劉莉 溫曉紅

新生兒呼吸窘迫綜合征(neonatal respiratory distress syndrome，NRDS)是指出生后由于缺乏肺表面活性物質(zhì)(pulmonary surfactant，PS)等因素造成的具有進行性加重特征的呼吸窘迫，常見于早產(chǎn)兒。國內(nèi)一項研究數(shù)據(jù)顯示：NRDS中胎齡24～27周新生兒占5.9%(12/204)，28～31周占比24%(49/204)，32～36周占比34.3%(70/204)，而足月兒僅占35.8%(73/204)[1]。近年來在PS應用、通氣方式改進等背景下，NRDS患兒的整體預后得到一定改善。但仍有部分存活的早產(chǎn)兒并發(fā)支氣管肺發(fā)育不良、肺損傷等，嚴重危及生存質(zhì)量。故早期診斷與評估，對臨床針對性防治至關重要。相關研究證實：炎癥、內(nèi)皮因子與NRDS病理生理關系密切[2]。白介素-17(interleukin-17，IL-17)是分泌自Th17細胞的促炎因子，近期研究[3]發(fā)現(xiàn)其在急性呼吸窘迫(acute respiratory distress dyndrome，ARDS)患者中與預后相關。E-選擇素(E-selectin，CD62E)是能夠介導炎性反應的內(nèi)皮細胞特有選擇素，動物實驗[4]發(fā)現(xiàn)其參與肺微血管內(nèi)皮炎癥。但目前關于CD62E、IL-17與NRDS早產(chǎn)兒的研究少有報道。本研究旨在探討早產(chǎn)兒NRDS中血清CD62E、IL-17表達水平及其與發(fā)病風險、病情程度的關系，為臨床診治提供依據(jù)?，F(xiàn)報告如下。

資料與方法

一、研究對象

選取2017年1月～2019年12月本院診治的NRDS早產(chǎn)兒78例為NRDS組。納入標準：① NRDS診斷符合《實用新生兒學》[5]中的標準，生后12 h內(nèi)進行性呼吸困難；② 單胎早產(chǎn)兒，胎齡28～35周；③家屬知情同意。排除標準：① 宮內(nèi)感染；② 乙肝表面抗原(+)，或長時間應用免疫抑制劑的孕產(chǎn)婦所生產(chǎn)的嬰兒；③ 先天性心臟疾病、染色體異常、中樞神經(jīng)系統(tǒng)畸形、遺傳疾病、呼吸系統(tǒng)畸形的早產(chǎn)兒。同時選取無NRDS的60例早產(chǎn)兒為對照組，胎齡28～35周，均排除先天性疾病、染色體異常、中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病、感染性疾病。

二、方法

檢測方法：新生兒在出生后24 h內(nèi)(NRDS患兒于治療前)均采集靜脈血2 mL，離心提取血清-80 ℃存留待測。采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗完成血清CD62E(試劑盒源自上?？祈樕锟萍脊?、IL-17(試劑盒源自江蘇晶美生物科技公司)含量，每樣本均設置復孔，完成標準曲線的繪制，統(tǒng)計指標表達量。

NRDS早產(chǎn)兒病情判定[6]：依據(jù)新生兒治療前胸片檢查結果進行分級判定。輕度：雙肺呈現(xiàn)低透光度，有清晰心影，全肺陰影表現(xiàn)為細小顆粒、網(wǎng)狀(Ⅰ級)。中度：病變擴展至肺野中外區(qū)域，支氣管充氣征可見(Ⅱ級)；雙肺磨玻璃樣，明顯的透光度降低，心緣、橫隔部分模糊影(Ⅲ級)。重度：明顯的 支氣管充氣征加重(猶如禿葉樹枝)，重則出現(xiàn)肺野呈“白肺”。

表1 兩組基線資料比較

三、觀察指標

觀察NRDS組中血清CD62E、IL-17水平與對照組的對比結果，分析CD62E、IL-17對早產(chǎn)兒NRDS的影響及其診斷價值；比較不同病情的NRDS患兒CD62E、IL-17水平，分析CD62E、IL-17與病情的相關性。

四、統(tǒng)計學分析

結 果

一、 兩組基線資料比較

基線資料在二組間比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)(見表1)。

二、兩組血清CD62E、IL-17表達比較

NRDS組血清CD62E、IL-17水平高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)(見表2)。

表2 兩組血清CD62E、IL-17表達比較

三、Logistic回歸分析結果

以早產(chǎn)兒有無發(fā)生NRDS為因變量(統(tǒng)計賦值：有=1，無=0)，以CD62E、IL-17為自變量，Logistic分析結果顯示：CD62E、IL-17是早產(chǎn)兒發(fā)生NRDS的獨立危險因素(P<0.05)(見表3)。

四、CD62E、IL-17診斷早產(chǎn)兒NRDS的價值

ROC曲線顯示，CD62E、IL-17診斷早產(chǎn)兒NRDS的AUC(95%CI)為0.836(95%CI=0.770～0.902)、0.732(95%CI=0.645～0.819)(均>0.7)；CD62E敏感度、特異度依次為75.6%、81.7%，IL-17依次為56.4%、98.3%；CD62E、IL-17最佳臨界值為24.5ng/mL、102.5ng/L。兩項聯(lián)合診斷的AUC(95%CI)為0.875(95%CI=0.815～0.934)，敏感度、特異度依次為78.2%、91.7%(見表4、圖1、2)。

