水花數(shù)占受精卵總數(shù)的百分比。
注射催產(chǎn)藥物后,至效應(yīng)時(shí)間,采用人工催產(chǎn)自然產(chǎn)卵試驗(yàn), A、B、C組水族箱中棕櫚魚巢、石頭及沙子上均未見北方須鰍魚卵,說明該方法不適宜北方須鰍人工繁殖接卵。
采用催情后人工授精的方法,北方須鰍親本在17~22 ℃水溫下,23~26 h到達(dá)效應(yīng)時(shí)間。未受精的成熟卵為圓球形、淺黃色、具有彈性,卵徑為(2.15±0.07)mm,卵膜厚且堅(jiān)韌,不透明;解剖取出精巢,研磨過濾后獲得精液,精液入水即散,鏡檢可見大量快速游動(dòng)精子。
干法受精后,受精卵遇水產(chǎn)生黏性,卵膜吸水,卵周隙明顯擴(kuò)大,卵徑可達(dá)(2.35±0.05)mm。北方須鰍產(chǎn)卵最低水溫為8.5 ℃,從卵受精到仔魚孵出需積溫66.67 ℃·d,至仔魚平游需積溫126.5 ℃·d。水溫為8~24 ℃,經(jīng)98 h 54 min孵出,初孵仔魚全長(zhǎng)為(4.9±0.8)mm,體質(zhì)量為(0.6±0.1)mg,全身透明,仔魚卵黃囊大、側(cè)臥水底、少游動(dòng),隨著卵黃囊的吸收,身體漸長(zhǎng),活動(dòng)能力加強(qiáng),開始間歇在水體中下層活動(dòng),受到外界驚擾時(shí),能迅速游開。
圖1 北方須鰍雌雄鑒別Fig.1 Gender discriminaion of loach Barbatula barbatula nuda
從圖2可見:不同雌雄比例情況下北方須鰍受精率存在顯著性差異(P<0.05);隨著雄魚數(shù)量的增加,其受精率逐漸升高,當(dāng)雄魚數(shù)量低于40尾時(shí),受精率隨著雄魚數(shù)量的遞增而顯著增加(P<0.05),而超過50尾后,其受精率無顯著性差異(P>0.05)。這表明,北方須鰍雌雄比例為2∶1時(shí),受精率最高。
標(biāo)有不同字母者表示組間有顯著性差異(P<0.05),標(biāo)有相同字母者表示組間無顯著性差異(P>0.05),下同。The means with different letters are significantly different in the groups at the 0.05 probability level, and the means with the same letter within the same column are not significant differences, et sequentia.圖2 雌雄比例對(duì)受精率的影響Fig.2 Effects of female to male ratio on fertilization rate
從圖3可見,注射催產(chǎn)藥物23 h后,隨著水溫從9 ℃升至17 ℃,順利擠出成熟卵粒的雌魚數(shù)量顯著增加(P<0.05),水溫17 ℃時(shí),親魚性腺成熟數(shù)量達(dá)到峰值,繼續(xù)升高水溫,成熟魚數(shù)量趨于穩(wěn)定。因此,升溫至17 ℃有利于親魚集中產(chǎn)卵,此為提高催產(chǎn)效率的有效途徑。
圖3 注射催產(chǎn)藥物后水溫對(duì)雌魚性腺成熟的影響Fig.3 Effects of water temperature on ovary maturity after hormone injection
2.5.1 北方須鰍人工繁殖初試 于2015年3月28日至4月17日在遼寧新賓平頂山鎮(zhèn)進(jìn)行了3批次北方須鰍人工繁殖試驗(yàn)。從表1可見:共催產(chǎn)雌親魚630組,平均催產(chǎn)率為80.8%,平均受精率為84.7%,平均孵化率為51.1%,獲卵68.4萬粒,獲仔魚35.2萬尾;在水溫16~20 ℃條件下,一次注射,效應(yīng)時(shí)間為23~26 h,可在室外水泥池內(nèi)掛巢孵化,但孵化率均不超過40%,且孵化期較長(zhǎng),均達(dá)384 h以上,而室內(nèi)孵化簍孵化,孵化率達(dá)88.5%,孵化期可縮短至98 h。
