王 玨，陳 靜，王 釗

（靖江市人民醫(yī)院病理科 江蘇 靖江 214500）

宮頸癌是最常見的女性惡性腫瘤之一，惡性程度高、侵襲性強、預(yù)后差，死亡率僅次于乳腺癌[1]。近年來，腫瘤標志物在診斷惡性腫瘤及預(yù)測其預(yù)后的應(yīng)用價值越來越引起重視。基于此，本研究探討UBE2T（泛素結(jié)合酶E2T）、FANCD2（范科尼貧血互補群D2）、USP1（泛素特異肽酶1）在宮頸癌組織中的表達以及臨床意義。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取2015 年1 月—2018 年1 月期間于我院行廣泛性子宮切除術(shù)的40 例宮頸鱗癌患者、120 例CIN 患者（低度病變、高度病變各60 例）、40 例正常宮頸的子宮肌瘤患者為研究對象。

符合以下標準的宮頸鱗癌細胞癌患者納入本次研究：（1）病理學確診為宮頸鱗狀細胞癌的初診患者；（2）未經(jīng)過放療和化療治療；（3）首次手術(shù)為經(jīng)腹宮頸癌根治術(shù)；（4）臨床資料完整。

符合以下標準的CIN 患者納入本次研究：（1）初始病交為LSIL 和HSIL 病變，即宮頸上皮內(nèi)瘤變（Cervical Intraepithelial Neoplasia，CIN 1，CIN 2 或CIN 3）；（2）接受宮頸錐切手術(shù)；（3）臨床資料完整。

符合以下標準的患者納入本次研究作為對照：（1）因子宮多發(fā)肌瘤或子宮脫垂行子宮全切術(shù)的患者；（2）術(shù)前人乳頭狀瘤病毒（human papillomavirus，HPV）陰性，并且液基薄層細胞檢測（Thinprep Cytologic test，TCT）正常；（3）臨床資料完整。

相關(guān)操作均獲得患者知情同意，排除既往宮頸有贅生物史、有免疫缺陷型疾病。三組患者的年齡無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）。

1.2 方法

將取得的宮頸正常組織、CIN 低度病變、CIN 高度病變以及宮頸癌患者宮頸組織經(jīng)10%中性福爾馬林浸泡后采用石蠟包埋，制作切片，厚度為4 μm?？靖珊髮ο鄳?yīng)的切片編號，選擇相應(yīng)的試劑盒行免疫組化染色，本實驗所用標本均收集來自本院病理科病理檢查標本，進行HE 染色和SP 染色實驗。檢測UBE2T、FANCD2、USP1 在宮頸癌組織中的表達水平。

1.3 統(tǒng)計學處理

采用SPSS 20.0 統(tǒng)計軟件，計數(shù)資料采用[n（%）]表示，比較采用卡方檢驗，CDK8、Ki-67、P53 相關(guān)性采用Pearson 相關(guān)性分析，以P＜0.05 認為差異有統(tǒng)計學意義。

2.結(jié)果

2.1 FANCD2 在宮頸癌、CIN 中的表達情況

正常宮頸組織幾乎無FANCD2 陽性細胞，CIN 低度病變中有散在陽性細胞表達，CIN 高度病變較正常宮頸組織陽性細胞增多，而宮頸癌組織中明顯加深（見圖1 所示）。CIN 低度病變的FANCD2 與正常宮頸組織無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）。CIN 高度病變的FANCD2 高于正常宮頸組織，宮頸癌組織FANCD2 高于CIN 高度病變，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

圖1 FANCD2 免疫組化情況

a,b,c,d 分別是FANCD2 陽性細胞在宮頸癌組，宮頸高級別上皮內(nèi)瘤樣病變、宮頸低級別上皮內(nèi)瘤變、正常宮頸組織表達情況。

2.2 UBE2T、FANCD2、USP1 在各宮頸組織中的陽性率比較

UBE2T、FANCD2、USP1 在宮頸癌組中的表達高于CIN 高級病變組，CIN 高級病變組的UBE2T、FANCD2、USP1 表達高于正常宮頸組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。三者在正常宮頸與CIN 低度病變中的表達以及CIN 低度病變組與高度病變組的表達均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表1。

表1 UBE2T、FANCD2、USP1 在各宮頸組織中的表達情況

2.3 UBE2T、FANCD2、USP1 與宮頸癌臨床病理參數(shù)的相關(guān)性

FANCD2 在宮頸癌中的表達與HPV 感染有關(guān)，UBE2T與細胞分化、HPV 感染有關(guān)，USP1 與臨床分期、HPV 感染有關(guān)，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 UBE2T、FANCD2、USP1 與宮頸癌臨床病理參數(shù)的相關(guān)性[n（%）]

2.4 UBE2T、FANCD2、USP1 在宮頸癌表達中的相關(guān)性分析

相關(guān)性分析顯示，宮頸癌組織中的FANCD2 與UBE2T呈正相關(guān)（r=0.522，P=0.001），與USP1 呈正相關(guān)（r=9.143，P=0.004），USP1 與UBE2T 呈正相關(guān)（r=7.298，P=0.001）。

3.討論

宮頸癌早期階段幾乎無癥狀，而到了中晚期可以通過常規(guī)篩查或是盆腔檢查來進行確診，比較簡單，患者的臨床表現(xiàn)大部分是陰道大出血[2]。早期發(fā)現(xiàn)宮頸癌，臨床上可以通過手術(shù)切除和同步放化療來達到臨床上的治愈，而發(fā)展到中晚期，則臨床治療效果和預(yù)后不好，也因此，早期診斷和治療能夠?qū)m頸癌患者的預(yù)后有著重要的改善作用。近年來，一直在尋找特異度和敏感度較高的宮頸癌分子標志物，這樣才能夠?qū)m頸癌早期診斷有更好的幫助，進而提高宮頸癌的治療效率[3]。

FANCD2 基因在宮頸癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移中的作用和機制被多項研究證實[4]，有研究認為FANCD2 去泛素化障礙同樣可以使FA 通路失活，導(dǎo)致DNA 鏈間得不到修復(fù)，從而誘導(dǎo)宮頸癌的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移；UBE2T 是泛素偶聯(lián)酶之一，新近被發(fā)現(xiàn)，在很多腫瘤中常見，正常情況下，其在ATP 條件下能夠結(jié)合酶E2 的產(chǎn)生發(fā)生促進作用，并介導(dǎo)蛋白質(zhì)物質(zhì)導(dǎo)致相應(yīng)底物分子的降解，一旦功能改變，就會破壞上述酶的編碼，從而導(dǎo)致惡性腫瘤的發(fā)生；泛素特異肽酶1（USP1）是一種泛素特異的半胱氨酸蛋白酶，它連同其輔助因子UAF1 共同介導(dǎo)FANCD2 的去泛素化。FANCD2 的去泛素化對于維持FA 通路的正常功能同樣重要[5]。本次研究探討UBE2T、FANCD2、USP1 在宮頸癌中的表達情況，并分析其發(fā)生機制是有著重要價值的。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，隨著病情嚴重程度的增加，UBE2T、FANCD2、USP1 的陽性表達率均有逐漸升高的趨勢。相關(guān)性分析顯示，宮頸癌組織中的FANCD2 與UBE2T,USP1 呈正相關(guān)，USP1 與UBE2T 呈正相關(guān)（P＜0.05）。

綜上所示，宮頸癌患者的UBE2T、FANCD2、USP1 表達率較高，三者均有助于預(yù)測宮頸病變，且在宮頸癌的發(fā)生過程中可能存在協(xié)同作用。