秦友華 張兆琴 龔畢寶 宿吉峰

(陜西省石泉縣蠶種場(chǎng)，陜西石泉 725200)

蠶桑產(chǎn)業(yè)一直是石泉縣的主導(dǎo)產(chǎn)業(yè)，是全縣富民強(qiáng)縣的功勛產(chǎn)業(yè)，尤其在脫貧攻堅(jiān)工作中對(duì)貧困戶產(chǎn)業(yè)增收致富發(fā)揮著巨大作用。隨著近年來極端氣候頻發(fā)，石泉縣夏秋季蠶病發(fā)生率越來越高，甚至有的村上大面積爆發(fā)，蠶農(nóng)顆粒無收，嚴(yán)重影響蠶農(nóng)養(yǎng)蠶的積極性。2012年以來石泉縣蠶種場(chǎng)優(yōu)化全縣蠶品種結(jié)構(gòu)，夏秋季全縣飼養(yǎng)兩廣二號(hào)替代春秋兼用品種871×872，大幅降低了蠶病發(fā)生率，提高了蠶繭質(zhì)量。但是，生產(chǎn)實(shí)踐中兩廣二號(hào)越年種多次發(fā)生蠶種孵化不齊、孵化率低問題，導(dǎo)致生產(chǎn)用種直接報(bào)廢，給蠶種場(chǎng)造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失。為了解和掌握兩廣二號(hào)蠶種的冷藏時(shí)間與孵化率、千卵粒重變化的關(guān)系，筆者于2018年、2019年進(jìn)行了兩廣二號(hào)越年種冷藏天數(shù)對(duì)其實(shí)用孵化率的影響試驗(yàn)，分析冷藏天數(shù)與孵化率及千粒卵重變化的相關(guān)性，探討兩廣二號(hào)春制越年種與秋制種的冷藏期限，以期對(duì)改進(jìn)蠶種生產(chǎn)、保護(hù)工藝提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

兩廣二號(hào)(正反交)、皓月×菁松一代雜交種，均為石泉縣蠶種場(chǎng)繁育的越年種。

1.2 試驗(yàn)方法

將本場(chǎng)2017年春制兩廣二號(hào)正交、兩廣二號(hào)反交、皓月×菁松一代雜交種按照常規(guī)復(fù)式冷藏方法入庫保護(hù)，2018年分階段分別抽取冷藏0 d、79 d、111 d、142 d、146 d、150 d、153 d、156 d、159 d、162 d、165 d、168 d、171 d的以上品種各3 g，按品種對(duì)應(yīng)冷藏天數(shù)分成3個(gè)重復(fù)區(qū)，每區(qū)1 g，清點(diǎn)各區(qū)卵粒數(shù)，采用兩段式簡(jiǎn)化催青方法分次催青，蠶種轉(zhuǎn)青后黑暗保護(hù)至次日早6：00感光孵化：①催青開始前，調(diào)查各品種入庫前和入庫后各處理區(qū)千粒卵重，進(jìn)行各品種冷藏天數(shù)與千粒卵重變化的相關(guān)性分析；②蠶卵孵化二日后，調(diào)查各品種冷藏79 d、111 d、142 d、146 d、150 d、153 d、156 d、159 d、162 d處理區(qū)的實(shí)用孵化率，對(duì)處理區(qū)孵化率反正弦轉(zhuǎn)換數(shù)據(jù)進(jìn)行相關(guān)性分析。孵化率調(diào)查方法按照農(nóng)業(yè)部頒發(fā)的一代雜交種檢驗(yàn)操作規(guī)程(NY/T327-1997)進(jìn)行。

2)將本場(chǎng)2018年春季、2018年秋季繁育的兩廣二號(hào)正反交品種按照常規(guī)復(fù)式冷藏方法入庫保護(hù)，2019年分階段分別抽取冷藏79 d、111 d、142 d、162 d兩廣二號(hào)正反交品種各3 g，按品種對(duì)應(yīng)冷藏天數(shù)分成3個(gè)重復(fù)區(qū)，每區(qū)1 g，清點(diǎn)各區(qū)卵粒數(shù)，采用兩段式簡(jiǎn)化催青方法分次催青，蠶種轉(zhuǎn)青后黑暗保護(hù)至次日早6：00感光孵化，2日后調(diào)查實(shí)用孵化率。將實(shí)用孵化率數(shù)據(jù)反正弦轉(zhuǎn)換后按繁育期、冷藏時(shí)間及二因素互作進(jìn)行顯著性分析檢驗(yàn)，并對(duì)差異顯著的因素進(jìn)行平均數(shù)多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 冷藏時(shí)間對(duì)蠶卵重量的影響