圖1 CD62E、IL-17診斷早產(chǎn)兒NRDS的ROC曲線

圖2 CD62E聯(lián)合IL-17診斷早產(chǎn)兒NRDS的ROC曲線

表3 CD62E、IL-17影響早產(chǎn)兒發(fā)生NRDS的Logistic結果

表4 CD62E、IL-17及兩項聯(lián)合診斷早產(chǎn)兒NRDS的ROC曲線結果

五、不同病情程度NRDS早產(chǎn)兒血清CD62E、IL-17比較

中度、重度NRDS早產(chǎn)兒血清CD62E、IL-17水平高于輕度患兒，且重度患兒CD62E、IL-17水平高于中度患兒，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)(見表5、6)。

六、CD62E、IL-17與早產(chǎn)兒NRDS病情程度的相關性

Pearson相關性結果顯示，CD62E、IL-17與早產(chǎn)兒NRDS病情程度均正相關(r=0.671、0.747，P<0.05)(見圖3)。

表5 不同病情程度NRDS早產(chǎn)兒血清CD62E、IL-17比較

表6 不同病情程度組CD62E、IL-17比較的LSD-t檢驗結果

圖3 CD62E、IL-17與早產(chǎn)兒NRDS病情程度的相關性

討 論

NRDS早產(chǎn)兒在炎癥、內(nèi)毒素等各損害因素下會出現(xiàn)內(nèi)皮細胞活化，而CD62E能夠反映炎癥的早期階段，故在該過程中作為其特有選擇素的CD62E含量增加，且由于炎癥反應關鍵途徑在于白細胞黏附內(nèi)皮細胞，因此CD62E在該炎癥過程中起重要作用[7-8]。本研究顯示：NRDS組血清CD62E較對照組高，CD62E是NRDS發(fā)病的風險因子。究其原因，CD62E在誘導蛋白酶、氧自由基釋放的同時，還介導白細胞與血管壁的黏附，通過相互作用效應，進一步生成大量炎性介質(zhì)，造成內(nèi)皮損害、肺內(nèi)滯留中性粒細胞、組織水腫等，參與NRDS病理生理過程[9-10]。江蘇省新生兒ARDS研究協(xié)作組[11]通過一項肺損傷生物學標志物的研究發(fā)現(xiàn)：CD62E在ARDS患者血液中的表達明顯上升，能夠反映肺損傷。本研究則進一步發(fā)現(xiàn)：CD62E對早產(chǎn)兒NRDS有診斷價值(AUC為0.836，95%CI=0.770～0.902，敏感度、特異度75.6%、81.7%，最佳臨界值24.5 ng/mL)。這對臨床早期輔助診斷具有客觀應用價值。鄧笑偉等[12]研究表明：隨患者呼吸功能狀態(tài)加重，CD62E濃度升高，提示CD62E有助于反映呼吸系統(tǒng)疾病的嚴重程度。本研究血清CD62E水平在NRDS重度組>中度組>輕度組。且CD62E與NRDS病情正相關，證實了CD62E對NRDS早產(chǎn)兒病情評估有一定作用，可幫助臨床早期檢測，盡早采取措施防治，有利于病情逆轉。

IL-17作為前炎癥細胞因子已被證實其表達上升與哮喘、關節(jié)炎等關系密切[13]。近期研究發(fā)現(xiàn)：IL-17家族成員IL-17A在ARDS肺泡炎癥中濃度增高，且與病情進展、28d預后有關[14]。故推測IL-17可能與NRDS有關。本研究顯示：NRDS組血清IL-17較對照組高，IL-17是NRDS發(fā)病的風險因子。究其原因，IL-17可激活炎性反應，促使中性粒細胞大量匯聚及炎癥因子分泌，進而損害上皮、內(nèi)皮，增大肺泡-動脈氧分壓差，增加組織細胞通透性，影響氧合功能[15]；另一方面考慮也與IL-17參與炎性浸潤、肺泡組織損傷有關[16]。本研究ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)IL-17對早產(chǎn)兒NRDS有診斷價值，AUC為0.732，95%CI=0.645～0.819，敏感度、特異度56.4%、98.3%，最佳臨界值102.5 ng/L；且IL-17聯(lián)合CD62E診斷的AUC(95%CI)為0.875(95%CI=0.815～0.934)，敏感度78.2%、特異度91.7%；同時發(fā)現(xiàn)IL-17與早產(chǎn)兒NRDS病情程度正相關。說明IL-17具有輔助診斷作用，且聯(lián)合CD62E可提高診斷價值，同時IL-17具有評估病情的作用，這對臨床適時、合理選擇防治方案具有指導意義。雖然IL-17敏感度相對低，但其對內(nèi)皮、上皮細胞及白細胞、成纖維細胞等細胞的合成方面，均具有促進性效應，同時又可激活特異免疫反應[17]，增加炎癥損害，故其特異性不容忽視。細胞學實驗發(fā)現(xiàn)：重組IL-17對肺泡上皮細胞(體外培養(yǎng))有破壞性影響，可增加其通透性[18]。且有資料顯示IL-17可預測呼吸窘迫預后[19]。故IL-17可能成為NRDS新的潛在生物標記物。

綜上所述，血清CD62E、IL-17在NRDS早產(chǎn)兒中呈相對高表達，CD62E、IL-17水平增高的早產(chǎn)兒發(fā)生NRDS的風險更大，且CD62E、IL-17在NRDS中具有診斷價值與病情評估價值，具有重要監(jiān)測意義。