鄒惠英，李麗華，向雨

（中山市黃圃人民醫(yī)院，廣東 中山 528400）

0 引言

沙眼衣原體、淋病菌及解脲支原體這3 種病原體是引發(fā)性病傳播的常見病原體，這3 種病原體引發(fā)的泌尿生殖系統(tǒng)感染是造成我國發(fā)生性傳播的重要病癥之一[1]。近年來，人們生活觀念的改變，尤其是對待性生活的開放，導(dǎo)致泌尿生殖系統(tǒng)發(fā)病患者數(shù)量逐漸增多，給患者的日常生活與工作造成嚴(yán)重影響。如果不能及時(shí)、準(zhǔn)確的進(jìn)行疾病診斷，并無法給予患者對癥治療，容易耽誤疾病治療，給患者造成更大的影響。沙眼衣原體是基本生理特征與革蘭陽性細(xì)菌相似，具有非常高的傳染性[2]。淋病菌屬于革蘭陰性雙球菌，該病原體在性接觸高危人群中的流行性和傳播性極強(qiáng)。解脲支原體可通過損害精子、吸附精子造成不孕不育[3]?？傊? 者對人類健康造成了嚴(yán)重威脅，早確診、早治療是及時(shí)其阻止對人類生殖健康損害、控制病情發(fā)展的關(guān)鍵。本文將對2019 年1 月至2019 年12 月到我院進(jìn)行分泌物沙眼衣原體、淋病菌及解脲支原體檢測的疑似泌尿生殖系統(tǒng)感染的患者進(jìn)行回顧性分析，對分泌物沙眼衣原體、淋病菌及解脲支原體檢測中應(yīng)用熒光探針法的價(jià)值展開分析，具體內(nèi)容如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

將2019 年1 月至2019 年12 月到我院進(jìn)行分泌物沙眼衣原體、淋病菌及解脲支原體檢測的疑似泌尿生殖系統(tǒng)感染的患者作為研究對象，實(shí)施回顧性分析，病例數(shù)量為80 例。所選取的80 例樣本均采取了熒光探針法。所有患者均在進(jìn)行抗生素治療前采樣。男性受試者26 例，女性受試者54 例，年齡16～47 歲，平均年齡（31.21±8.85）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）患者符合泌尿生殖系統(tǒng)感染的臨床癥狀表現(xiàn)；（2）患者無精神障礙類疾病，可以積極配合診斷檢查；（3）患者年齡≥16歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）患者年齡不足16 歲；（2）患者存在精神障礙；（3）患者是因?yàn)槠渌≡w造成的感染。

1.2 方法

全部患者都接受在抗生素治療前進(jìn)行了樣本采集，并使用了熒光探針法對分泌物沙眼衣原體、淋病菌及解脲支原體進(jìn)行了檢測。具體檢測過程如下：

（1）樣本采集：男性受試者使用無菌拭子在尿道口內(nèi)，女性受試者使用無菌拭子深入宮頸口內(nèi)，使用無菌拭子擦拭并停留1 分鐘后，將拭子進(jìn)入無菌生理鹽水或接種于培養(yǎng)基中。

（2）診斷使用儀器和試劑：熒光探針試劑盒選用上?？迫A生物工程有限公司生產(chǎn)的PCR 熒光探針試劑盒。培養(yǎng)基選購上海伊華醫(yī)學(xué)科技有限公司。

（3）熒光探法：使用熱裂解法提取分泌物中的沙眼衣原體、淋病菌及解脲支原體DNA，作為模板。使用試劑盒中含有熒光探針額引物進(jìn)行擴(kuò)增，反應(yīng)條件：在50℃進(jìn)行UNG酶處理2 分鐘，在93℃下進(jìn)行預(yù)變性2 分鐘，隨后在93℃下進(jìn)行變性10 秒鐘，在60℃下進(jìn)行退火、延伸以及檢測熒光30 秒，檢測通道為FAM，總共為40 個(gè)循環(huán)，最后讀取結(jié)果。

1.3 觀察指標(biāo)

對沙眼衣原體、淋病菌、解脲支原體檢出率進(jìn)行觀察。樣本循環(huán)閾值（cycle threshold，CT）≤37 為判定為陽性。

2 結(jié)果

結(jié)果顯示，沙眼衣原體、淋病菌、解脲支原體檢出率分別為13（16.25）、15（18.75）、28（35.00）。見表1。

表1 沙眼衣原體、淋病菌及解脲支原體的檢出率[n(%)]