表1 2015年新賓滿族自治縣平頂山鎮(zhèn)漁場(chǎng)北方須鰍繁殖初試
2.5.2 北方須鰍繁殖中試 于2016—2019年在遼寧省桓仁滿族自治縣進(jìn)行北方須鰍繁殖中試。從表2可見,中試共催產(chǎn)北方須鰍雌親魚55 000組,獲卵5 960萬粒,平均催產(chǎn)率為45.0%,平均受精率為56.0%,平均孵化率42.7%,獲水花1 840.3萬尾,其中2016年孵化受采用自然水溫(8~15 ℃)的影響,孵化率僅為35%,低于2017—2019年孵化率(人工控制水溫18~22 ℃)40%~55%,2017—2018年受麻醉藥物的影響,人工授精的受精率低于30%,遠(yuǎn)低于2016、2019年的80%、85%。
表2 2016—2019年桓仁滿族自治縣木盂子鎮(zhèn)漁場(chǎng)北方須鰍繁殖中試
北方須鰍的胚胎發(fā)育過程可分為受精卵、胚盤形成、卵裂、囊胚、原腸、神經(jīng)胚、器官分化和孵化出膜8個(gè)階段,根據(jù)胚胎形態(tài)特征的變化又可劃分為17時(shí)期。因達(dá)到各發(fā)育期的時(shí)間存在個(gè)體差異,將50%個(gè)體出現(xiàn)新特征作為發(fā)育時(shí)期的劃分標(biāo)準(zhǔn),具體見表3和圖4。
表3 北方須鰍胚胎發(fā)育時(shí)序(2019年,水溫18~22 ℃)Tab.3 Embryonic development of loach Barbatula barbatula nuda (2019, water temperature of 18-22 ℃)
A—受精卵;B—胚盤形成; C—2細(xì)胞期;D—4細(xì)胞期;E—8細(xì)胞期;F—多細(xì)胞期;G—囊胚期;H—囊胚晚期;I—原腸早期;J—原腸中期;K—原腸晚期;L—神經(jīng)胚期;M—眼囊期;N—尾芽期;O—肌肉效應(yīng)期;P—出膜前期;Q—仔魚。A—fertilized egg; B—blastoderm; C—2 cell stage; D—4 cell stage; E—8 cell stage; F—multicellular stage; G—blastula stage; H—late blastula; I—early gastrula; J—middle gastrula; K—late gastrula; L—neurula; M—optic capsula stage; N—tail bud stage; O—muscular effect stage; P—prehatching stage; Q—larva.圖4 北方須鰍胚胎發(fā)育Fig.4 Embryonic development of loach Barbatula barbatula nuda
通過實(shí)地調(diào)查發(fā)現(xiàn),北方須鰍通常晝伏夜出。繁殖期間北方須鰍將產(chǎn)卵場(chǎng)附近石頭、沙子、灰塵清理干凈,選擇河流較緩、硬底質(zhì)的河床處產(chǎn)卵。產(chǎn)卵后親魚無護(hù)卵行為,卵粒較小,顏色灰白色,與河床砂礫相近,不易被敵害發(fā)現(xiàn)。人工催產(chǎn)至效應(yīng)時(shí)間時(shí),雌雄魚成對(duì)浮于水上層并排轉(zhuǎn)圈游動(dòng),類似于“雙人舞蹈”,產(chǎn)畢可見雌魚翻著白肚皮呈僵尸狀沉于底層。據(jù)觀察,北方須鰍的產(chǎn)卵行為與泥鰍不同,北方須鰍繁殖產(chǎn)卵時(shí)無泥鰍Misgurnusanguillicaudatus的纏繞產(chǎn)卵行為[12]。這可能與北方須鰍身體較短有關(guān),不便于纏繞,而泥鰍體型修長(zhǎng),易于纏繞。北方須鰍卵的類型與同一流域的拉氏鱥Phoxinuslagowskii[13]、唇魚骨Hemibarbuslabeo[14]等一樣,均是黏性卵,在人為控制條件下,還未能自然產(chǎn)卵,推測(cè)可能是產(chǎn)卵條件還未達(dá)到其自然產(chǎn)卵的環(huán)境。在找到人工條件下北方須鰍自然產(chǎn)卵的限制因子之前,采用人工授精是實(shí)現(xiàn)北方須鰍繁殖的高效方法。
