賀小紅，王莉敏，喬曉亮，翟晶晶

(鄭州市婦幼保健院檢驗科，鄭州 450003)

未足月胎膜早破(preterm premature rupture of membranes，PPROM)指孕周<37周的孕婦胎膜破裂，屬于臨床常見產科并發(fā)癥[1]，易引起孕婦羊膜腔感染[2]、胎兒宮內窘迫、早產、新生兒感染[3]等不良后果。PPROM早期癥狀往往不明顯，在胎膜早破之前一般會發(fā)生絨毛膜羊膜炎[4]，因此可從檢測絨毛膜羊膜炎著手觀測，盡早發(fā)現，從而降低胎兒及孕婦并發(fā)癥[5]。目前臨床研究[6]表明，PPROM的發(fā)生除與細菌感染密切相關，還與炎癥反應有關。機體炎癥可使產婦血清中淀粉樣蛋白A(serum amyloid A，SAA)水平迅速升高；正常情況下孕婦體內血清降鈣素原(procalcitonin，PCT)表達水平非常低，當發(fā)生嚴重感染時其水平大幅度升高；孕婦白細胞介素-6(IL-6)水平升高[7]，可破壞羊膜，激活孕婦體內的溶酶體酶，導致胎膜早破[8]。本研究通過分析孕婦SAA、IL-6、PCT等感染指標的表達水平與胎膜早破、新生兒Apgar評分的關系，以期為臨床提供參考，報道如下。

1 對象與方法

1.1 對象 選取2017年7月—2019年7月鄭州市婦幼保健院婦產科PPROM孕婦和同期住院的正常孕婦，隨機分為觀察組和對照組，各30例。本研究經院倫理委員會批準，孕婦或家屬知情并簽署知情同意書。納入標準：①符合《婦產科學》[1]有關胎膜早破的診斷標準：陰道后穹窿液涂片檢查可見胎脂、胎毛或者胎兒上皮細胞；陰道宮頸消毒之后，在窺器直視下用手觸摸宮底見有羊水流出； pH值試驗呈堿性。②均為單胎妊娠。③入院前體溫正常。④無前置胎盤、妊娠高血壓、胎盤早剝、妊娠糖尿病等嚴重并發(fā)癥或并發(fā)癥。⑤臨床資料完整者。排除標準：①患有乳腺癌、宮頸癌等惡性腫瘤以及肝腎功能嚴重異常者。②合并其他妊娠并發(fā)癥。③無法配合研究者。2組孕婦年齡、孕周、產婦類型、產次、體質量指數(BMI)比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。見表1。

表1 2組孕婦一般資料比較

1.2 方法

1.2.1 檢測方法 絨毛膜羊膜組織采集：在孕婦分娩時，用棉棒擦取靠近宮頸口的胎盤胎膜組織，之后用體積4%甲醛固定，送至院病理科進行組織學檢查。(1)絨毛膜羊膜炎診斷標準：①經EM-30AX高倍電子顯微鏡(庫賽姆科技有限公司)觀測視野中有5～10個中性粒細胞，而白細胞呈極性分布。②胎盤絨毛膜板和羊膜上出現白細胞彌散性聚集。③絨毛膜羊膜炎診斷可以根據中性白細胞計數多少分為3級。Ⅰ級：5<中性白細胞計數<10個/高倍視野(HP)；Ⅱ級：11<中性白細胞計數<30個/HP；Ⅲ級：中性白細胞計數≥30個/HP。(2)感染指標檢測：2組孕婦在清晨空腹狀態(tài)或禁食8 h下采集外周靜脈血3 mL，置于離心管中，設置3 000 r·min-1后離心10 min，取上清液于-80 ℃冰箱凍存?zhèn)溆?。SAA測定采用膠體金法，金標數碼定量讀取儀(上海奧普生物醫(yī)藥有限公司)，試劑盒(上海奧普生物醫(yī)藥有限公司，規(guī)格：96T)，陽性診斷閾值為≥10 mg·L-1。采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測IL-6，人IL-6(ELISA)試劑盒(杭州MultiSciences公司,貨號70-EK106/2-96)，檢測范圍1.56～100.00 ng·L-1，靈敏度0.37 ng·L-1。PCT采用酶標儀(英國安圖斯，ANTHOS2010)測定，試劑盒(美國RDE公司，貨號DRE-L20243200CY)，PCT≥0.5 μg·L-1為陽性標準。所有操作均嚴格按照試劑盒要求進行。

1.2.2 觀察指標 比較2組孕婦破膜時間(≥24 h或<24 h)、新生兒Apgar評分、孕婦絨毛膜羊膜炎發(fā)生率對血清SAA、IL-6、PCT水平的影響。