3 討論

沙眼衣原體、淋病菌及解脲支原體檢測是性傳播疾病門診中的常見檢測病原體。當(dāng)人體在感染上述病原體后，第一時(shí)間獲得準(zhǔn)確的疾病診斷是十分必要的，越早確診，越早治療越好，對患者造成的影響就會(huì)越小。如果疾病診斷不準(zhǔn)確，或者檢出率較低的情況下，患者延誤最佳治療時(shí)機(jī)后，將對其生殖健康造成嚴(yán)重?fù)p傷[4]。尤其對于女性感染者而言，因?yàn)榕R床癥狀不明顯而很容易被漏診，臨床整體檢出率不是很高，延誤時(shí)間過長時(shí)可導(dǎo)致患者不孕。可看出選擇準(zhǔn)確又快速的檢測方法用于該類病原體感染篩查的重要性。目前，臨床上用來檢測沙眼衣原體、淋病菌及解脲支原體的方法很多，常用的有涂片法、免疫法、培養(yǎng)法等傳統(tǒng)方法，也包括比較先進(jìn)的熒光探針法。其中傳統(tǒng)檢測方法的特異性、敏感度都不是很高，并且檢測時(shí)間比較長，不是特別適合門診使用，具有一定的局限性，患者需要等候較長時(shí)間，不是很方便。熒光探針法作為一種先進(jìn)的沙眼衣原體、淋病菌及解脲支原體檢測法，彌補(bǔ)了傳統(tǒng)檢測方法的不足和缺陷，檢出效率高，通量高。熒光探針法就是一種在紫外-可見-近紅外區(qū)有特征熒光，并且其熒光性質(zhì)（激發(fā)和發(fā)射波長、強(qiáng)度、壽命、偏振等）可隨所處環(huán)境的性質(zhì)，如極性、折射率、粘度等改變而靈敏地改變的一類熒光性分子。主要用途是標(biāo)記檢測對象與目標(biāo)，分為熒光素類探針和無機(jī)離子熒光探針。是一種比較好的沙眼衣原體、淋病菌及解脲支原體檢測方法，檢測操作簡單、快速、準(zhǔn)確，具有較高的檢出率，目前在臨床上的應(yīng)用比較多，取得了非常好的檢測效果。所以，在臨床上，懷疑患有泌尿系統(tǒng)感染疾病的時(shí)候，為了提高診斷準(zhǔn)確率，應(yīng)該多使用熒光探針法。

在本次研究中結(jié)果顯示沙眼衣原體、淋病菌、解脲支原體檢出率分別為13（16.25）、15（18.75）、28（35.00）。表明在沙眼衣原體、淋病菌及解脲支原的檢出中，使用熒光探針法更為合適。采用熒光探針法檢測，能夠同時(shí)對多種病原體進(jìn)行檢測，實(shí)現(xiàn)了診斷上對便捷、快速的要求，避免了因?yàn)橥ㄟ^不同方式檢測不同病原體而需要患者取多分標(biāo)本的麻煩以及標(biāo)本間差異[5]。并且熒光探針法的產(chǎn)物不需要使用EB（溴化乙錠）進(jìn)行紫外觀察，檢測安全性得到了有效提升，并且該檢測方法對于檢測儀器的要求也降低，能夠更易普及化[6]。該種檢測方式僅僅在加樣時(shí)進(jìn)行1 次開蓋，后續(xù)均在封閉狀態(tài)下進(jìn)行操作，被污染而導(dǎo)致假陽性的可能性極小，確保了診斷的準(zhǔn)確性[7]。此外，我們發(fā)現(xiàn)陽性者主要集中在21～30 歲年齡段人群，但是20 歲以下陽性者占比也并不低，且最小者僅僅16 歲，這提示我們應(yīng)當(dāng)加強(qiáng)青少年、青壯年的相關(guān)健康教育，提高人們的性道德觀念、文化素質(zhì)和健康性行為知識(shí)，提升人們的自我保護(hù)意識(shí)。并且我們發(fā)現(xiàn)，雖然單種病原體感染患者居多，但也不能完全排除兩種及以上病原體感染情況，者進(jìn)一步體現(xiàn)了熒光探針法的優(yōu)勢。

綜上所述，熒光探針法可有效檢出沙眼衣原體、淋病菌，整體檢出率較高，基本上可以滿足門診診斷需求。因此，在分泌物沙眼衣原體、淋病菌及解脲支原體檢測中應(yīng)用熒光探針法對臨床診斷具有重要指導(dǎo)價(jià)值，是一種高效、可靠、易操作的檢測方式，值得臨床應(yīng)用與推廣。