本研究顯示,北方須鰍在遼寧新賓和桓仁的人工產(chǎn)卵時(shí)間在3月下旬—4月上旬(表1、表2),這與實(shí)地觀察結(jié)果相一致。在新賓滿族自治縣平頂山鎮(zhèn)太子河主河段水溫為8.5 ℃時(shí)北方須鰍便開始產(chǎn)卵,最早繁殖期為3月28日前后,繁殖末期在4月15日左右。北方須鰍產(chǎn)卵最低水溫為8.5 ℃,遠(yuǎn)低于泥鰍產(chǎn)卵最低產(chǎn)卵水溫(16 ℃),這可能與不同種類間的繁殖策略差異有關(guān),屬于北方須鰍對(duì)低溫環(huán)境的一種適應(yīng)性特征。北方須鰍產(chǎn)卵期較早,北方河流冰雪融化后便開始繁殖活動(dòng),此時(shí)其他魚類尚未開始繁殖,敵害較少,這種孵育方式推測(cè)是北方須鰍這種魚卵卵徑小且仔魚較小的魚類對(duì)生存環(huán)境的一種生態(tài)適應(yīng)。北方須鰍人工繁殖試驗(yàn)表明,適宜北方須鰍孵化水溫在17 ℃以上,其原因是:首先,水溫高且恒定,則北方須鰍孵化周期短,與室外水泥池(水溫8~12 ℃)孵化大約需15 d相比,北方須鰍室內(nèi)孵化簍孵化3~4 d即能破膜,從而也減少了胚胎死亡的機(jī)會(huì);用孵化簍孵化方法能及時(shí)剔除死卵,保證孵化水質(zhì),其孵化率達(dá)50%以上,從而提高孵化效率,但其孵化率并未達(dá)80%以上,這可能與本試驗(yàn)中使用自然河流中的野生親本有關(guān)。筆者認(rèn)為,如果親本源自人工精心培育的親魚,其孵化效率會(huì)得到較大提高。
為減輕魚類人工催產(chǎn)過程中親魚的損傷,藥物麻醉在魚類人工授精中得到越來越廣泛的應(yīng)用[15-17]。由于北方須鰍個(gè)體小、體表黏液較多,麻醉藥物在北方須鰍催產(chǎn)上的應(yīng)用同樣帶來較多的好處。經(jīng)麻醉后的北方須鰍親魚在采卵授精時(shí),其掙扎次數(shù)和強(qiáng)度明顯弱于未麻醉親魚,促使親魚采卵時(shí)間大為縮短,從而大大提高了操作效率,同時(shí)減少了親魚的損耗。但麻醉對(duì)受精率影響較大,未麻醉組受精率達(dá)80%以上,麻醉組受精率低于30%(表2)。Billard[18]認(rèn)為,在授精稀釋液中麻醉劑(乙二醇苯醚)的體積分?jǐn)?shù)大于0.05% 時(shí)才會(huì)影響精子的活力,且麻醉劑對(duì)人工授精時(shí)產(chǎn)生不利影響的概率較低。Wagner 等[19]研究認(rèn)為,當(dāng)MS-222麻醉藥物質(zhì)量濃度在15~100 mg/L,丁香油質(zhì)量濃度在10~100 mg/L,CO2質(zhì)量濃度在50~173 mg/L時(shí),活動(dòng)精子的比例為68%~87%,不受麻醉的影響。然而,隨著麻醉藥質(zhì)量濃度的增加,精子持續(xù)運(yùn)動(dòng)時(shí)間則減少,MS-222影響下精子運(yùn)動(dòng)的平均持續(xù)時(shí)間為55~36 s,丁香油影響下的平均持續(xù)時(shí)間為56~37 s,CO2影響下的精子運(yùn)動(dòng)持續(xù)時(shí)間較短(31~43 s),表明麻醉藥在一定程度上影響受精率。本試驗(yàn)中采用干法人工授精,拭干親魚體表帶有乙二醇苯醚的多余水分,但受精率仍然受到較大影響,推測(cè)造成這一因素的原因是北方須鰍屬小型無鱗魚類,藥物通過身體較快地吸收進(jìn)入體液,從而影響了精巢,導(dǎo)致精子活力下降。綜上所述,北方須鰍在人工授精時(shí),在未找到不影響精子活力的合適麻醉劑量平衡點(diǎn)之前,不建議使用麻醉藥物。
鰍類人工催情后既可自然產(chǎn)卵也可采取人工授精,而北方須鰍目前僅能采取人工授精。綜合近幾年北方須鰍人工規(guī)?;敝吃囼?yàn),可將其人工授精過程總結(jié)為“擠、剪、攪、撈、洗、放”6個(gè)字。
1)擠。輕輕擠壓雌魚腹部,將成熟的卵流淌至干凈的盆中。
2)剪。解剖雄魚取其精巢,置于0.75~0.96 mm篩絹網(wǎng)中擠壓使精液淌出,點(diǎn)滴至盆中卵上,用鵝毛攪動(dòng)至均勻。