兩廣二號(hào)(正反交)、皓月×菁松千粒卵重的變化調(diào)查及相關(guān)系數(shù)顯著性檢驗(yàn)見表1-2。

從表1、表2可知，兩廣二號(hào)(正交)、兩廣二號(hào)(反交)、皓月×菁松冷藏入庫時(shí)蠶卵千粒卵重分別為0.505 g、0.497 g、0.558 g，隨著冷藏時(shí)間延長(zhǎng)，蠶卵重量均逐漸減輕，冷藏171日(6月30日)后其千粒卵重分別下降至0.473 g、0.470 g、0.548 g。經(jīng)相關(guān)分析，相關(guān)系數(shù)分別為-0.6346、-0.729、-0.4631，經(jīng)F值顯著性檢驗(yàn)，兩廣二號(hào)(正交)差異性顯著，兩廣二號(hào)(反交)差異性極顯著，皓月×菁松差異性不顯著。

表1 不同品種不同冷藏時(shí)間的千粒卵重調(diào)查

表2 冷藏時(shí)間對(duì)不同蠶品種卵粒重相關(guān)系數(shù)顯著性檢驗(yàn)

2.2 冷藏時(shí)間對(duì)蠶種孵化率的影響

兩廣二號(hào)(正反交)、皓月×菁松不同冷藏時(shí)間下的孵化率調(diào)查及相關(guān)系數(shù)顯著性檢驗(yàn)見表3-4。

從表3、表4可知，在標(biāo)準(zhǔn)溫度冷藏保護(hù)中，不同品種對(duì)冷藏期限表現(xiàn)不同效果，皓月×菁松冷藏162 d(6月21日)孵化率達(dá)98.57%，仍達(dá)到農(nóng)業(yè)部桑蠶一代雜交種行業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)(NY/326-1997)越年種實(shí)用孵化率≥90%的要求，與春季3月30日(冷藏79 d)孵化率調(diào)查相差不大，完全可以滿足蠶桑生產(chǎn)需要，而兩廣二號(hào)正反交品種的孵化率隨冷藏時(shí)間延長(zhǎng)逐漸下降，142 d(6月1日)孵化率分別為81.07%、71.37%，冷藏162 d時(shí)孵化率分別下降至71.23%、58.37%，按照桑蠶一代雜交種行業(yè)及企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，這兩批蠶種不能用于夏蠶生產(chǎn)。經(jīng)孵化率數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換后的相關(guān)分析，3個(gè)批次兩廣二號(hào)(正交)、兩廣二號(hào)(反交)、皓月×菁松的相關(guān)系數(shù)分別為-0.9360、-0.9497、-0.3521，相關(guān)系數(shù)顯著性檢驗(yàn)，3個(gè)批次兩廣二號(hào)(正交)、兩廣二號(hào)(反交)、皓月×菁松的F值分別為：49.495、64.3777、0.9906，兩廣二號(hào)(正交)、兩廣二號(hào)(反交)差異極顯著，皓月×菁松差異不顯著，說明含多化性血液品種耐冷藏性差，不利于長(zhǎng)期冷藏。

表3 不同品種不同冷藏時(shí)間的實(shí)用孵化率調(diào)查

表4 冷藏時(shí)間對(duì)不同蠶品種孵化率的相關(guān)系數(shù)顯著性檢驗(yàn)

2.3 蠶種繁育期與冷藏時(shí)間的關(guān)系

春制、秋制兩廣二號(hào)正反交品種常規(guī)復(fù)式冷藏后的孵化率調(diào)查結(jié)果見表5-7。

從表5、表6可知，春制、秋制兩廣二號(hào)冷藏79 d平均孵化率分別為98.2%、98.4%，隨著冷藏時(shí)間延長(zhǎng)，春制兩廣二號(hào)孵化率逐漸下降，冷藏142 d時(shí)時(shí)平均孵化率下降至76.2%，冷藏162 d平均孵化率下降至64.8%，生產(chǎn)中必須淘汰；秋制兩廣二號(hào)冷藏至162 d平均孵化率仍有97.7%，下降幅度不大，達(dá)到行業(yè)及企業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，夏蠶種完全可以使用。經(jīng)孵化率數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換后差異顯著性分析，繁育時(shí)期、冷藏時(shí)間及二因素交互作用均為差異極顯著。