2 結果

2.1 2組孕婦破膜時間≥24 h與破膜時間<24 h血清SAA、IL-6、PCT水平比較 2組孕婦破膜時間≥24 h與破膜時間<24 h時，觀察組血清SAA、IL-6、PCT水平均高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。2組孕婦破膜時間≥24 h的血清SAA、IL-6、PCT水平均高于破膜時間<24 h時的水平，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 2組孕婦破膜時間≥24 h與破膜時間<24 h血清SAA、IL-6、PCT水平比較

2.2 2組新生兒不同Apgar評分時血清SAA、IL-6、PCT水平比較 2組新生兒Apgar評分≥8與Apgar評分<7時，觀察組血清SAA、IL-6、PCT水平均高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。2組新生兒Apgar評分≥8時血清SAA、IL-6、PCT水平均低于Apgar評分<7時的水平，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 2組新生兒不同Apgar評分時血清SAA、IL-6、PCT水平比較

2.3 2組孕婦絨毛膜羊膜炎發(fā)生率比較 觀察組孕婦絨毛膜羊膜炎發(fā)生率高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(t=6.12，P=0.023)。見表4。

表4 2組孕婦絨毛膜羊膜炎發(fā)生率比較[n=30,n(%)]

3 討論

胎膜完整是正常妊娠的必要條件[9]。目前多數學者[10]認為，妊娠未足月時胎膜破裂可導致羊水外流、胎兒發(fā)育受限、發(fā)育空間縮小[11]，甚至引起生殖道逆行性感染，導致宮內壁受壓不均，誘使胎膜早破[12]，引發(fā)絨毛膜羊膜炎。國外已有研究[5]表明，絨毛膜羊膜炎是胎膜破裂的主要誘因，是對于孕婦危害極大的并發(fā)癥，因此，研究PPROM指標從檢測絨毛膜羊膜炎入手。目前臨床對于胎膜破裂沒有較好的檢測評估指標，考慮血清SAA、IL-6、PCT與機體內感染有關。

吳紅蓮等[13]研究表明，破膜時間越久，血清IL-6水平表達越高。王連云等[14]研究表明，當胎膜早破時，肝臟產生大量SAA、PCT進入血液系統(tǒng)，并隨著破膜時間的持續(xù)保持較高的濃度。本研究結果顯示，在2組孕婦中，觀察組血清SAA、IL-6、PCT水平均高于對照組。2組新生兒Apgar評分≥8與Apgar評分<7比較，觀察組新生兒血清SAA、IL-6、PCT水平均高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義。2組新生兒Apgar評分≥8時血清SAA、IL-6、PCT水平均低于Apgar評分<7時的水平，差異有統(tǒng)計學意義，表明血清SAA、IL-6、PCT的表達對PPROM孕婦和新生兒均有影響。在胎膜早破發(fā)生時，病原菌上行感染，刺激胎膜和蛻膜產生大量IL-6，IL-6是由兩種細胞共同產生的細胞因子，調節(jié)宿主防御感染，可全程參與妊娠過程，監(jiān)測其水平對于預測胎膜早破有一定的作用[15]。隨著炎癥加重以及破膜時間延長，白細胞聚集增加，IL-6釋放會進一步增加。SAA是由肝臟產生的多態(tài)性蛋白，與絨毛膜羊膜炎的發(fā)生有關[16]，PCT屬于蛋白質，其水平高低反映全身炎癥反應的活躍程度[17]，和SAA相似，當機體發(fā)生炎癥反應時可在短時間內迅速升高，且隨破膜時間延長，其含量也隨之增加，表明其濃度與感染的嚴重程度相關。黃麗嬌等[18]發(fā)現，PPROM孕婦逆行性宮內感染能誘導血清IL-6水平上升，一定程度上會促使炎癥反應加重，故外周血IL-6對PPROM存在一定預測價值。馮冠男等[17]研究發(fā)現，PCT是評估胎兒和新生兒感染炎癥的最佳指標。本研究結果顯示，觀察組血清SAA、IL-6、PCT水平均高于對照組，觀察組絨毛膜羊膜炎發(fā)生率高于對照組，進一步證明血清SAA、IL-6、PCT水平對PPROM的影響。其原因可能是由于胎膜早破合并絨毛膜羊膜炎引起孕婦體內輕微的炎癥反應，呈現出感染狀態(tài)，孕婦體內血清SAA、IL-6、PCT均會快速產生。

綜上所述，孕婦血清SAA、IL-6、PCT的表達水平受到PPROM的影響，與有其相關性，血清SAA、IL-6、PCT水平隨著破膜時間的增加而增加、隨著機體內炎癥感染加重而增加，可對孕婦及新生兒產生不良影響，降低新生兒Apgar評分，同時可檢測出絨毛膜羊膜炎的發(fā)生，所以可以作為監(jiān)測PPROM的指標。但本研究采用的樣本量偏少，今后應當加大樣本量，進行多地域研究，以期為臨床PPROM檢測提供相關參考。