3)攪。盆中倒入清水,攪動(dòng)受精,30 s后加入黃泥漿,攪動(dòng)至受精卵的外膜上附一層薄薄的泥漿。
4)撈。在多數(shù)受精卵卵膜附有黃泥后,用撈網(wǎng)撈出受精卵放入裝有相近水溫的清水中進(jìn)行吸水,吸水過程使受精卵變大,卵體表更具彈性。
5)洗。用清潔的水沖洗受精卵上的黃泥,同時(shí)用手不停地?cái)噭?dòng),洗凈即可。
6)放。將受精卵洗干凈后,根據(jù)每個(gè)孵化簍的大小確定放卵量,用塑料量筒杯進(jìn)行體積計(jì)量或稱重計(jì)量,后放入孵化簍中進(jìn)行孵化。
中國(guó)常見鰍科品種胚胎發(fā)育過程中(表4),長(zhǎng)薄鰍Leptobotiaelongata、中華沙鰍Botiasuperciliaris和花斑副沙鰍Parabotiafasciata為產(chǎn)漂流性卵魚類,其余均為產(chǎn)黏性卵魚類,其中,安氏高原鰍Triplophysaangeli和東方高原鰍Trilophysaorientalis魚卵為微黏性,北方須鰍為產(chǎn)強(qiáng)黏性卵魚類。泥鰍在水溫19~23 ℃條件下,40~60 min進(jìn)入2細(xì)胞期,或在20 ℃條件下,1 h 38 min進(jìn)入2細(xì)胞期;貝氏高原鰍進(jìn)入2細(xì)胞期的時(shí)間較長(zhǎng),需4 h 20 min,但其孵化溫度較低,為9.0~12.8 ℃;而本試驗(yàn)中的北方須鰍在水溫17~22 ℃條件下,進(jìn)入2細(xì)胞期的時(shí)間需4 h。綜合溫度因素的影響,北方須鰍從受精卵進(jìn)入卵裂所需時(shí)間最長(zhǎng),這可能與北方須鰍的胚胎發(fā)育特性及其在自然界中生存的環(huán)境有關(guān)。
表4 中國(guó)常見鰍科魚類的胚胎發(fā)育特征Tab.4 Embryonic developmental features of species in Cobitidae in China
土著經(jīng)濟(jì)魚類是大自然賜予的寶貴種質(zhì)資源庫(kù),加強(qiáng)資源的保護(hù)開發(fā)利用研究,了解魚類資源的分布、洄游、繁衍等生物學(xué)特性,掌握高效、合理開發(fā)技術(shù),提高科學(xué)管理水平,是漁業(yè)生產(chǎn)持續(xù)發(fā)展的重要保障。北方須鰍是遼河土著名優(yōu)溪流性魚類,是遼寧省重要土著淡水魚類,開發(fā)前景廣闊[31],其人工繁殖的成功,為北方須鰍產(chǎn)業(yè)化養(yǎng)殖奠定了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ),同時(shí)有助于推動(dòng)中國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖品種結(jié)構(gòu)改善,對(duì)建設(shè)美麗鄉(xiāng)村具有重要意義。
1)通過生態(tài)和生理調(diào)控措施,可實(shí)現(xiàn)野生北方須鰍的規(guī)模化人工繁殖。通過注射LHRH-A2等混合催產(chǎn)藥物催產(chǎn)北方須鰍雌親魚55 000組,獲卵5 960萬粒,平均催產(chǎn)率45.0%,平均受精率56.0%,平均孵化率42.7%,獲水花魚苗1 840.3萬尾。
2)在遼寧東部山區(qū)北方須鰍適宜繁殖季節(jié)主要集中在3月中旬至4月上旬。
3)北方須鰍產(chǎn)卵最低水溫8.5 ℃,適宜水溫17~22 ℃,在此溫度下,效應(yīng)時(shí)間為23~26 h。
4)北方須鰍人工授精適宜雌雄比為2∶1。
5)將北方須鰍胚胎發(fā)育分為8個(gè)階段17個(gè)時(shí)期,受精卵吸水后卵徑為(2.35±0.05)mm,歷經(jīng)胚盤形成期、卵裂期、囊胚期、原腸期、神經(jīng)胚、器官分化期和出膜期。從受精至仔魚孵出需積溫為66.67 ℃·d,至仔魚平游需積溫為126.5 ℃·d。初孵仔魚全長(zhǎng)為(4.9±0.8)mm,體質(zhì)量為(0.6±0.1)mg。