表5 繁育時(shí)期與冷藏時(shí)間二因素孵化率調(diào)查表

表6 冷藏時(shí)間、繁育期二因素方差分析表

由表7可知，B1、B2差異不顯著，與B3、B4差異極顯著，B3與B4差異極顯著，進(jìn)一步對(duì)不同處理組合平均數(shù)采用SSR法多重比較，由表9可知，A2B1、 A2B2、A1B1、A2B3、A1B2、A2B4差異不顯著，與A1B3、A1B4差異極顯著，A1B3與A1B4差異極顯著,說明秋制兩廣二號(hào)安全冷藏期可達(dá)162 d，春制兩廣二號(hào)安全冷藏期只有111 d，即：春制兩廣二號(hào)越年種只可翌年春用，不可翌年夏用，秋制兩廣二號(hào)蠶種可以冷藏至翌年夏季使用[1]。

表7 不同處理組合平均數(shù)多重比較(SSR法)

3 小結(jié)與討論

3.1 冷藏時(shí)間對(duì)蠶種質(zhì)量的影響

千粒卵重是衡量蠶種質(zhì)量?jī)?yōu)劣的指標(biāo)之一。試驗(yàn)結(jié)果表明，兩廣二號(hào)千粒卵重與與冷藏時(shí)間呈負(fù)相關(guān)，反交千粒卵重隨冷藏時(shí)間延長(zhǎng)顯著性減小，而皓月×菁松千粒卵重與冷藏時(shí)間相關(guān)不顯著。兩廣二號(hào)蠶卵小，可能是貯存的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)較皓月×菁松少，加之兩廣二號(hào)越冬解除滯育早，蠶卵內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消耗比皓月×菁松快，所以兩廣二號(hào)蠶種冷藏時(shí)蠶卵重量減輕幅度較皓月×菁松大。千粒卵重的變化反映了蠶卵內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗情況，必然對(duì)蠶種的孵化造成一定的影響，千粒卵重與孵化率之間的變化關(guān)系有待進(jìn)一步研究。

3.2 冷藏時(shí)間對(duì)蠶種孵化率的影響

實(shí)用孵化率即二日孵化率是衡量蠶種質(zhì)量?jī)?yōu)劣的重要指標(biāo)。試驗(yàn)結(jié)果表明，兩廣二號(hào)孵化率與冷藏時(shí)間呈負(fù)相關(guān)，隨著冷藏時(shí)間的延長(zhǎng)，孵化率逐漸下降，其反交種孵化率下降更為明顯，而皓月×菁松品種幾乎不受影響，在現(xiàn)行實(shí)用孵化率≥90%的生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)下，本試驗(yàn)兩廣二號(hào)春制越年種冷藏安全期為111 d,秋制種冷藏安全期為162 d。兩廣二號(hào)為上世紀(jì)九十年代廣東、廣西蠶區(qū)選育的夏秋用四元雜交種，我國南方地區(qū)桑樹發(fā)芽開葉早，一年可多批次養(yǎng)蠶，越年種無需長(zhǎng)時(shí)間冷藏。兩廣二號(hào)含有多化性血緣[2]，抗高溫，越年種滯育期短，北方引種繁育后應(yīng)掌握好冷藏期限，防止超期冷藏造成蠶種孵化率下降，給蠶桑生產(chǎn)帶來迎頭損失。

3.3 兩廣二號(hào)春制越年種與秋制種用種問題

一般地，春制種可以通過即時(shí)浸酸、冷藏浸酸滿足當(dāng)年夏蠶種、秋蠶種的生產(chǎn)需要，春制越年種和秋制種可以為翌年提供生產(chǎn)用種。本試驗(yàn)結(jié)果表明，兩廣二號(hào)繁育期、冷藏時(shí)間的差異極顯著，二因素交互作用的差異極為顯著，也就是說春制越年種不如秋制種耐冷藏，兩廣二號(hào)春制越年種只可翌年春用，不可翌年夏用，兩廣二號(hào)秋制越年種可以冷藏至翌年夏季使用。2018年起，石泉縣蠶種場(chǎng)結(jié)合品種特性及氣候特點(diǎn)，采用多批次繁育蠶種模式，即：春季以生產(chǎn)菁松×皓月為主，晚春或夏季繁育兩廣二號(hào)作為即時(shí)浸酸早秋用種，秋季繁育兩廣二號(hào)翌年夏季用種的模式，縮短蠶種冷藏時(shí)間，大幅提高了兩廣二號(hào)蠶種的孵化率，降低蠶種生產(chǎn)成本的同時(shí)還減輕了冷藏浸酸蠶種計(jì)劃失調(diào)而報(bào)廢蠶種的風(fēng)險(xiǎn)。